一种菊花组织培养方法及组织培养的培养基技术

本发明专利技术公开了一种菊花组织培养方法及组织培养的培养基，属于植物组织培养技术领域。本发明专利技术组培培养的培养基包括该增殖培养基和生根培养基，其中增殖培养基为0.8mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA+0.2mg/L PVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的MS培养基，pH为5.8，生根培养基为0.6mg/L NAA+0.2mg/L PVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的1/2MS培养基，pH为5.8。本发明专利技术的组织培养方法具有操作简单、成本低廉及菊花组培苗繁育率较高等优点。

A Tissue Culture Method and Medium for Chrysanthemum morifolium

The invention discloses a chrysanthemum tissue culture method and a tissue culture medium, belonging to the technical field of plant tissue culture. The tissue culture medium comprises the proliferation medium and the rooting medium, in which the proliferation medium is 0.8mg/L 6 BA+0.5mg/L NAA+0.2mg/L PVP+30g/L sucrose+6g/L agar powder MS medium, the pH is 5.8, the rooting medium is 0.6mg/L NAA+0.2mg/L PVP+30g/L sucrose+6g/L agar powder 1/2MS medium, and the pH is 5.8. The tissue culture method of the invention has the advantages of simple operation, low cost and high propagation rate of chrysanthemum tissue culture seedlings.

