核酸组合物、检测单元、微流控芯片及检测装置制造方法及图纸

技术编号:21564211 阅读:23 留言:0更新日期:2019-07-10 13:44
本发明专利技术涉及一种核酸组合物、检测单元、微流控芯片及检测装置。该核酸组合物包括检测引物对,检测引物对包括如下引物对中的至少两种:A型RSV病毒引物对、A型IFA病毒引物对、2型PIV病毒引物对、HCoV病毒引物对、B型IFA病毒引物对、SASR病毒引物对、MPV病毒引物对、3型PIV病毒引物对、B型RSV病毒引物对、HBoV病毒引物对、ADV病毒引物对、HRV病毒引物对、军团杆菌引物对、链球菌引物对、衣原体引物对和支原体引物对。上核酸组合物能够用于检测至少两种呼吸道病原体,且检测敏感度较高。

Nucleic acid composition, detection unit, microfluidic chip and detection device

【技术实现步骤摘要】
核酸组合物、检测单元、微流控芯片及检测装置
本专利技术涉及基因工程领域,特别是涉及一种核酸组合物、检测单元、微流控芯片及检测装置。
技术介绍
上呼吸道感染大部分由病毒(包括呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒、、副流感病毒等)引起。该病通过含有病毒的飞沫、雾滴,或经污染的用具进行传播。常于机体抵抗力降低时,原已存在或由外界侵入的病毒或细菌迅速生长繁殖,导致感染,常继发支气管炎、肺炎、副鼻窦炎,少数人可并发急性心肌炎、肾炎、风湿热等。多种病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点,给临床疾病诊断和治疗造成极大地困难。呼吸道病毒感染是临床最常见的疾病之一,且病原学复杂,精确的病原学分析不仅是确诊依据,也是合理治疗方案的基础。下呼吸道细菌性感染为临床常见疾病,需抗生素治疗。目前临床上的细菌性感染多为经验治疗。军团杆菌是一种广泛存在于自然界中的机会致病菌,能引起发热以及呼吸道症状,能引起严重的肺部感染,严重者可导致呼吸衰竭和社衰竭,更有患者直接导致死亡。肺炎链球菌,为革兰氏染色阳性,5%~10%正常人上呼吸道中携带此菌,是引起人类疾病的重要病原菌。肺炎链球菌主要的致病物质是肺炎球菌溶血素以及荚膜,荚膜具有抗原性,可引起大叶性肺炎、脑膜炎、支气管炎等疾病。支原体肺炎以及衣原体肺炎是肺炎支原体引起的急性呼吸道感染伴肺炎,过去称为原发性非典型性肺炎的病原体中,肺炎支原体最为常见,可引起流行,约占肺炎的10%,严重的肺炎支原体感染也可导致死亡。肺炎衣原体可导致支气管炎、咽炎、鼻窦炎、中耳炎、虹膜炎等疾病,也是艾滋病、白血病等继发感染的重要病原菌之一。一般地,检测呼吸道病原体的方法包括病毒分离培养和PCR。病毒分离培养的检测周期长,检测敏感度较低,不能满足实际需求。而PCR的通量低,一次只能检测一种病原体。
技术实现思路
基于此,有必要提供一种核酸组合物,该核酸组合物能够用于同时检测至少两种呼吸道病原体且检测敏感度较高。此外,还有必要提供一种检测单元、微流控芯片及检测装置。一种核酸组合物,包括检测引物对,所述检测引物对包括如下引物对中的至少两种:序列如SEQIDNo.1及SEQIDNo.2所示的A型RSV病毒引物对;序列如SEQIDNo.4及SEQIDNo.5所示的A型IFA病毒引物对;序列如SEQIDNo.7及SEQIDNo.8所示的2型PIV病毒引物对;序列如SEQIDNo.10及SEQIDNo.11所示的HCoV病毒引物对;序列如SEQIDNo.13及SEQIDNo.14所示的B型IFA病毒引物对;序列如SEQIDNo.16及SEQIDNo.17所示的SASR病毒引物对;序列如SEQIDNo.19及SEQIDNo.20所示的MPV病毒引物对;序列如SEQIDNo.22及SEQIDNo.23所示的3型PIV病毒引物对;序列如SEQIDNo.25及SEQIDNo.26所示的B型RSV病毒引物对;序列如SEQIDNo.28及SEQIDNo.29所示的HBoV病毒引物对;序列如SEQIDNo.31及SEQIDNo.32所示的ADV病毒引物对;序列如SEQIDNo.34及SEQIDNo.35所示的HRV病毒引物对;序列如SEQIDNo.37及SEQIDNo.38所示的军团杆菌引物对;序列如SEQIDNo.40及SEQIDNo.41所示的链球菌引物对;序列如SEQIDNo.43及SEQIDNo.44所示的衣原体引物对;及序列如SEQIDNo.46及SEQIDNo.47所示的支原体引物对。上述核酸组合物包括检测引物对,检测引物对包括如下引物对中的至少两种:A型RSV病毒引物对、A型IFA病毒引物对、2型PIV病毒引物对、HCoV病毒引物对、B型IFA病毒引物对、SASR病毒引物对、MPV病毒引物对、3型PIV病毒引物对、B型RSV病毒引物对、HBoV病毒引物对、ADV病毒引物对、HRV病毒引物对、军团杆菌引物对、链球菌引物对、衣原体引物对和支原体引物对,至少两种引物对相互配合,能够避免各引物之间的相互干扰,以能够实现一次性即同时至少两种呼吸道病原体,检测敏感度高。经试验验证,上述核酸组合物能够对一管标本同时检测上述至少两种呼吸道病原体,节省检测时间,敏感度达88%以上。