一种靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物及其药物组合物和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有下式所示结构靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物或其药学上可接受的盐，还公开了一种包括该化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体的药物组合物以及该药物化合物制成的制剂。该类化合物表现出了优异的EGFR降解作用且具有良好的抗肿瘤活性，因此，本发明专利技术还公开了所述化合物在制备EGFR蛋白抑制剂和制备预防或/和治疗癌症中的应用，在医疗领域具有巨大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物及其药物组合物和应用
本专利技术涉及化合物合成
，具体涉及一种靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物或其药学上可接受的盐和以该化合物为活性成分的药物组合物，以及在治疗和/或预防肿瘤中的应用。
技术介绍
泛素-蛋白酶体途径(ubiquitinproteasomepathway，UPP)是细胞内蛋白质降解的主要途径，参与细胞内80％以上蛋白质的降解。UPP由泛素、泛素活化酶E1、泛素结合酶E2、泛素连接酶E3、蛋白酶体及其底物(蛋白质)构成。UPP特异性降解蛋白质的过程分两个阶段：(1)蛋白底物泛素化：泛素分子由APP提供能量，被E1激活转移到E2，然后经E3与特异性蛋白底物结合；(2)蛋白底物降解：被泛素化的蛋白分子能够被蛋白酶体识别，并进入蛋白酶体降解成短链的多肽分子。蛋白水解靶向嵌合分子(ProteolysisTargetingChimeras，PROTACs)是利用一种双功能小分子将目标蛋白和细胞内的E3拉近，从而导致目标蛋白质的降解，PROTACs包含三部分功能结构：(1)可以与蛋白底物相结合的部分；(2)能够与E3相结合的部分；(3)前两部分的连接链。细胞内PROTACs可以同时与靶蛋白及E3结合，使本来不能与E3结合的靶蛋白泛素化，进而被蛋白酶体识别并降解(Angew.Chem.Int.Ed.Engl,2016,55(6),1996-1973)。研究证明，下式化合物A类似物可以与CRBN蛋白结合，CRBN蛋白为CUL4-RBX1-DDB1-Cereblon(CRL4CRBN)E3泛素连接酶复合物的底物受体蛋白，结合后通过泛素-蛋白酶体途径进行蛋白水解(Nature,2014,512(7512):49-53)。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了一种靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物，该类化合物表现出了优异的EGFR降解作用且具有良好的抗肿瘤活性，在医疗领域具有巨大的应用前景。本专利技术的另一目的在于提供了上述靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物制备EGFR蛋白抑制剂中的应用，还提供了上述化合物在在预防和/或治疗癌症中的应用。具有式Ⅰ或式Ⅱ所示的靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物，或其药学上可接受的盐：式Ⅰ和式Ⅱ中，m为1～2的整数，n为1～6的整数。本专利技术所述的化合物为一种蛋白水解靶向嵌合分子(PROTACs)，其包括可以与EGFR蛋白底物相结合的部分、可以与E3结合的部分以及连接链，利用这种双功能小分子可以将目标蛋白和细胞内的E3拉近，从而使本来不能与E3结合的EGFR靶蛋白泛素化，进而被蛋白酶体识别并降解。优选地，上述n为2～4的整数，优选的化合物降解EGFR蛋白效果更好，其抗肿瘤活性也更强。本专利技术还公开了上述靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物的制备方法，所述的式Ⅰ和式Ⅱ化合物的制备过程如下：具体包括：分别将式III化合物或式V化合物溶于有机溶剂中，于室温下加入式IV化合物和二异丙基乙胺，加热至80～90℃反应10～14h，萃取、洗涤、干燥后，分别得到式I或式II所示的化合物。本专利技术还公开了一种药物组合物，包括上述化合物或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的载体。此外，本专利技术包括药物组合物，该组合物含有通式I和Ⅱ化合物或其药学上可接受的盐、水合物和药物上可接受的赋形剂。所述药物上可接受的赋形剂是指任何可用于药物领域的稀释剂、辅助剂和/或载体。本专利技术的化合物可以与其他活性成分组合使用，只要它们不产生其它不利作用，如过敏反应。上述药物组合物的制剂，包括所述的药物组合物中加入药学上可接受的辅料制备成口服制剂、注射制剂或局部制剂。其中，口服制剂可为片剂、胶囊剂、溶液或混悬液；注射制剂可为注射溶液或混悬剂或可注射的干燥粉末，在注射前加入注射用水可立即使用；局部制剂可为软膏或溶液。