脆弱拟杆菌在制备用于诱导γδT细胞增殖和/或积累的药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，本发明专利技术提供脆弱拟杆菌在制备用于诱导γδT细胞增殖和/或积累的药物中的应用，特别涉及脆弱拟杆菌在制备用于增强γδT细胞功能的药物中的应用。

Application of Bacteroides fragilis in the preparation of drugs for inducing the proliferation and/or accumulation of gamma-delta T cells

The invention belongs to the field of biomedicine, and provides the application of Pseudomonas fragilis in the preparation of drugs for inducing the proliferation and/or accumulation of gamma-delta T cells, in particular the application of Pseudomonas fragilis in the preparation of drugs for enhancing the function of gamma-delta T cells.

【技术实现步骤摘要】
脆弱拟杆菌在制备用于诱导γδT细胞增殖和/或积累的药物中的应用
本专利技术属于免疫学研究领域，本专利技术涉及在感染性疾病和/或肿瘤中具有诱导γδT细胞(尤其是TCRγδ强阳性T细胞)的增殖、积累和更强的效应功能的组合物，且该组合物包含脆弱拟杆菌或由脆弱拟杆菌获得的生理活性物质、或包含使用脆弱拟杆菌的组合物等作为活性成分。本专利技术还涉及在感染性疾病和/或肿瘤中诱导γδT细胞的增殖及增强其效应功能的方法。
技术介绍
数百种共生微生物物种居住在哺乳动物的胃肠道内，并与宿主免疫系统密切相互作用。使用无菌(GF)动物的研究结果表明，共生微生物对黏膜免疫系统的形成发挥很大影响，黏膜免疫系统的形成诸如派尔集合淋巴结(peyer’spatch)(PP)和单独的淋巴滤泡(ILF)的组织发生、抗微生物肽从上皮的分泌和黏膜组织中独特淋巴细胞的积累，独特淋巴细胞包括产生免疫球蛋白A的浆细胞、上皮内淋巴细胞、产生IL-17的阳性T细胞(Th17)和产生IL-22的NK样细胞。因此，肠道细菌的存在增强了黏膜的保护功能，为宿主提供了抵抗侵入机体的病原微生物的强大免疫反应。另一方面，黏膜免疫系统维持了对膳食抗原和无害微生物的无反应性。因此，共生细菌和免疫系统之间交叉效应(cross-talk)的调节异常(肠道生态失调)可能导致针对环境抗原的过度的免疫反应，从而引起炎性肠病(IBD)。最近的研究结果表明单独共生细菌控制黏膜免疫系统中其特异性免疫细胞的分化。分节丝状菌是小鼠的肠道共生细菌，研究表明它可以诱导黏膜Thl7细胞应答并由此增强针对宿主胃肠道的病原体感染的抗性。另外，已知由几种共生细菌获得的短链脂肪酸阻遏肠道炎症。脆弱拟杆菌(Bacteroidesfragilis)是一种革兰氏染色阴性、杆状、两端钝圆而浓染，有荚膜、无芽胞、无动力的专性厌氧细菌，其分为产肠毒素型和非产肠毒素型。脆弱拟杆菌作为人及动物肠道正常菌群的一部分，主要存于结肠中，此外，呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道也可定植生长。γδΤ细胞是Τ淋巴细胞中的一群特殊的细胞亚群，具有独特的结构和生物学功能。与一般的αβΤ细胞不同，γδΤ细胞表面受体由γ链和δ链两种糖蛋白链组成，这群细胞识别抗原不需要经细胞表面组织相容性抗原分子提呈，它可直接识别蛋白质、肽类和非肽类抗原，是γδΤ细胞的一个重要生物学特性。尽管γδΤ细胞在外周血和淋巴器官中比例比αβΤ细胞小，但是在人体特异性和非特异性免疫系统中均起着非常重要的作用，其可以在抗原的刺激下大幅度扩增与积累，而且可以迅速迁移到非淋巴器官发挥抗感染与抗肿瘤作用，不但能够防御病原体包括细菌、真菌、病毒和寄生虫的侵入，而且在肿瘤的免疫监视、维持组织自身稳态、炎症反应和炎症后期组织的修复上均发挥重要作用。但是，脆弱拟杆菌是否并且如何影响γδΤ细胞的免疫学功能仍然不清楚。如何实现γδΤ细胞的高效增殖和/或积累及更强的效应功能也不清楚。因此，如果阐明了脆弱拟杆菌可以影响γδT细胞的增殖并增强其效应功能，进而增强γδT细胞免疫功能，这对于治疗和/预防肿瘤、结核病、耐药细菌、真菌、病毒、衣原体等感染具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的一个目的在感染性疾病和/或肿瘤中提供包含脆弱拟杆菌或由其获得的生理活性物质及组合物，诱导γδT细胞的增殖及其效应功能。本专利技术的主要目的还在于提供在感染性疾病和/或肿瘤中诱导增强γδT细胞的效应功能的方法。本专利技术人发现在感染性疾病和/或肿瘤中通过脆弱拟杆菌增强γδT细胞和/或TCRγδ强阳性T细胞的增殖以及效应功能来调控T细胞免疫应答是可能的。