多肽、PD-L1单域抗体、核苷酸序列及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种多肽、PD‑L1单域抗体、核苷酸序列及试剂盒，其中，该多肽序列如下：Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ala Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Cys Glu Leu Val Ala Thr Ile Thr Ser Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Glu Tyr Tyr Cys Asn Ala Glu Ser Ser Thr Thr Gly Trp Gly Thr Ile Cys Asp Ala Leu Asp Ala Phe Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser。本发明专利技术技术方案通过结合基因工程的方法得到一种特异性结合PD‑L1蛋白的单域抗体，该抗体特异性结合PD‑L1蛋白的活性高，表达量高，成本低，易改造。

Peptide, PD-L1 Single Domain Antibody, Nucleotide Sequence and Kit

【技术实现步骤摘要】
多肽、PD-L1单域抗体、核苷酸序列及试剂盒
本专利技术涉及基因工程
，特别涉及一种多肽、PD-L1单域抗体、核苷酸序列及试剂盒。
技术介绍
程序性死亡分子受体1(programmeddeath1，PD-1)属于CD28/CTLA-4家族，是一种I型跨膜受体蛋白，由268个氨基酸组成，包括胞内区、跨膜区以及胞外免疫球蛋白可变区。在胞内区中有两个独立的磷酸化位点，分别为N端的免疫受体酪氨酸转换基序(ITSM)以及c端的免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)，可通过T细胞抗原和细胞因子受体进行激活，具有调节T细胞间抑制性信号传导的作用。PD-1主要在激活的T细胞和B细胞中表达，功能是抑制细胞的激活，这是免疫系统的一种自稳机制，避免过度的T/B细胞激活会引起自身免疫病。然而，肿瘤微环境会诱导浸润的T细胞高表达PD-1分子。肿瘤细胞会诱导微环境中PD-1通路持续激活，抑制T细胞功能，导致其无法杀伤肿瘤细胞，从而实现肿瘤细胞的免疫逃逸。而该通路的拮抗剂——例如PD-1的抗体可以阻断这一通路，部分恢复T细胞的功能，使T细胞能够对肿瘤细胞进行杀伤。然而，现有技术中的PD-1抗体亲和力尚不足，表达量也很低。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提供一种多肽序列，旨在提高PD-L1抗体的活性。为实现上述目的，本专利技术提出一种多肽，序列如下：GluValGlnLeuValGluSerGlyGlyGlyLeuAlaGlnProGlyGlySerLeuArgLeuSerCysAlaAlaSerGlyPheAlaPheSerSerTyrAlaMetGlyTrpTyrArgGlnAlaProGlyLysGluCysGluLeuValAlaThrIleThrSerAlaGlyGlySerThrAsnTyrAlaAspSerValLysGlyArgPheThrLeuSerArgAspAsnAlaLysAsnThrValTyrLeuGlnMetAsnSerLeuLysProGluAspThrAlaGluTyrTyrCysAsnAlaGluSerSerThrThrGlyTrpGlyThrIleCysAspAlaLeuAspAlaPheGlyGlnGlyThrGlnValThrValSerSer。本专利技术还提出一种PD-L1单域抗体，包括多肽序列，所述多肽序列如下：GluValGlnLeuValGluSerGlyGlyGlyLeuAlaGlnProGlyGlySerLeuArgLeuSerCysAlaAlaSerGlyPheAlaPheSerSerTyrAlaMetGlyTrpTyrArgGlnAlaProGlyLysGluCysGluLeuValAlaThrIleThrSerAlaGlyGlySerThrAsnTyrAlaAspSerValLysGlyArgPheThrLeuSerArgAspAsnAlaLysAsnThrValTyrLeuGlnMetAsnSerLeuLysProGluAspThrAlaGluTyrTyrCysAsnAlaGluSerSerThrThrGlyTrpGlyThrIleCysAspAlaLeuAspAlaPheGlyGlnGlyThrGlnValThrValSerSer。本专利技术还提供一种核苷酸序列，所述核苷酸序列编码的多肽或PD-L1单域抗体中包含有如下序列：GluValGlnLeuValGluSerGlyGlyGlyLeuAlaGlnProGlyGlySerLeuArgLeuSerCysAlaAlaSerGlyPheAlaPheSerSerTyrAlaMetGlyTrpTyrArgGlnAlaProGlyLysGluCysGluLeuValAlaThrIleThrSerAlaGlyGlySerThrAsnTyrAlaAspSerValLysGlyArgPheThrLeuSerArgAspAsnAlaLysAsnThrValTyrLeuGlnMetAsnSerLeuLysProGluAspThrAlaGluTyrTyrCysAsnAlaGluSerSerThrThrGlyTrpGlyThrIleCysAspAlaLeuAspAlaPheGlyGlnGlyThrGlnValThrValSerSer。