一种10-脱乙酰基巴卡丁III的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种10‑脱乙酰基巴卡丁 III的纯化方法，该方法采用超临界流体色谱，分离纯化得到99%以上的产品。本发明专利技术大幅提高了分离效率，产品收率较高，产品的稳定性比较好，溶剂消耗低，后处理能耗低，从而提高了效率，降低产品成本，而且可以很方便的放大到工业级。

Purification of 10-deacetylbaccatin III

【技术实现步骤摘要】
一种10-脱乙酰基巴卡丁III的纯化方法
本专利技术涉及一种化合物的纯化方法，尤其涉及一种10-脱乙酰基巴卡丁III的纯化方法，属于色谱领域。
技术介绍
10-脱乙酰基巴卡丁III（10-DABIII）是红豆杉树种中主要存在的一个结构单体，可以作为合成肿瘤药物紫杉醇和多西紫杉醇的中间体。紫杉醇和多西紫杉醇在临床上已经被用于乳腺癌、卵巢癌、肺癌等治疗，疗效较好，毒副作用小，逐步成为抗肿瘤一线药。随着癌症病人的逐年增多，对紫杉醇和多西紫杉醇的需求日益加剧，对其原料的需求更大。以往获得紫杉醇都是从天然红豆杉的木质中提取分离，而用木质提取需要砍伐红豆杉，由于红豆杉树资源的局限性和提取成本偏高等不利因素严重阻碍行业的发展。为了满足市场需求，半合成获取紫杉醇和多西紫杉醇已经成为大部分制药企业获得原料的首选方式，而半合成最重要的前体物就是10-DABIII,它广泛分布于多种类型的红豆杉树叶中，树叶本身就是可再生资源，所以如何高效快捷低成本的从红豆杉枝叶中提取出高纯度的10-DABIII中间体成为行业焦点。目前，关于10-DABIII提取分离的文献和专利很多，基本上都是采用提取，分离，结晶三个步骤，真正影响产品回收率和纯度的主要还是分离和结晶这两个步骤。随着市场的竞争和溶剂成本的增加，如何简化分离纯化工艺，减少有机溶剂的使用量，提高分离效率，成为控制成本的主要思路。中国专利申请号02136678公开了从乙醇提取过的红豆杉枝叶残渣中提取10-DABIII的方法，并采用了正相色谱进行分离得到纯品10-DABIII，该分离纯化方法中虽然得到了制备液相色谱分离过程，但所采用的溶剂体系和梯度洗脱手段在规模化生产中显得较为复杂，分离效率低下，溶剂消耗大。因为10-DABIII被提取到一定纯度的情况下，在常规溶剂里的溶解能力降低，该专利中提到的乙酸乙酯实际并不能很好的溶解半成品10-DABIII，因为要产业化利用制备液相色谱分离必须要找到合适的流动相体系。此外，中国专利公开号CN1473821A公开了一种提取10-DABIII的方法，该专利采用常规的硅胶层析分离提取10-DABIII,方法耗时、溶剂使用量大，而且硅胶使用率低，废物排放多，造成生产成本较高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种利用超临界流体色谱分离纯化10-脱乙酰基巴卡丁III方法。一种10-脱乙酰基巴卡丁III的纯化方法，其特征在于：使用超临界流体色谱，经色谱纯化得到纯度99％以上的产物，该方法包括下述步骤：a.将溶于流动相的10-脱乙酰基巴卡丁III粗品吸附在固定相上；b.用输液泵将流动相吸入色谱柱进行洗脱；c.收集10-脱乙酰基巴卡丁III；所述色谱柱是使用两种不同类型的固定相的两根色谱柱串联。所述固定相为键合硅胶，优选固定相粒径为3～200μm，更优选为5～50μm，进一步优选5～10μm，最优选10μm。固定相孔径为50～500Å，优选为60～400Å。优选固定相的形状为无定型或球型，更优选为球型。所述流动相是超临界二氧化碳与高极性有机溶剂的混合物，其中超临界态二氧化碳占的体积百分比大于60％，优选为70％～99.9％。所述的高极性有机溶剂为C1～C4的醇、乙腈或其混合物，所述C1～C4的醇为甲醇、乙醇或者异丙醇。本专利技术与现有技术相比的优点在于，首先使用超临界二氧化碳作为低极性的流动相，由于超临界二氧化碳较低的压力降，可以实现两种不同色谱填料的串联制备，大幅提高分离效率，而不需进一步精制纯化；第二产品收率较高，溶剂消耗低，后处理能耗低，从而提高了效率，降低产品成本；第三本专利技术的纯化方法可以很方便的放大到工业级，无需对方法进行大的更改，只需根据制备柱的大小成比例的调节流速的大小；第四本专利技术制备后的高纯度产品的稳定性比较好，能在2～20℃保存较长时间。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术作进一步说明。应该理解的是，本专利技术实施例所述方法仅仅是用于说明本专利技术，而不是对本专利技术的限制，在本专利技术的构思前提下对本专利技术制备方法的简单改进都属于本专利技术要求保护的范围。