具体而言，本专利技术人发现在感染性疾病和/或肿瘤中包含脆弱拟杆菌或由其获得的生理活性物质及组合物可以促进淋巴器官中γδT细胞和/或TCRγδ强阳性T细胞的系统性的增殖以及γδT细胞中IFN-γ表达的增多进而增强所述T细胞的抗感染以及抗肿瘤作用，从而使本专利技术得以完成。更具体地，本专利技术具有以下方面:本专利技术提供了脆弱拟杆菌(Bacteroidesfragilis)在制备用于诱导γδT细胞增殖和/或积累的药物中的应用。优选地，脆弱拟杆菌为以下中的任意一种：脆弱拟杆菌活菌体；经基因重组、改造或修饰、减毒、化学处理、物理处理或灭活的脆弱拟杆菌；脆弱拟杆菌裂解物；和/或脆弱拟杆菌培养上清液。优选地，所述γδT细胞是以TCRγδ+(或又称：γδTCR+、TCR-γδ+、或γδ-TCR)为γδΤ细胞的表型特征。本专利技术还提供了一种用于诱导γδT细胞增殖和/或积累的组合物，其包括脆弱拟杆菌作为活性成分。优选地，脆弱拟杆菌为以下中的任意一种：脆弱拟杆菌活菌体；经基因重组、改造或修饰、减毒、化学处理、物理处理或灭活的脆弱拟杆菌；脆弱拟杆菌裂解物；和/或脆弱拟杆菌培养上清液。更优选地，组合物是药物组合物、食品、保健品或食品添加剂中的任意一种。在另一方面，本专利技术提供了脆弱拟杆菌在制备用于增强γδT细胞功能的药物中的应用。优选地，脆弱拟杆菌为以下中的任意一种：脆弱拟杆菌活菌体；经基因重组、改造或修饰、减毒、化学处理、物理处理或灭活的脆弱拟杆菌；脆弱拟杆菌裂解物；和/或脆弱拟杆菌培养上清液。本专利技术还提供了用于增强γδT细胞功能的组合物，其包括脆弱拟杆菌作为活性成分。优选地，脆弱拟杆菌为以下中的任意一种：脆弱拟杆菌活菌体；经基因重组、改造或修饰、减毒、化学处理、物理处理或灭活的脆弱拟杆菌；脆弱拟杆菌裂解物；和/或脆弱拟杆菌培养上清液。更优选地，组合物是药物组合物、食品、保健品或食品添加剂中的任意一种。具体地，本专利技术还提供了一种在个体(如有相应需要的个体，诸如需要诱导γδT细胞增殖和/或积累及更强的效应功能的个体)中诱导γδT细胞的增殖、迁移和效应功能增强的方法，所述方法包括如下步骤：(a)包括向个体施用所述组合物包含以下至少一种物质作为活性成分：脆弱拟杆菌为脆弱拟杆菌活菌体；经基因重组、改造或修饰、减毒、化学处理、物理处理或灭活的脆弱拟杆菌；脆弱拟杆菌裂解物；和/或脆弱拟杆菌培养上清液。(b)诱导γδΤ细胞效应功能：施用活性成分当日按第0天计算，每隔3天施用活性成分诱导，两周后以病原感染小鼠或者移植肿瘤，并持续施用活性成分，于第30天解剖小鼠，检测小鼠体内γδΤ细胞的含量；(c)γδΤ细胞含量的检测：采用流式细胞术，以TCRγδ、CD4和CD8作为分子标记，TCRγδ+为γδΤ细胞的表型特征,检测γδΤ细胞在培养细胞中所占的比例；(d)检测γδΤ细胞的效应功能：采用流式细胞术，分析表达干扰素(IFN-γ)的γδT细胞所占比例；根据所述的方法，其中对TCRγδ+的测量用作所述个体中γδT细胞的增殖或积累的指标。根据所述的方法，具有功能增强的γδT细胞，其中所述功能增强是指机体抗感染和抗肿瘤的能力增强。根据所述的方法，具有抗感染功能增强的γδT细胞和/或γδT强阳性细胞，其中所述抗感染功能增强是T细胞干扰素-γ(IFN-γ)的产生增强。根据所述的方法，增强γδT细胞的效应功能，其中还向个体施用感染性病原体或移植肿瘤。本专利技术的组合物含有脆弱拟杆菌作为活性成分，是诱导γδT细胞的增殖、积累、或促进其效应功能的极佳组合物。可通过施用作为药物产品的本专利技术的组合物或作为食品或饮料摄取所述组合物来增强活生物体中的免疫性。因此、本专利技术的组合物可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)在制备用于诱导γδT细胞增殖和/或积累的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.脆弱拟杆菌(Bacteroidesfragilis)在制备用于诱导γδT细胞增殖和/或积累的药物中的应用。2.脆弱拟杆菌在制备用于诱导TCRγδ强阳性T细胞增殖和/或积累的药物中的应用。3.根据权利要求1和/或2所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌为以下中的任意一种：脆弱拟杆菌活菌体；经基因重组、改造或修饰、减毒、化学处理、物理处理或灭活的脆弱拟杆菌；脆弱拟杆菌裂解物；和/或脆弱拟杆菌培养上清液。4.一种用于诱导γδT细胞增殖和/或积累的组合物，其特征在于包括脆弱拟杆菌作为活性成分。5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述脆弱拟杆菌为以下中的任意一种：脆弱拟杆菌活菌体；经基因重组、改造或修饰、减毒、化学处理、物理处理或灭活的脆弱拟杆菌；脆弱拟杆菌裂解物；和/或脆...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾谷城，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东,44