其中，药学上可接受的载体包括：口服制剂用的粘合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稀释剂、稳定剂、悬浮剂、色素或矫味剂；注射制剂用的防腐剂、加溶剂或稳定剂；局部制剂用的基质、稀释剂、润滑剂、防腐剂等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(如静脉内、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可将其配制成肠衣片剂。通过WesternBlot试验筛选，发现上述化合物可降解EGFR蛋白，因此本专利技术还公开了上述化合物在制备EGFR蛋白抑制剂中的应用。本专利技术化合物可用于与EGFR蛋白酶活性异常表达相关的疾病中的应用，通过体外活性筛选，我们发现本专利技术化合物具有抗肿瘤活性，因此本专利技术还公开了上述化合物在制备预防或/和治疗癌症中的应用。优选地，所述的癌症为乳腺癌、结肠癌、前列腺癌、胰腺癌、甲状腺乳头状癌、卵巢癌、黑色素瘤、白血病或非小细胞肺癌。本专利技术还公开了一种靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防或/和治疗非小细胞肺癌中的应用，所述化合物的结构为：在上述应用中，上述化合物制得的抗癌制剂可单独使用，还可以与其它抗肿瘤药物联合使用，其中，联合治疗通过将各个治疗组分顺序或隔开给药来实现。本专利技术与现有技术相比，具有以下有益效果：本专利技术选用化合物A结构类似物作为PROTACs中与E3连接酶进行结合的部位，选用合适的连接链将其与具有EGFR蛋白酶抑制剂活性的结构相连接构建PROTACs。本专利技术体外抗肿瘤活性测试及体外EGFR蛋白降解活性表明，所述靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物(PROTACs)表现出了良好的抗肿瘤活性，并表现出优异的EGFR蛋白降解作用，可用于预防或/和治疗多种癌症，在医药领域具有巨大的应用前景。附图说明图1为实施例6得到的化合物P3的核磁氢谱图；图2为实施例9得到的化合物P6的核磁氢谱图。具体实施方式下文中提供的实施例和制备例进一步阐明和举例说明本化合物及其制备方法，应当理解，下述实施例和制备例的范围并不以任何方式限制本专利技术的范围。下面的合成路线描述了本专利技术式I和式II化合物的制备过程，所有的原料都是通过这些路线中描述的方法、通过有机化学领域普通技术人员熟知的方法制备的或者可商购。本专利技术的全部最终化合物都是通过这些路线中描述的方法或通过与其类似的方法制备的，这些方法是有机化学领域普通技术人员熟知的。本专利技术中涉及的缩写词意义为：Boc为叔丁氧羰基，DMF为二甲基甲酰胺，DIPEA为二异丙基乙胺，TBAB为四丁基溴化铵，EA为乙酸乙酯，Et为乙基，Me为甲基，M即摩尔，PE为石油醚，pH为苯基，THF为四氢呋喃，TFA为三氟乙酸，TLC为薄层色谱，NSCLC为非小细胞肺癌，WT为野生型。(1)基于“碘取代”设计合成E3小分子(化合物7)的合成：(2)EGFR靶向小分子(化合物8)的合成：(3)PROTACs化合物(式I和式II)的合成方法在蛋白靶向嵌合体技术中，连接基团的选择具有非常重要的作用，目前主要是其长度和种类的筛选。本专利技术对连接基团的长度进行筛选，合成了以下八个具有不同长度连接的PROTACs小分子化合物，具体结构如下表1所示：表1实施例1：E3小分子(化合物7)的合成(1)化合物2的制备化合物2a的制备：将二甘醇(7.0g,66.0mmol)溶于10mL二氯甲烷溶液中，加入Et3N(13.3g,132.2mmol)，冰浴下滴加TsCl(15.1g,7本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.具有式Ⅰ或式Ⅱ所示的靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物，或其药学上可接受的盐：

【技术特征摘要】
1.具有式Ⅰ或式Ⅱ所示的靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物，或其药学上可接受的盐：式中，m为1或2，n为1～6的整数。2.根据权利要求1所述的靶向泛素化降解EGFR蛋白的化合物的制备方法，其特征在于，所述的式Ⅰ和式Ⅱ化合物的制备过程如下：具体包括：分别将式III化合物或式V化合物溶于有机溶剂中，于室温下加入式IV化合物和二异丙基乙胺，加热至80～90℃反应10～14h，萃取、洗涤、干燥后，分别得到式I或式II所示的化合物。3.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的载体。4.一种根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：张兴贤，
申请(专利权)人：杭州偶联医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33