脆弱拟杆菌提取物在制备防治银屑病的组合物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及脆弱拟杆菌提取物在制备防治银屑病的药物或食品中的应用，所述脆弱拟杆菌提取物中含有脆弱拟杆菌荚膜多糖A。本发明专利技术的发明专利技术人发现含有荚膜多糖A的脆弱拟杆菌提取物具有预防/治疗银屑病的功能。

Application of Bacteroides fragilis extracts in the preparation of compositions for the prevention and treatment of psoriasis

【技术实现步骤摘要】
脆弱拟杆菌提取物在制备防治银屑病的组合物中的应用
本专利技术涉及脆弱拟杆菌的应用
，特别是涉及一种脆弱拟杆菌提取物在制备防治银屑病的组合物中的应用。
技术介绍
银屑病(Psoriasis)是一种由遗传基因调控的、T淋巴细胞介导的自身免疫性皮肤病。其主要的组织病理学改变为角质形成细胞异常增生、角化不全、角化过度、血管生成和炎性细胞浸润。其病因和发病机制目前尚未完全明确，也无有效的根治方法，是最常见的慢性炎症性增生性皮肤病之一。其病情顽固、易复发，可造成全身系统损害，且严重影响患者的生活质量，甚至生存周期，是目前国内外重点关注的疾病之一。银屑病是免疫功能失调的复杂的遗传性疾病，尽管遗传的机制尚未完全确定。许多环境因素在银屑病的发病机制中起重要作用，包括药物、皮肤创伤(科布内工现象(Koebner’sphenomenon))、感染和压力。表明银屑病涉及免疫学机制的证据包括免疫抑制药如氨甲喋呤、环孢菌素(CyA)、免疫靶向生物剂以及免疫毒素(尼白介素)的功效。因此，银屑病是一种超免疫介导的器官特异性(皮肤、指甲和/或关节)疾病，其中局部病变使得基底角质干细胞高度增殖并延续疾病过程。目前，针对银屑病具有通过全身或通过局部的2种药物治疗方式。严重的皮肤病变和/或疾病的皮肤外分布，如银屑病性关节炎和指甲银屑病需要全身治疗。全身性的传统治疗通过使用氨甲蝶呤、环孢菌素、皮质类固醇类、类视黄醇类或富马酸酯类来进行。其中，氨甲蝶呤、环孢菌素和皮质类固醇类大多通过抑制免疫应答起作用，而类视黄醇类和富马酸酯类主要通过抑制银屑病病变基部的角质细胞的高度增殖起作用。然而，这些药物均含有一定的毒副作用并且疗效有限。最近，已经引入生物制品来治疗银屑病，包括阿来塞普、依那西普和许多单克隆抗体，即阿达木单抗、英利昔单抗、优特克单抗(ustekinumab)。相比传统的全身性药物，这类新药物的疗效更高，但它们需要服用时间久，治疗费用非常高，并且可能会伴随严重毒副作用。在疾病仅位于皮肤的情况下，通常选择局部治疗。通常使用地蒽酚，维生素D3及其类似物，包括卡泊三醇和骨化三醇，他扎罗汀(其为局部类视黄醇)，和局部糖皮质激素局部治疗银屑病。在影响到大部分身体表面的情况下，限制了用于局部治疗的产品的使用。局部治疗的患者候选人应该呈现轻至中度的、已临床诊断确定的银屑病患者，涉及到的身体表面≤10％或者由严重度指数PASI计算方法测得的严重度指数≤10。银屑病面积和PASI是最广泛使用的用于测量银屑病严重程度的工具。PASI将病变的严重度评估和受到影响的面积结合为0(无疾病)至72(最严重疾病)范围内的单一评分(LangleyRG,EllisCN.JAmAcadDermatol2004；51:563-9)。无论是哪种治疗方式，其强毒性限制了其长期持久的治疗，导致针对临床症状治疗的有效周期较短。因此，在治疗和预防复发方面仍然存在令人不满意的医疗需求。脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)是革兰氏阴性厌氧细菌中拟杆菌属的成员，属于拟杆菌门，完全不同于厚壁菌门的双歧杆菌、乳酸菌等。拟杆菌属有25个菌种，仅来自人类的有10个菌种，仅来自动物的有10个菌种，来自人和动物的有5个菌种。脆弱拟杆菌是一种专性厌氧细菌，依培养基的不同和生长阶段的不同，菌体形态呈现多形性，一般条件下菌体为杆状、两端钝圆、着色深，中间色浅且不均匀，有荚膜、无芽胞、无动力，有些有空泡，菌体长短不一。依据能否合成、分泌脆弱拟杆菌肠毒素(BFT)可将其分为产肠毒素型脆弱拟杆菌(EnterotoxigenicBacteroidesfragilis,ETBF)和非产肠毒素型脆弱拟杆菌(NontoxigenicBacteroidesfragilis，NTBF)。脆弱拟杆菌作为人及动物肠道正常菌群的一部分，主要存在于结肠中。此外，呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道粘膜也可定植生长。脆弱拟杆菌可以表达8种不同的荚膜多糖，分别记作A—H，其中荚膜多糖A(polysaccharideA,PSA)的作用由其分子量大小决定，天然PSA的分子量约110kDa。
技术实现思路
