人sDR5-Fc重组融合蛋白作为脑卒中治疗药物的应用制造技术

本发明专利技术提供了人sDR5‑Fc重组融合蛋白作为治疗脑卒中的药物中的应用，具体公开了一种人sDR5‑Fc重组融合蛋白在制备治疗脑卒中的药物中的应用，所述人sDR5‑Fc重组融合蛋白序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示，或具有与SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4 95％以上同源性并具有相同功能的重组融合蛋白。本发明专利技术的sDR5‑Fc融合蛋白能显著降低脑卒中患者神经细胞凋亡。

Application of recombinant human sDR5-Fc fusion protein as a therapeutic drug for stroke

【技术实现步骤摘要】
人sDR5-Fc重组融合蛋白作为脑卒中治疗药物的应用
本专利技术涉及一种融合蛋白的用途，具体涉及一种人sDR5-Fc重组融合蛋白在作为制备治疗脑卒中的药物中的应用。
技术介绍
1.脑卒中“脑卒中”(cerebralstroke)又称“中风”、“脑血管意外”(cerebralvascularaccident，CVA)，是由于脑部血管突然破裂或因血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑细胞死亡和脑组织损伤的一种急性脑血管疾病。脑卒中包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中，其中缺血性脑卒中约占脑卒中总数的75％～85％。出血性卒中的死亡率较高。据卫生部统计，我国每年脑卒中新发病250万人，死亡约150万人，是中国成年人残疾的首要原因。存活的患者中，约四分之三有不同程度致残，重度致残者约占40％。全国每年用于该病的治疗费用达100亿元以上，给国家和家庭造成沉重的经济负担。世界卫生组织预计，脑中风所导致的全球死亡人数将在2030年达到780万，因此，开展脑卒中治疗新药的研发具有重要的实用价值和社会意义。2.脑卒中发病机制目前公认的关于脑卒中的发病机制的学说主要有能量耗竭、兴奋性氨基酸毒性作用、梗死灶周边半暗带去极化、炎性细胞因子、一氧化氮和自由基损伤以及细胞凋亡等。脑卒中的病因及形成机制是复杂的，目前的研究资料尚不能充分阐明其本质。传统观点认为，细胞坏死是缺血后神经细胞死亡的主要形式。Linnik等人的实验改变了上述观点，他们认为，细胞凋亡才是脑缺血后神经细胞死亡的主要形式，而不是传统认为的坏死。Macmanus的研究也指出，在大鼠脑缺血模型的半影区，发现有大量的细胞凋亡。随着进一步的研究，越来越多的证据表明，细胞凋亡参与缺血性细胞损害，作为脑缺血后迟发性神经元死亡的重要形式、与神经细胞坏死同时并存，在缺血缺氧性脑损伤中具有重要的病理生理学意义。脑梗死病灶由两部分构成，分别为缺血中心区和半影区。发生脑梗死后，位于缺血中心区的脑细胞很快就死亡了，因为这个区域在脑梗死后即出现完全缺血或供血严重不足。而在缺血半影区，因侧枝循环的存在，在脑梗死刚发生的前几个小时仍然可以获得部分血液供应，这个时候的脑神经细胞虽然受到一定程度的损伤但尚存活，处于可逆状态。这时，如果能够抑制细胞死亡，及时恢复血液供给，就可消除脑代谢障碍，使缺血半影区神经细胞的功能得以恢复；否则，缺血半影区脑细胞将遭到不可逆性损伤。因此，干预缺血后神经细胞的凋亡过程、抢救半暗带的神经细胞是治疗脑梗死的有效方式。3.脑卒中现有治疗药物脑卒中的治疗方式主要包括手术治疗和药物治疗。其中对缺血性脑卒中，改善脑血循环和神经保护是研究的热点。改善脑血循环的措施主要是抗血栓治疗。抗血栓药分为溶栓药、抗血小板聚集药和抗凝血药。FDA唯一获准的药物只有组织型纤溶酶原激活剂(tissueplasminogenativator，tPA)，该溶栓治疗用于缺血性脑卒中。但是，由于tPA治疗时间窗狭窄，禁忌证限制，并发症危险，仅3％～5％患者获得治疗；又因tPA治疗的血管再通率较低，使得这一疗法的总体有效性较低。理论上，神经保护是治疗缺血性和出血性脑卒中的共性策略。因此，神经保护剂研发一直是这一领域的关注焦点。神经细胞保护的治疗目的在于延迟神经细胞死亡，以争取时间恢复脑灌注，挽救缺血半暗带部分残留的尚具活力的可逆性损伤的神经元和脑组织，延长治疗时间窗。神经细胞保护治疗不仅能增强神经细胞对缺血的耐受性，而且能调动内源性抗缺血和抗氧化机制，从而保护濒临死亡的神经细胞，促进神经功能的恢复。2010年以来神经保护剂的临床研究主要有3方面：1)靶向兴奋毒性。谷氨酸和钙离子在缺血性神经元死亡中发挥重要作用，被称为神经兴奋毒性(excitotoxicity)。作用于谷氨酸受体的药物(例如：硫酸镁，突触后致密蛋白95)在临床试验均显示无效。钙通道拮抗药可阻断谷氨酸下游信号通路钙内流，被认为可作为脑卒中治疗药物，且尼莫地平被用于临床治疗脑卒中。但是，迄今为止，大量临床试验循证医学证明，钙通道阻滞药治疗脑卒中未能获得治疗效果。2)靶向氧化和硝化应激。氧化和硝化应激在缺血性脑损伤病理过程中扮演重要角色，中和氧化和硝化应激可作为潜在的脑卒中治疗策略。依达拉奉(edaravone)是日本2001年批准上市的自由基清除剂，可清除超氧阴离子、过氧化氢和羟自由基。