一种基于DELFIA的农残检测装置及检测方法制造方法及图纸

本发明专利技术提供一种基于DELFIA的农残检测装置及检测方法，包括离心盘和荧光检测机构的分析仪，固定设置在离心盘上并通过离心作用获取检验液的微流控芯片；所述微流控芯片内部沿离心盘的径向由内至外依次设置有样品孔、过滤孔、第一反应孔、第二反应孔以及废液孔；样品孔、过滤孔、第一反应孔、第二反应孔以及废液孔之间依次通过微流道连通，在各微流道口分别设置有不同厚度的糖膜，不同厚度的糖膜根据不同的离心转速而分别开启微流道；所述样品孔用于容纳农残检验液的样品溶液并通过离心转动而搅拌均匀；从而检测出农作物样品中的有害成份含量，整个过程手动操作工序少，且操作简单，实现农残样品溶液的快速检测。

【技术实现步骤摘要】
一种基于DELFIA的农残检测装置及检测方法
本专利技术涉及农药残留检验领域，尤其涉及的是一种基于DELFIA的农残检测装置及检测方法。
技术介绍
农业产业化的发展使农产品的生产越来越依赖于农药、抗生素和激素等外源物质。我国农药在农产品的用量居高不下，而这些物质的不合理使用必将导致农产品中的农药残留超标，影响消费者食用安全，严重时会造成消费者致病、发育不正常，甚至直接导致中毒死亡。农药残留超标也会影响农产品的贸易，世界各国对农药残留问题高度重视，对各种农副产品中农药残留都规定了越来越严格的限量标准，使中国农产品出口面临严峻的挑战。目前农药残留快速检测方法种类繁多，主要有酶法，酶联免疫法以及胶体金法，三种方法均是通过一步步加入不同的化学物质，分步反应，最后得到检验液，再进行检验分析，对比得到结果。农残的酶联免疫法检验原理为：在一定条件下，有机磷和氨基甲酸类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计测定412nm下吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。在实现过程中的试剂步骤为：配置缓冲液，取1包缓冲剂加入500mL蒸馏水或纯净水中，搅拌溶解制成磷酸缓冲液(pH7.6),常温保存。配置显色剂:取1瓶显色剂加25mL缓冲液溶解，使用时取100μL，4℃冰箱保存。配置底物:取1瓶底物加12.5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用时取100μL，4℃冰箱保存;或取1瓶底物加2.5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用时取20μL，4℃冰箱保存。配置胆碱酯酶:使用时取100μL，4℃冰箱保存。上述方法在操作时每一步都需要加入试剂再按标准进行操作，从而导致使用较多的试剂且步骤很多，操作复杂。因此，现有技术还有待于改进和发展。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题在于，针对现有技术的上述缺陷，提供一种基于DELFIA的农残检测装置及检测方法，能够简化农残检测步骤，优化检测方式，实现农残快速检测。本专利技术解决技术问题所采用的技术方案如下：一种基于DELFIA的农残检测装置包括带有离心盘和荧光检测机构的分析仪，固定设置在离心盘上并通过离心作用获取检验液的微流控芯片；所述微流控芯片内部沿离心盘的径向由内至外依次设置有样品孔、过滤孔、第一反应孔、第二反应孔以及废液孔；样品孔、过滤孔、第一反应孔、第二反应孔以及废液孔之间依次通过微流道连通，在各微流道口分别设置有不同厚度的糖膜，不同厚度的糖膜根据不同的离心转速而分别开启微流道；所述样品孔用于容纳农残检验液的样品溶液并通过离心转动而搅拌均匀；所述过滤孔用于接收所述样品孔中的样品溶液并过滤掉高分子杂质以及吸附脂溶性杂质；所述第一反应孔用于接收所述过滤孔中的样品溶液且使样品溶液中抗原与位于第一反应孔内的荧光螯合试剂标记抗体进行特异性免疫反应；所述第二反应孔用于接收所述第一反应孔中的样品溶液，通过固定在第二反应孔中的抗原捕捉溶液中剩余的所有未被反应的螯合试剂标记的抗体；所述废液孔用于接收所述第二反应孔中的多余废液；所述第二反应孔与所述废物室之间的微流道内设置有填料，所述填料通过吸水后膨胀而堵塞第二反应孔通往废液孔之间的微流道而分离第二反应孔内的带荧光标记的免疫复合物和废液孔内的废液。