在其中一个实施例中,还包括与所述检测引物对对应的检测探针,其中,与所述A型RSV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.3所示的A型RSV病毒探针;与所述A型IFA病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.6所示的A型IFA病毒探针;与所述2型PIV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.9所示的2型PIV病毒探针;与所述HCoV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.12所示的HCoV病毒探针;与所述B型IFA病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.15所示的B型IFA病毒探针;与所述SASR病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.18所示的SASR病毒探针;与所述MPV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.21所示的MPV病毒探针;与所述3型PIV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.24所示的3型PIV病毒探针;与所述B型RSV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.27所示的B型RSV病毒探针;与所述HBoV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.30所示的HBoV病毒探针;与所述ADV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.33所示的ADV病毒探针;与所述HRV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.36所示的HRV病毒探针;与所述军团杆菌引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.39所示的军团杆菌探针;与所述链球菌引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.42所示的链球菌探针;与所述衣原体引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.45所示的衣原体探针;及与所述支原体引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.48所示的支原体探针;所述检测探针上连接有荧光基团;进一步地,所述检测引物对包括所述A型RSV病毒引物对、所述A型IFA病毒引物对、所述2型PIV病毒引物对、所述HCoV病毒引物对、所述B型IFA病毒引物对、所述SASR病毒引物对、所述MPV病毒引物对、所述3型PIV病毒引物对、所述B型RSV病毒引物对、所述HBoV病毒引物对、所述ADV病毒引物对、所述HRV病毒引物对、所述军团杆菌引物对、所述链球菌引物对、所述衣原体引物对及所述支原体引物对,所述检测引物对及对应的检测探针分为多组,同一组内的不同所述检测引物对对应的所述检测探针上连接的所述荧光基团不同;更进一步地,所述检测引物对分为四组,第一组包括所述A型RSV病毒引物对、所述A型IFA病毒引物对、所述2型PIV病毒引物对及所述HCoV病毒引物对;第二组包括所述B型IFA病毒引物对、所述SASR病毒引物对、所述MPV病毒引物对及所述3型PIV病毒引物对;第三组包括所述B型RSV病毒引物对、所述HBoV病毒引物对、所述ADV病毒引物对及所述HRV病毒引物对;第四组包括所述军团杆菌引物对、所述链球菌引物对、所述衣原体引物对及所述支原体引物对。在其中一个实施例中,各组中所述检测探针上连接的所本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种核酸组合物,其特征在于,包括检测引物对,所述检测引物对包括如下引物对中的至少两种:序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2所示的A型RSV病毒引物对;序列如SEQ ID No.4及SEQ ID No.5所示的A型IFA病毒引物对;序列如SEQ ID No.7及SEQ ID No.8所示的2型PIV病毒引物对;序列如SEQ ID No.10及SEQ ID No.11所示的HCoV病毒引物对;序列如SEQ ID No.13及SEQ ID No.14所示的B型IFA病毒引物对;序列如SEQ ID No.16及SEQ ID No.17所示的SASR病毒引物对;序列如SEQ ID No.19及SEQ ID No.20所示的MPV病毒引物对;序列如SEQ ID No.22及SEQ ID No.23所示的3型PIV病毒引物对;序列如SEQ ID No.25及SEQ ID No.26所示的B型RSV病毒引物对;序列如SEQ ID No.28及SEQ ID No.29所示的HBoV病毒引物对;序列如SEQ ID No.31及SEQ ID No.32所示的ADV病毒引物对;序列如SEQ ID No.34及SEQ ID No.35所示的HRV病毒引物对;序列如SEQ ID No.37及SEQ ID No.38所示的军团杆菌引物对;序列如SEQ ID No.40及SEQ ID No.41所示的链球菌引物对;序列如SEQ ID No.43及SEQ ID No.44所示的衣原体引物对;及序列如SEQ ID No.46及SEQ ID No.47所示的支原体引物对。...