实施例一：10-脱乙酰基巴卡丁III的超临界流体色谱制备色谱纯化仪器：超临界流体制备色谱系统色谱柱：键合二醇基球型硅胶色谱柱串联键合十八烷基球型硅胶色谱柱，粒径10μm，孔径60～400Å流动相∶二氧化碳∶甲醇＝80∶20(体积比)流速：40ml/min检测波长：207nm0.2g10-脱乙酰基巴卡丁III粗品用4ml流动相溶解，用10ml/min流速将样品溶解液吸入柱子吸附在填料上，40ml/min流速洗脱，弱极性杂质先被分离，然后10-脱乙酰基巴卡丁III产物被分离，最后强极性杂质被分离，收集产物馏分，浓缩干得10-脱乙酰基巴卡丁III，收率70％，产品纯度大于99％。实施例二：10-脱乙酰基巴卡丁III的超临界流体色谱制备色谱纯化将实施例一中的流动相换成二氧化碳∶乙腈＝70∶30(体积比)，其它条件相同，收集产物浓缩干得10-脱乙酰基巴卡丁III，收率75％，产品纯度为99.1％。实施例三：10-脱乙酰基巴卡丁III的超临界流体色谱制备色谱纯化将实施例一中的流动相换成二氧化碳：乙醇＝75：:25(体积比)，其它条件相同，收集产物浓缩干得10-脱乙酰基巴卡丁III，收率75％，产品纯度为99.2％。实施例四：10-脱乙酰基巴卡丁III的超临界流体色谱制备色谱纯化将实施例一中的流动相换成二氧化碳：异丙醇＝65:35(体积比)，其它条件相同，收集产物浓缩干得10-脱乙酰基巴卡丁III，收率76％，产品纯度为99.2％。实施例五：10-脱乙酰基巴卡丁III的超临界流体色谱制备色谱纯化将实施例一中的流动相换成二氧化碳：乙醇：乙腈＝65:15：20(体积比)，其它条件相同，收集产物浓缩干得10-脱乙酰基巴卡丁III，收率76％，产品纯度为99.3％。实施例六：10-脱乙酰基巴卡丁III的超临界流体色谱制备色谱纯化将实施例一中的色谱柱换成键合氨基球型硅胶色谱柱串联键合十八烷基基球型硅胶色谱柱，粒径10μm，孔径60～400Å，，用二氧化碳∶乙腈＝80∶20(体积比)的流动相洗脱，其它条件相同，收集产物浓缩干得10-脱乙酰基巴卡丁III，收率74％，产品纯度为99.1％。实施例七：10-脱乙酰基巴卡丁III的超临界流体色谱制备色谱纯化将实施例一中的色谱柱换成键合苯基球型硅胶色谱柱串联键合十八烷基基球型硅胶色谱柱，用二氧化碳∶异丙醇＝85∶15(体积比)的流动相洗脱，其它条件相同，收集产物浓缩干得10-脱乙酰基巴卡丁III，收率68％，产品纯度为99.3％。实施例八：10-脱乙酰基巴卡丁III的超临界流体色谱制备色谱纯化将实施例一中的色谱柱换成键合苯基球型硅胶色谱柱串联键合辛烷基基球型硅胶色谱柱，用二氧化碳∶异丙醇＝82∶18(体积比)的流动相洗脱，其它条件相同，收集产物浓缩干得10-脱乙酰基巴卡丁III，收率65％，产品纯度为99.1％。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种10‑脱乙酰基巴卡丁 III的纯化方法，其特征在于：使用超临界流体色谱，经色谱纯化得到纯度99％以上的产物，该方法包括下述步骤：a.将溶于流动相的10‑脱乙酰基巴卡丁 III粗品吸附在固定相上；b.用输液泵将流动相吸入色谱柱进行洗脱；c.收集10‑脱乙酰基巴卡丁III；所述流动相是超临界二氧化碳与高极性有机溶剂的混合物，其中所述超临界二氧化碳占的体积百分比大于60％；所述色谱柱所用固定相为键合硅胶，粒径为3～ 200μm，孔径为50～500 Å，形状为无定型或球型。

【技术特征摘要】
1.一种10-脱乙酰基巴卡丁III的纯化方法，其特征在于：使用超临界流体色谱，经色谱纯化得到纯度99％以上的产物，该方法包括下述步骤：a.将溶于流动相的10-脱乙酰基巴卡丁III粗品吸附在固定相上；b.用输液泵将流动相吸入色谱柱进行洗脱；c.收集10-脱乙酰基巴卡丁III；所述流动相是超临界二氧化碳与高极性有机溶剂的混合物，其中所述超临界二氧化碳占的体积百分比大于60％；所述色谱柱所用固定相为键合硅胶，粒径为3～200μm，孔径为50～500Å，形状为无定型或球型。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述色谱柱是使用两种不同类型的固定相的两根色谱柱串联...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈海，刘大伟，沈健增，李枝玲，
申请(专利权)人：江苏汉邦科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32