一种稳定的双特异抗体制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，本发明专利技术公开了一种稳定的双特异抗体，具体是含有靶向EGFR和HER2的双特异性抗体的稳定的水溶液；该溶液中含有靶向EGFR和HER2的双特异性抗体，注射用水，以及稳定剂。研究表明该抗体采用稳定剂为L‑精氨酸或/和L‑组氨酸，该抗体溶液在长期稳定性条件下，活性非常优秀。

A stable bispecific antibody

【技术实现步骤摘要】
一种稳定的双特异抗体
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种稳定的双特异抗体，具体是含有靶向EGFR和HER2的双特异性抗体的稳定的水溶液。
技术介绍
双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架起桥梁，激发具有导向性的免疫反应，是基因工程抗体的一种，现已成为抗体工程领域的热点，在肿瘤的免疫治疗中具有广阔的应用前景。双特异性抗体(bispecificantibody，BiAb)是含有两种特异性抗原结合位点的人工抗体，即一个抗体分子中的两个抗原结合部位可分别结合两种不同的抗原表位的抗体，能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架起桥梁，产生导向性的效应功能。双特异性抗体的一条臂结合肿瘤标志物，另一条臂结合T-细胞特异表面抗原，例如PD-1，可以克服上述问题并且连接肿瘤细胞和T-细胞。BiAb在生物医学中，特别是在肿瘤的免疫治疗中具有广阔的应用前景。通过BiAb介导的细胞毒作用杀死肿瘤细胞是当前免疫治疗应用研究的热点，其主要特点是BiAb能同时结合肿瘤相关抗原和免疫效应细胞上的靶分子，直接触发免疫效应细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤。用于免疫治疗的双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体，能激发具有导向性的免疫反应，在肿瘤的免疫治疗中具有广阔的应用前景。双特异性抗体是通过鼠源性单克隆抗体的化学偶联、双杂交瘤和基因工程3个发展阶段所制备的一种非天然抗体或抗体杂合分子，随着生物技术的日益进步，国内外双特异性抗体的相关研究日趋深入，其在临床治疗中作为一种新的二次导向系统具有潜在的应用价值。中国专利201710671483.1公开一种靶向EGFR和HER2的双特异性抗体，该文献公开该抗体的制备方法和活性等技术方案，但对于一个抗体在成药研究中，至关重要的是稳定性的研究，比如在动物试验中、在临床试验中以及以后的制剂研究中，因此，研究该抗体的稳定性，至关重要。
技术实现思路
基于上述原因，申请人经过多次研究，获得一种稳定双特异抗体的溶液，该溶液中含有靶向EGFR和HER2的双特异性抗体，注射用水，以及稳定剂，研究表明该抗体采用稳定剂为L-精氨酸或/和L-组氨酸，该抗体溶液在长期稳定性条件下，活性非常优秀。本专利技术通过下述技术方案实现的。一种稳定的双特异抗体的水溶液，该溶液中含有靶向EGFR和HER2的双特异性抗体，注射用水，以及稳定剂。其中稳定剂为L-精氨酸或L-组氨酸。其中稳定剂为L-精氨酸和L-组氨酸。所述的一种稳定的双抗体的水溶液，其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体1重量份，注射用水，稳定剂0.14-0.26重量份。所述的一种稳定的双抗体的水溶液，其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体1重量份，注射用水，稳定剂0.19重量份。所述的一种稳定的双抗体的水溶液，其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体1重量份，注射用水，L-精氨酸或L-组氨酸为0.19重量份。所述的一种稳定的双抗体的水溶液，其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体1重量份，注射用水，L-精氨酸与L-组氨酸为0.19重量份。所述的一种稳定的双抗体的水溶液，其中L-精氨酸与L-组氨酸重量比为10:9。所述的一种稳定的双抗体的水溶液，其中水溶液的制备方法为：取注射用水，加入二分之一重量的稳定剂，溶解完全，加入抗体，溶解完全，加入剩余重量的稳定剂，溶解完全，即得。本专利技术抗靶向EGFR和HER2的双特异性抗体，根据专利201710671483.1获得。制备实施例实施例1双抗体的水溶液：其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体10mg，注射用水100mL，稳定剂L-精氨酸1.4mg；制备方法为：取注射用水，加入二分之一重量的稳定剂，溶解完全，加入抗体，溶解完全，加入剩余重量的稳定剂，溶解完全，即得。实施例2双抗体的水溶液：其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体10mg，注射用水100mL，稳定剂为L-精氨酸2.6mg；制备方法为：取注射用水，加入二分之一重量的稳定剂，溶解完全，加入抗体，溶解完全，加入剩余重量的稳定剂，溶解完全，即得。实施例3双抗体的水溶液：其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体10mg，注射用水100mL，L-精氨酸1.9mg；制备方法为：取注射用水，加入二分之一重量的稳定剂，溶解完全，加入抗体，溶解完全，加入剩余重量的稳定剂，溶解完全，即得。实施例4双抗体的水溶液：其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体10mg，注射用水100mL，稳定剂L-组氨酸为1.9mg；制备方法为：取注射用水，加入二分之一重量的稳定剂，溶解完全，加入抗体，溶解完全，加入剩余重量的稳定剂，溶解完全，即得。实施例5双抗体的水溶液：其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体10mg，注射用水100mL，稳定剂为L-精氨酸1.0mg和L-组氨酸为0.9mg；制备方法为：取注射用水，加入二分之一重量的稳定剂，溶解完全，加入抗体，溶解完全，加入剩余重量的稳定剂，溶解完全，即得。所述实施例包括但不限于上述。试验例：冷热循环试验：取上述不同实施例双抗体水溶液10mL，密闭后置于40℃存放24h，于室温存放24h，再于-5℃存放24h，依次循环3次，测定亲和力常数(试验方法同201710671483.1实施例4)，试验结果见表1。表1不同实施例亲和力常数(nM)试验结论：本专利技术双抗水溶液经过冷热循环后，与抗原的亲和力常数没有发生变化，充分说明本专利技术双抗水溶液具有很好的稳定性。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种稳定的双特异抗体的水溶液，其特征在于该溶液中含有靶向EGFR和HER2的双特异性抗体，注射用水，以及稳定剂。

【技术特征摘要】
1.一种稳定的双特异抗体的水溶液，其特征在于该溶液中含有靶向EGFR和HER2的双特异性抗体，注射用水，以及稳定剂。2.根据权利要求1所述的一种稳定的双特异抗体的水溶液，其特征在于稳定剂为L-精氨酸或L-组氨酸。3.根据权利要求1所述的一种稳定的双特异抗体的水溶液，其特征在于稳定剂为L-精氨酸和L-组氨酸。4.根据权利要求1所述的一种稳定的双抗体的水溶液，其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体1重量份，注射用水，稳定剂0.14-0.26重量份。5.根据权利要求1所述的一种稳定的双抗体的水溶液，其中靶向EGFR和HER2的双特异性抗体1重量份，注射用水，稳定剂0.19重量份。6...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐艳红，
申请(专利权)人：天津耀辰实业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12