一种用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置及方法制造方法及图纸

本发明专利技术属于菌物学研究领域，公开了一种用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置及方法，用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置包括玻璃培养皿，所述玻璃培养皿内部放置有圆形滤纸，圆形滤纸表面放置有单凹载玻片，所述单凹载玻片中部设置有凹槽，凹槽上部放置有无菌盖玻片。该发明专利技术结构简单，设计科学，操作简便，省时省力，可直接用于显微观察丝状真菌自然生长状态下菌体的形态特征，避免传统制片过程中引起的菌丝重叠、孢子脱落、气泡产生及对菌体自然生长状态的破坏，便于明确真菌的产孢方式、产孢结构和孢子形成的动态发育过程，保证丝状真菌物种鉴定的准确性与可靠性。

A slicing device and method for microscopic observation of filamentous fungi morphological characteristics

The invention belongs to the field of mycology, and discloses a slicing device and method for microscopic observation of filamentous fungi morphological characteristics. The slicing device for microscopic observation of filamentous fungi morphological characteristics includes a glass Petri dish, in which a circular filter paper is placed inside, a single concave slide is placed on the surface of the circular filter paper, and a groove is arranged in the middle of the single concave slide. The upper part of the trough is provided with a glass sheet with a sterile cover. The invention has the advantages of simple structure, scientific design, simple operation, time-saving and labor-saving. It can be directly used to observe the morphological characteristics of filamentous fungi under natural growth state by microscopy, avoid the overlap of mycelia, spore shedding, bubble generation and destruction of natural growth state of fungi caused by traditional slicing process, and facilitate the identification of the sporulation mode, sporulation structure and dynamic development of spore formation of fungi. The breeding process ensures the accuracy and reliability of identification of filamentous fungi.