在一实施例中，所述核苷酸序列如下：GAGGTACAGCTGGTGGAATCTGGGGGAGGCTTGGCGCAGCCTGGGGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCGCTTTCAGTAGCTATGCCATGGGCTGGTACCGCCAGGCTCCAGGGAAGGAGTGCGAGTTGGTCGCAACTATTACTAGCGCTGGTGGTAGCACAAACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCCTCTCCAGAGACAATGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCTGAGGACACGGCCGAGTATTACTGCAACGCAGAAAGCTCGACTACGGGTTGGGGTACCATCTGCGATGCTTTGGACGCATTCGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA。本专利技术还提供一种试剂盒，包括多肽或者PD-L1单域抗体，所述多肽和所述PD-L1单域抗体包含序列如下：GluValGlnLeuValGluSerGlyGlyGlyLeuAlaGlnProGlyGlySerLeuArgLeuSerCysAlaAlaSerGlyPheAlaPheSerSerTyrAlaMetGlyTrpTyrArgGlnAlaProGlyLysGluCysGluLeuValAlaThrIleThrSerAlaGlyGlySerThrAsnTyrAlaAspSerValLysGlyArgPheThrLeuSerArgAspAsnAlaLysAsnThrValTyrLeuGlnMetAsnSerLeuLysProGluAspThrAlaGluTyrTyrCysAsnAlaGluSerSerThrThrGlyTrpGlyThrIleCysAspAlaLeuAspAlaPheGlyGlnGlyThrGlnValThrValSerSer；或者所述试剂盒包括核苷酸序列，所述核苷酸序列如下：GAGGTACAGCTGGTGGAATCTGGGGGAGGCTTGGCGCAGCCTGGGGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCGCTTTCAGTAGCTATGCCATGGGCTGGTACCGCCAGGCTCCAGGGAAGGAGTGCGAGTTGGTCGCAACTATTACTAGCGCTGGTGGTAGCACAAACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCCTCTCCAGAGACAATGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCTGAGGACACGGCCGAGTATTACTGCAACGCAGAAAGCTCGACTACGGGTTGGGGTACCATCTGCGATGCTTTGGACGCATTCGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA。本专利技术技术方案通本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多肽，其特征在于，序列如下：Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ala Gln Pro Gly Gly Ser LeuArg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr Ala Met Gly Trp TyrArg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Cys Glu Leu Val Ala Thr Ile Thr Ser Ala Gly GlySer Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn AlaLys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Glu TyrTyr Cys Asn Ala Glu Ser Ser Thr Thr Gly Trp Gly Thr Ile Cys Asp Ala Leu AspAla Phe Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser。...

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于，序列如下：GluValGlnLeuValGluSerGlyGlyGlyLeuAlaGlnProGlyGlySerLeuArgLeuSerCysAlaAlaSerGlyPheAlaPheSerSerTyrAlaMetGlyTrpTyrArgGlnAlaProGlyLysGluCysGluLeuValAlaThrIleThrSerAlaGlyGlySerThrAsnTyrAlaAspSerValLysGlyArgPheThrLeuSerArgAspAsnAlaLysAsnThrValTyrLeuGlnMetAsnSerLeuLysProGluAspThrAlaGluTyrTyrCysAsnAlaGluSerSerThrThrGlyTrpGlyThrIleCysAspAlaLeuAspAlaPheGlyGlnGlyThrGlnValThrValSerSer。2.一种PD-L1单域抗体，其特征在于，包括如权利要求1所述的多肽序列。3.一种核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列编码如权利要求1所述的多肽或者编码如权利要求2所述的PD-L1单...

【专利技术属性】
技术研发人员：李胜华，包朝乐萌，许莎莎，李莹莹，余祥，
申请(专利权)人：深圳普瑞金生物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44