【技术实现步骤摘要】
一种菊花组织培养方法及组织培养的培养基
本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种菊花组织培养方法及组织培养的培养基。
技术介绍
菊花(Dendranthemamorifolium(Ramat.)Tzvel.)属于菊科菊属的多年生宿根草本植物。菊花是中国十大名花之一，也是世界四大切花之一，分布遍及全球。近些年来，随着世界花卉产业的发展，通过传统的繁殖方法已经不能够满足市场需求，而遗传转化技术显示了独特的优越性，可以定向修饰菊花某些目标形状，使其在花色、花期、抗逆性等方面发挥重要的作用，而且成功的基因首先依赖于良好的菊花再生体系的建立，要求一定的再生频率和转化率，同时还需具有稳定性和重复性。组织培养不仅繁殖系数高、繁殖速度快，而且还可进行品种的脱毒复壮、种质资源保存等，但根据现有的组培技术，试验过程中会出现菊花褐变现象，同时不少经过增殖培养基培养的组培苗株高较低，需要经过壮苗培养基后才能接种到生根培养基中，一定程度上延长了培养时间，增加了培养成本。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了一种能够有效缩短繁育周期、降低繁育成本且能够有效提高组培苗繁育率的菊花组织培养方法及组织培养的培养基。本专利技术为实现上述目的采用如下技术方案，一种菊花组织培养方法，其特征在于具体步骤为：步骤S1：将健壮的HH-62品种的菊花组培苗去根分成茎高2.5cm、带1-2片叶子的茎段，然后接种于增殖培养基中进行培养，该增殖培养基为0.8mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.2mg/LPVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的MS培养基，pH为5.8，培养条件为：温度为25±2℃，光照时间14h，光照强度2000-3000LX，培养天数15d，该培养条件下培养的组培苗的平均株高为7.44cm，增殖系数为15.36；步骤S2：选取长势一致且健壮的经过增殖培养基培养的组培苗，去根后接种于生根培养基中进行培养，该生根培养基为0.6mg/LNAA+0.2mg/LPVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的1/2MS培养基，pH为5.8，培养条件为：温度为25±2℃，光照时间14h，光照强度2000-3000LX，培养天数10d，该培养条件培养的组培苗的平均根长4.6，根数为12，生根率为100％。本专利技术所述的菊花组织培养的培养基，其特征在于包括该增殖培养基和生根培养基，其中增殖培养基为0.8mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.2mg/LPVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的MS培养基，pH为5.8，生根培养基为0.6mg/LNAA+0.2mg/LPVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的1/2MS培养基，pH为5.8。本专利技术主要以MS为基本培养基，将无根组培苗接种于特定浓度配比的激素6-BA和NAA组合的增殖和生根培养基中，可实现缩短组培苗繁殖时间和增大繁殖系数的目的，在增殖培养基中加入特定浓度的PVP，可有效抑制菊花褐变现象的产生。菊花在增殖培养过程中提高株高，便于苗木直接接种于生根培养基，缩短繁殖时间，降低繁殖成本。本专利技术的组织培养方法具有操作简单、成本低廉及菊花组培苗繁育率较高等优点。具体实施方式以下通过实施例对本专利技术的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本专利技术上述内容实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1、增殖培养基的筛选试验供试材料为菊花HH-62品种去根组培苗，将健壮的组培苗去根分成茎高2.5cm左右，带1-2片叶子的茎段，分成15组，每组36个，将试验对象接种于表1所列出的增殖培养基中进行培养，统一光照培养条件为：温度为25±2℃，光照时间14h，光照强度2000-3000LX，培养天数15d。增殖培养基为0.2-1.0mg/L6-BA+0.1-0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的MS培养基，PH为5.8。表1菊花增殖培养基处理设计2、增殖培养基的筛选试验结果表2增殖培养结果由此可见，处理12和13的增殖系数比较突出，但从平均株高来看，利于菊花增殖的培养基应选用0.8mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的MS培养基，pH为5.8。3、菊花组培苗的褐变试验供试材料为菊花HH-62品种去根组培苗，接种于表2筛选出的增殖培养基中进行培养，同时加入不同浓度的PVP，观察组培苗褐变率。统一光照培养条件为：温度为25±2℃，光照时间14h，光照强度2000-3000LX，培养天数15d。表3菊花褐变试验处理设计4、菊花组培苗褐变试验结果表4菊花褐变试验结果由表4可知，在增殖培养基中加入0.2mg/LPVP后，可有效抑制菊花褐变现象的产生，有利于优化菊花增殖过程，繁育高质量组培苗，因此防止菊花褐变的增殖培养基为0.8mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.2mg/LPVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的MS培养基，pH为5.8。5、生根培养基的筛选试验供试材料为经表4增殖培养基培养的组培苗，将选取长势长势一致且健壮的组培苗去根分成10组，每组36个茎段，将试验对象接种于表5所列出的生根培养基进行培养，统一光照培养条件为：温度为25±2℃，光照时间14h，光照强度2000-3000LX，培养天数10d。生根培养基为：0.2-1.0mg/LNAA或0.1-0.5mg/LIBA+0.2mg/LPVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的1/2(N)MS培养基，PH为5.8。表5生根培养基试验6、不同生根培养基的试验结果表6不同生根培养基试验结果由表6可知，整体达到最高峰值均出现在处理3，其生根率高达100％，平均根长为4.6cm。从添加单一因素分析，激素NAA作用效果强于IBA，因此利于菊花HH-62生根培养基选用添加0.6mg/LNAA+0.2mg/LPVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的1/2(N)MS培养基，pH为5.8。以上实施例描述了本专利技术的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本专利技术不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本专利技术的原理，在不脱离本专利技术原理的范围下，本专利技术还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本专利技术保护的范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种菊花组织培养方法，其特征在于具体步骤为：步骤S1：将健壮的HH‑62品种的菊花组培苗去根分成茎高2.5cm、带1‑2片叶子的茎段，然后接种于增殖培养基中进行培养，该增殖培养基为0.8mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA+0.2mg/L PVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的MS培养基，pH为5.8，培养条件为：温度为25±2℃，光照时间14h，光照强度2000‑3000LX，培养天数15d，该培养条件下培养的组培苗的平均株高为7.44cm，增殖系数为15.36；步骤S2：选取长势一致且健壮的经过增殖培养基培养的组培苗，去根后接种于生根培养基中进行培养，该生根培养基为0.6mg/L NAA+0.2mg/L PVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的1/2MS培养基，pH为5.8，培养条件为：温度为25±2℃，光照时间14h，光照强度2000‑3000LX，培养天数10d，该培养条件培养的组培苗的平均根长4.6，根数为12，生根率为100％。

【技术特征摘要】
1.一种菊花组织培养方法，其特征在于具体步骤为：步骤S1：将健壮的HH-62品种的菊花组培苗去根分成茎高2.5cm、带1-2片叶子的茎段，然后接种于增殖培养基中进行培养，该增殖培养基为0.8mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.2mg/LPVP+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉的MS培养基，pH为5.8，培养条件为：温度为25±2℃，光照时间14h，光照强度2000-3000LX，培养天数15d，该培养条件下培养的组培苗的平均株高为7.44cm，增殖系数为15.36；步骤S2：选取长势一致且健壮的经过增殖培养基培养的组培苗，去根后接种于生根培养基中进行培养，该生根培养基为0.6mg...

【专利技术属性】
技术研发人员：任冰洁，马小茜，曹绍森，申亮，陈超，崔景辉，李锋，杨梦莉，袁佩海，
申请(专利权)人：山水环境科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41