进一步，所述过滤孔内设置有多层用于过滤掉高分子杂质的滤膜，所述相连两滤膜之间设置有用于吸附脂溶性杂质的过滤填料层。进一步，所述第一反应孔的底面均匀铺设冻干的荧光螯合试剂标记抗体；所述荧光螯合试剂为DTTA-Eu螯合试剂。进一步，所述第二反应孔的表面固化设置有BSA偶联的抗原层。进一步，所述第二反应孔的一侧通过微流道连通有复溶液孔，微流道的一端设置有用于启闭微流道的第五糖膜，所述复溶液孔用于容纳复溶液和荧光增强液。进一步，所述第一反应孔设置有多个，多个第一反应孔通过单个微流道与过滤孔相连通，所述第二反应孔与第一反应孔对应设置有多个。进一步，所述微流控芯片外形轮廓为扇形，扇形微流控芯片设置有多个并以离心盘的旋转中心围成一个圆。一种基于DELFIA的农残检验液的检验方法，适用于如上所述的农残检测装置，包括有步骤：将农产品的样品溶液加入到微流控芯片中的样品孔；密封样品孔；将微流控芯片固定安装在离心盘上；启动离心盘对微流控芯片进行离心操作；溶液完成离心操作后开启荧光检测机构对第二反应孔发射激发光；测量发射光并结合预定曲线计算样品中的抗原浓度。进一步，在所述启动离心盘对微流控芯片进行离心操作的步骤中具体包括：离心盘按第一速度正反向交替转动使样品孔与过滤孔之间的微流道口的糖膜被冲破且样品溶液通过过滤孔；离心盘按第二速度反向转动使过滤孔与第一反应孔之间的微流道口的糖膜被冲破且样品溶液进入第一反应孔；离心盘按第三速度正向转动使样品溶液在第一反应孔内混合反应；离心盘按第四速度正向转动使第一反应孔与第二反应孔之间的微流道口的糖膜被冲破且样品溶液进入第一反应孔；离心盘按第五速度反向转动使样品溶液在第二反应孔内混合反应；离心盘按第六速度反向转动使第二反应孔与废液孔之间的微流道口的糖膜被冲破且多余样品溶液进入废液孔；离心盘按第七速度反向转动使多余样品溶液完全进入废液孔。进一步，所述第一速度为1500转/分钟,正反转各运行时间为1分钟；所述第二速度为3000转/分钟,运行时间为1分钟；所述第三速度为3000转/分钟,运行时间为1分钟；所述第四速度为4500转/分钟,运行时间为1分钟；所述第五速度为4500转/分钟,运行时间为1分钟；所述第六速度为6000转/分钟,运行时间为1分钟；所述第七速度为6000转/分钟,运行时间为1分钟。采用上述方案的有益效果是：本专利技术提出的一种基于DELFIA的农残检测装置及检测方法，通过在一个微流控芯片内设置不同的腔室并通过不同的糖膜依次开启不同腔室与样品溶液进行反应，从而使现有复杂的配料过程集成在不同腔室中，从而只需要添加农产品的待测溶液（样品溶液）就能离心得到时间免疫荧光层析法所需要的检测液，使操作步骤简单，试剂消耗少。且本方法中采用微流道进行管道连通，从而实现精细控制，相比人工加样定量更为精确，溶液量只需进样50-100微升，包埋约200微升反应试剂，从而减少试剂的浪费，检测限最低可至PPt级别，检测结果重现性好，且反应盒可保存，各腔室独立设置，避免交叉污染，结果可重现。附图说明图1是本专利技术一种基于DELFIA的农残检测装置实施例的结构示意图。图2是本专利技术一种基于DELFIA的农残检测装置实施例的正视图。图3是本专利技术一种基于DELFIA的农残检测装置实施例的微流控芯片剖视图。图4是本专利技术一种基于DELFIA的农残检测装置实施例的微流控芯片剖视图。图5是本专利技术另一种基于DELFIA的农残检测装置实施例的过滤孔剖视图。图6是本专利技术另一种基于DELFIA的农残检测装置实施例的微流控芯片剖视图。图7是本专利技术一种基于DELFIA的农残检验液的检测方法的流程图。