基于此，本专利技术提供了一种脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)提取物的新应用。具体技术方案如下：脆弱拟杆菌提取物在制备防治银屑病的药物或食品中的应用，所述脆弱拟杆菌提取物中含有脆弱拟杆菌荚膜多糖A。所述药物的剂型包括丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊、口服液或管饲制剂。所述药物包括人用药或动物用药，可用于人或动物。所述食品包括奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、冰激凌或发酵谷类食品。所述食品还可以是动物食品，比如饲料等。所述食品还可以为婴儿食品或宠物食品。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为2～110KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为5～95KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为5～85KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为5～75KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为40KD～85KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为60KD～85KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为65KD～75KD。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌提取物中脆弱拟杆菌荚膜多糖A的含量为60-75wt％。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌为保藏编号为CGMCCNo.10685的脆弱拟杆菌ZY-312。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌提取物的制备方法包括以下步骤：(1)将发酵培养后的脆弱拟杆菌菌液离心沉淀，收集第一沉淀物，取所述第一沉淀物加入65-72℃的水，溶解后再加入苯酚溶液，保持65-72℃搅拌25-35min，离心，收集第一上清液；(2)将步骤(1)中收集的第一上清液用乙醚萃取去除苯酚，再去除残留的乙醚，收集水相溶液；(3)在步骤(2)中收集到的水相溶液中加入无水乙醇至乙醇的终浓度为75-85v/v％，醇沉，离心，收集第二沉淀物；(4)取所述第二沉淀物，加水配制成溶液，再调节pH为6.5-7.5，离心，收集第二上清液，透析除盐，冷冻干燥，即得所述脆弱拟杆菌提取物。在其中一些实施例中，步骤(1)中在所述第一沉淀物中加入的水、所述苯酚溶液以及所述第一沉淀物的配比为3-5mL：3-5mL：1g；所述苯酚溶液的质量浓度为70-80％；及/或，步骤(3)所述醇沉为在0-8℃的温度下醇沉8-16小时。在其中一些实施例中，步骤(4)包括：取所述第二沉淀物，加水配制成质量浓度为8-12％的混悬液，再加入质量浓度为8-12％的冰乙酸水溶液，加热至沸，搅拌反应1.5-2.5小时，调节pH为6.5-7.5，离心，收集第二上清液，透析除盐，冷冻干燥，即得所述脆弱拟杆菌提取物。在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌提取物的制备方法还包括降解的步骤：将步骤(4)中得到的脆弱拟杆菌提取物通过超声的方法进行降解，所述超声的条件为：180-210kHz，15-25℃。本专利技术还提供了一种防治银屑病的脆弱拟杆菌提取物或者药物或者食品。具体技术方案如下：一种防治银屑病的脆弱拟杆菌提取物或者药物或者食品，所述药物或食品中含有所述脆弱拟杆菌提取物，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.脆弱拟杆菌提取物在制备防治银屑病的药物或食品中的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌提取物中含有脆弱拟杆菌荚膜多糖A。

【技术特征摘要】
1.脆弱拟杆菌提取物在制备防治银屑病的药物或食品中的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌提取物中含有脆弱拟杆菌荚膜多糖A。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为2～110KD。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为5～95KD。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为60KD～85KD。5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌为保藏编号为CGMCCNo.10685的脆弱拟杆菌ZY-312。6.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌提取物的制备方法包括以下步骤：(1)将发酵培养后的脆弱拟杆菌菌液离心沉淀，收集第一沉淀物，取所述第一沉淀物加入65-72℃的水，溶解后再加入苯酚溶液，保持65-72℃搅拌25-35min，离心，收集第一上清液；(2)将步骤(1)中收集的第一上清液用乙醚萃取去除苯酚，再去除残留的乙醚，收集水相溶液；(3)在步骤(2)中收集到的水相溶液中加入无水乙醇至乙醇的终浓度为75-85v/v％，醇沉，离心，收集第二沉淀物；(4)取所述第二沉淀物...

【专利技术属性】
技术研发人员：智发朝，王晔，刘洋洋，李平，白杨，邝高波，郑丽君，
申请(专利权)人：广州知易生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44