【技术特征摘要】
1.一种核酸组合物,其特征在于,包括检测引物对,所述检测引物对包括如下引物对中的至少两种:序列如SEQIDNo.1及SEQIDNo.2所示的A型RSV病毒引物对;序列如SEQIDNo.4及SEQIDNo.5所示的A型IFA病毒引物对;序列如SEQIDNo.7及SEQIDNo.8所示的2型PIV病毒引物对;序列如SEQIDNo.10及SEQIDNo.11所示的HCoV病毒引物对;序列如SEQIDNo.13及SEQIDNo.14所示的B型IFA病毒引物对;序列如SEQIDNo.16及SEQIDNo.17所示的SASR病毒引物对;序列如SEQIDNo.19及SEQIDNo.20所示的MPV病毒引物对;序列如SEQIDNo.22及SEQIDNo.23所示的3型PIV病毒引物对;序列如SEQIDNo.25及SEQIDNo.26所示的B型RSV病毒引物对;序列如SEQIDNo.28及SEQIDNo.29所示的HBoV病毒引物对;序列如SEQIDNo.31及SEQIDNo.32所示的ADV病毒引物对;序列如SEQIDNo.34及SEQIDNo.35所示的HRV病毒引物对;序列如SEQIDNo.37及SEQIDNo.38所示的军团杆菌引物对;序列如SEQIDNo.40及SEQIDNo.41所示的链球菌引物对;序列如SEQIDNo.43及SEQIDNo.44所示的衣原体引物对;及序列如SEQIDNo.46及SEQIDNo.47所示的支原体引物对。2.根据权利要求1所述的核酸组合物,其特征在于,还包括与所述检测引物对对应的检测探针,其中,与所述A型RSV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.3所示的A型RSV病毒探针;与所述A型IFA病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.6所示的A型IFA病毒探针;与所述2型PIV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.9所示的2型PIV病毒探针;与所述HCoV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.12所示的HCoV病毒探针;与所述B型IFA病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.15所示的B型IFA病毒探针;与所述SASR病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.18所示的SASR病毒探针;与所述MPV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.21所示的MPV病毒探针;与所述3型PIV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.24所示的3型PIV病毒探针;与所述B型RSV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.27所示的B型RSV病毒探针;与所述HBoV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.30所示的HBoV病毒探针;与所述ADV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.33所示的ADV病毒探针;与所述HRV病毒引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.36所示的HRV病毒探针;与所述军团杆菌引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.39所示的军团杆菌探针;与所述链球菌引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.42所示的链球菌探针;与所述衣原体引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.45所示的衣原体探针;及与所述支原体引物对对应的检测探针为序列如SEQIDNo.48所示的支原体探针;所述检测探针上连接有荧光基团;进一步地,所述检测引物对包括所述A型RSV病毒引物对、所述A型IFA病毒引物对、所述2型PIV病毒引物对、所述HCoV病毒引物对、所述B型IFA病毒引物对、所述SAS...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴力强钱纯亘刘笔锋胡鹍辉
申请(专利权)人:深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:广东,44

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