该药也在我国被批准上市，广泛用于治疗缺血性脑卒中。然而针对8项临床试验的系统性回顾表明，依达拉奉在脑卒中患者治疗中的有效性无确凿证据。3)靶向炎症损伤。脑缺血后会释放许多损伤相关模式分子，进而触发免疫应答，引起炎症反应。因此，免疫介导的炎症反应成为脑卒中治疗的研究靶点。芬戈莫德(fingolimod)是用于治疗多发性硬化症的新型免疫抑制剂。芬戈莫德是几种神经胺-1-磷酸盐受体的高亲和受体激动剂，阻止淋巴细胞从淋巴结外出，限制淋巴细胞浸润到脑，抑制小胶质细胞和巨噬细胞的局部激活。在临床试验中，脑卒中发生72h内给予芬戈莫德治疗，可限制继发性脑组织损伤，提高功能恢复；脑卒中发生4.5h内联合tPA用药可减少神经功能缺陷。那他珠单抗(natalizumab)是一个人源化的CD49d抗体，可阻断α4-整合素，被批准用于多发性硬化症的治疗。临床试验中，该药联合应用tPA，对脑梗体积无影响，但可改善认知功能。白细胞介素1受体拮抗剂(interleukin-1receptorantagonist，IL-1ra)是促炎因子IL-1的竞争性拮抗剂，被广泛用于治疗炎症性疾病。重组IL-1ra联合tPA或血管内血栓切除术治疗的临床研究进行到Ⅱ期。急性脑卒中后血浆中IL-1ra升高被证明与高感染风险有关。因此，该药的治疗护理需要格外小心。二甲胺四环素(minocycline)是一个四环素衍生物抗生素，可减少动物脑卒中后的细胞凋亡，抑制聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1和基质金属蛋白酶的表达，进而表现出抗炎效果。临床试验表明，二甲胺四环素治疗窗时间较长，单独用药达4h，联合应用tPA可达6h；联合tPA用药时，不仅提供血管保护作用，而且减少tPA治疗引发的出血事件。但一项小型临床试验发现，脑卒中发生24h内静脉给予二甲胺四环素治疗对患者的致残率无改善作用。总之，大量神经保护剂在经过上千项实验研究和上百项临床试验之后，最终被证明转化失败，使得脑卒中治疗药物研发成为世界性难题，研发新的安全有效的药物迫在眉睫。4、sDR5、sDR5-Fc治疗脑卒中TRAIL(tumornecrosisfactorrelatedapoptosisinducingligand，肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)是人类所发现的第10个肿瘤坏死因子超家族成员(tumornecrosisfactorsuperfamilymember10，TNFSF10)。人TRAIL含有281个氨基酸残基，是一种II型跨膜蛋白，其C端的胞外区形成三明治样片层的三聚体结构，有利于其与受体的结合。目前，已发现的TRAIL受体共有5种：TRAIL-R1(又称DR4)、TRAIL-R2(又称DR5)、TRAIL-R3(又称DcR1)、TRAIL-R4(又称DcR2)和骨保护素(osteoprotegerin，OPG)。其中，TRAIL-R1和TRAI本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人sDR5‑Fc重组融合蛋白在制备治疗或预防脑卒中的药物中的应用，所述人sDR5‑Fc重组融合蛋白序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示，或具有与SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4 95％以上同源性并具有相同功能的重组融合蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种人sDR5-Fc重组融合蛋白在制备治疗或预防脑卒中的药物中的应用，所述人sDR5-Fc重组融合蛋白序列如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3或SEQIDNo.4所示，或具有与SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3或SEQIDNo.495％以上同源性并具有相同功能的重组融合蛋白。2.一种肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体拮抗剂在制备治疗或预防脑卒中的药物中的应用。3.一种肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体拮抗剂在制备降低缺血脑组织中神经细胞凋亡的药物中的用途，优选地，所述的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体拮抗剂为sDR5-Fc重组融合蛋白。4.一种降低缺血脑组织中神经细胞凋亡的方法，其包括给与受试者一种肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体拮抗剂。5.一种治疗脑...

【专利技术属性】
技术研发人员：万晓春，陈倩，卢珍，张青梅，夏蒙，沈恩允，
申请(专利权)人：深圳市中科艾深医药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44