图中：100、离心盘；200、微流控芯片；210、糖膜；211、第一糖膜；212、第二糖膜；213、第三糖膜；214、第四糖膜；215、第五糖膜；220、样品孔；230、过滤孔；231、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于DELFIA的农残检测装置，包括带有离心盘和荧光检测机构的分析仪，其特征在于：还包括有固定设置在离心盘上并通过离心作用获取检验液的微流控芯片；所述微流控芯片内部沿离心盘的径向由内至外依次设置有样品孔、过滤孔、第一反应孔、第二反应孔以及废液孔；样品孔、过滤孔、第一反应孔、第二反应孔以及废液孔之间依次通过微流道连通，在各微流道口分别设置有不同厚度的糖膜，不同厚度的糖膜根据不同的离心转速而分别开启微流道；所述样品孔用于容纳农残检验液的样品溶液并通过离心转动而搅拌均匀；所述过滤孔用于接收所述样品孔中的样品溶液并过滤掉高分子杂质以及吸附脂溶性杂质；所述第一反应孔用于接收所述过滤孔中的样品溶液且使样品溶液中抗原与位于第一反应孔内的荧光螯合试剂标记抗体进行特异性免疫反应；所述第二反应孔用于接收所述第一反应孔中的样品溶液，通过固定在第二反应孔中的抗原捕捉溶液中剩余的所有未被反应的螯合试剂标记的抗体；所述废液孔用于接收所述第二反应孔中的多余废液；所述第二反应孔与所述废物室之间的微流道内设置有填料，所述填料通过吸水后膨胀而堵塞第二反应孔通往废液孔之间的微流道而分离第二反应孔内的带荧光标记的免疫复合物和废液孔内的废液。...

【技术特征摘要】
1.一种基于DELFIA的农残检测装置，包括带有离心盘和荧光检测机构的分析仪，其特征在于：还包括有固定设置在离心盘上并通过离心作用获取检验液的微流控芯片；所述微流控芯片内部沿离心盘的径向由内至外依次设置有样品孔、过滤孔、第一反应孔、第二反应孔以及废液孔；样品孔、过滤孔、第一反应孔、第二反应孔以及废液孔之间依次通过微流道连通，在各微流道口分别设置有不同厚度的糖膜，不同厚度的糖膜根据不同的离心转速而分别开启微流道；所述样品孔用于容纳农残检验液的样品溶液并通过离心转动而搅拌均匀；所述过滤孔用于接收所述样品孔中的样品溶液并过滤掉高分子杂质以及吸附脂溶性杂质；所述第一反应孔用于接收所述过滤孔中的样品溶液且使样品溶液中抗原与位于第一反应孔内的荧光螯合试剂标记抗体进行特异性免疫反应；所述第二反应孔用于接收所述第一反应孔中的样品溶液，通过固定在第二反应孔中的抗原捕捉溶液中剩余的所有未被反应的螯合试剂标记的抗体；所述废液孔用于接收所述第二反应孔中的多余废液；所述第二反应孔与所述废物室之间的微流道内设置有填料，所述填料通过吸水后膨胀而堵塞第二反应孔通往废液孔之间的微流道而分离第二反应孔内的带荧光标记的免疫复合物和废液孔内的废液。2.根据权利要求1所述的基于DELFIA的农残检测装置，其特征在于：所述过滤孔内设置有多层用于过滤掉高分子杂质的滤膜，所述相连两滤膜之间设置有用于吸附脂溶性杂质的过滤填料层。3.根据权利要求2所述的基于DELFIA的农残检测装置，其特征在于：所述第一反应孔的底面均匀铺设冻干的荧光螯合试剂标记抗体；所述荧光螯合试剂为DTTA-Eu螯合试剂。4.根据权利要求3所述的基于DELFIA的农残检测装置，其特征在于：所述第二反应孔的表面固化设置有BSA偶联的抗原层。5.根据权利要求1所述的基于DELFIA的农残检测装置，其特征在于：所述第二反应孔的一侧通过微流道连通有复溶液孔，微流道的一端设置有用于启闭微流道的第五糖膜，所述复溶液孔用于容纳复溶液和荧光增强液。6.根据权利要求5所述的基于DELFIA的农残检测装置，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨松林，王军，马丽，张祺，吕丽珊，
申请(专利权)人：广州安诺科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44