【技术实现步骤摘要】
一种用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置及方法
本专利技术属于菌物学研究领域，尤其涉及一种用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置及方法。
技术介绍
长期以来，对丝状真菌的分类研究主要依据菌体形态特征进行描述鉴定，菌体产孢方式、产孢结构及孢子形态特征是属、种界定的主要标准，因此获取真实反映真菌典型形态特征的生物玻片显得十分重要。目前，业内常用的丝状真菌形态特征显微观察制片方法主要为菌丝挑取制片法：首先在载玻片中央滴一滴浮载剂，然后用细挑针从培养基上挑取少量适宜培养的丝状真菌培养物置于浮载剂中，并直接用细挑针将其分散开，最后盖上盖玻片用于显微观察。但此方法存在以下几个不足之处：(1)制片频繁，每观察一次需制片一次，且难以获得观察效果好的生物玻片，需大量制片，耗时耗力；(2)菌丝挑取易引起菌丝交错重叠，致使难以制备最佳的生物玻片，影响真菌典型形态特征的显微观察；(3)菌丝挑取置于浮载剂及加盖盖玻片过程中极易诱使浮载剂产生气泡，影响真菌形态特征显微观察效果；(4)菌丝挑取及加盖盖玻片等极易破坏菌丝自然生长状态，引起真菌孢子脱落，致使制备的生物玻片难以真实反映真菌的产孢方式及孢子形成的动态发育过程，影响丝状真菌物种鉴定的准确性与可靠性。综上所述，现有制片方法极易破坏菌体的自然生长状态，引起菌丝重叠、孢子脱落及气泡产生等系列问题，干扰丝状真菌形态特征的显微观察，影响丝状真菌的形态鉴定。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于丝状真菌形态特征显微观察的制片方法，即针对现有菌丝挑取制片法存在的严重缺陷而建立的一种新的制片方法。本方法无需重复制片，结构简单，设计科学，操作简便，便于全面、精确地观察丝状真菌自然生长状态下的产孢方式、产孢结构和孢子形成的动态发育过程，获得典型的形态特征，保证丝状真菌物种鉴定的准确性与可靠性，弥补现有技术的不足。本专利技术是这样实现的，一种用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置，包括玻璃培养皿，所述玻璃培养皿内部放置有圆形滤纸，圆形滤纸表面放置有单凹载玻片，所述单凹载玻片中部设置有凹槽，凹槽上部放置无菌盖玻片。进一步，所述圆形滤纸的直径为8cm；所述玻璃培养皿的直径为9cm；所述单凹载玻片的尺寸为2.5cm×7.5cm，厚度为3mm；所述凹槽的直径为16mm，深度为2.2mm；所述无菌盖玻片的尺寸为18mm×18mm，厚度为0.13mm–0.17mm。本专利技术的另一目的在于提供一种所述用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置的制片方法，所述用于丝状真菌形态特征显微观察的制片方法包括以下步骤：步骤一、首先将圆形滤纸置于玻璃培养皿中，再将单凹载玻片置于圆形滤纸表面，盖上培养皿盖，高压蒸汽灭菌，于无菌操作台中，用灭菌接种针挑取少量经适宜培养、待观察描述的丝状真菌菌丝连同少量培养基置于单凹载玻片凹槽中央；步骤二、凹槽上部加盖无菌盖玻片，圆形滤纸表面添加适量无菌水，盖上培养皿盖后用封口膜密封，放置于25℃、12h光暗交替培养，以利于真菌生长发育并产生足量分生孢子；步骤三、培养结束后，取出载玻片直接于生物显微镜下观察丝状真菌的形态特征。综上所述，本专利技术的优点及积极效果为：(1)无需重复制片，一次制片，可实现对菌体生长发育状况的连续观察；(2)观察的菌体处于自然生长状态，极少出现菌体交错重叠现象；(3)制片过程中无需添加浮载剂，不存在气泡产生现象；(4)制备的生物玻片可以适时观察菌体不同发育时期的形态特征，便于全面、精确地观察丝状真菌的典型形态特征，保证真菌物种鉴定工作的准确性。因此，本专利技术结构简单、设计科学，易于观察获得丝状真菌自然生长状态下的典型形态特征，明确丝状真菌的产孢方式、产孢结构和孢子形成的动态发育过程，准确鉴定真菌物种的分类地位，弥补现有技术的不足。附图说明图1是本专利技术实施例提供的丝状真菌菌块在单凹载玻片上的生物玻片示意图；图2是本专利技术实施例提供的丝状真菌菌块生物玻片于培养皿中的结构示意图。图3是本专利技术实施例提供的丝状真菌菌块生物玻片培养结束后的结构示意图。图4是本专利技术实施例提供的用于丝状真菌形态特征显微观察的制片方法流程图。图中：1、单凹载玻片；2、无菌盖玻片；3、凹槽；4、真菌菌块；5、圆形滤纸；6、玻璃培养皿。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。将圆形滤纸5(直径8cm)置于玻璃培养皿6(直径9cm)中，再将单凹载玻片1(2.5×7.5cm，厚度3mm)置于圆形滤纸5表面，高压蒸汽灭菌(121℃，98.1kPa)，于无菌操作台中挑取少量适宜培养的丝状真菌菌块4(5×5mm，厚度≤2.2mm)置于单凹载玻片1凹槽3(直径16mm，深度2.2mm)中央，然后盖上无菌盖玻片2(18×18mm，厚度0.13–0.17mm)，圆形滤纸5表面添加适量无菌水，盖上培养皿盖后用ParafilmPM-996封口膜密封，于25℃的生化培养箱中12h光暗交替培养。根据不同丝状真菌的生长特性，依次观察培养3d、5d、7d、10d、15d后的生物玻片，观察不同发育时期真菌的菌体形态特征，明确真菌产孢方式、产孢结构及孢子动态发育过程。本专利技术方法结构简单，设计科学，操作简便，省时省力，可直接显微观察菌体自然状态下的形态特征，获取真实反映物种本质特征的典型形态结构，明确真菌典型的产孢方式、产孢结构及孢子动态发育过程，避免传统制片过程中引起的菌丝重叠、孢子脱落、气泡产生及对菌体自然着生状态的破坏等系列问题，保证了丝状真菌物种鉴定的准确性与可靠性。本专利技术方法制备的丝状真菌形态特征显微观察玻片中的菌体处于自然生长状态，菌体形态特征未受破坏，极少出现菌丝重叠现象，便于真菌产孢方式、产孢结构及孢子动态发育过程的显微观察，确保获得全面反映真菌自然生长状态下不同发育时期的典型形态特征，保证丝状真菌物种鉴定的准确性与可靠性。用于丝状真菌形态特征显微观察的制片方法，步骤如下：S101、首先将圆形滤纸5置于玻璃培养皿中，再将单凹载玻片1置于圆形滤纸5表面，高压蒸汽灭菌，于无菌操作台中挑取少量适宜培养的丝状真菌菌块4置于单凹载玻片1的凹槽3中央；S102、凹槽上部加盖无菌盖玻片2，圆形滤纸5表面添加适量无菌水，盖上培养皿盖后用封口膜密封，放置于25℃、12h光暗交替培养，以利于真菌生长发育并产生足量分生孢子；S103、培养结束后，取出载玻片直接于生物显微镜下观察丝状真菌的形态特征。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例而已，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置，其特征在于，所述用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置包括玻璃培养皿，所述玻璃培养皿内部放置有圆形滤纸，圆形滤纸表面放置有单凹载玻片，所述单凹载玻片中部设置有凹槽，凹槽上部放置有无菌盖玻片。

【技术特征摘要】
1.一种用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置，其特征在于，所述用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置包括玻璃培养皿，所述玻璃培养皿内部放置有圆形滤纸，圆形滤纸表面放置有单凹载玻片，所述单凹载玻片中部设置有凹槽，凹槽上部放置有无菌盖玻片。2.如权利要求1所述的用于丝状真菌形态特征显微观察的制片装置，其特征在于，所述圆形滤纸的直径为8cm；所述玻璃培养皿的直径为9cm；所述单凹载玻片的尺寸为2.5cm×7.5cm，厚度为3mm；所述凹槽的直径为16mm，深度为2.2mm；所述无菌盖玻片的尺寸为18mm×18mm，厚度为0.13mm–0.17mm。3.一种实现权利要求1至...

【专利技术属性】
技术研发人员：马建，徐昭焕，崔汝强，石绪根，况卫刚，
申请(专利权)人：江西农业大学，
类型：发明
国别省市：江西,36