血小板凝聚能力分析方法、血小板凝聚能力分析装置、用于分析血小板凝聚能力的程序及血小板凝聚能力分析系统制造方法及图纸

提供了方便且快速测量血小板凝聚能力的方法。这种血小板凝聚能力分析方法包括：向含血小板样品添加血小板诱导物质和钙盐的步骤；搅拌含血小板样品的步骤；以及获取含血小板样品的电特性和/或粘弹性的测量数据的步骤。

Analysis method of platelet coagulation ability, platelet coagulation ability analysis device, platelet coagulation ability analysis program and platelet coagulation ability analysis system

It provides a convenient and rapid method for measuring platelet aggregation ability. The platelet coagulation assay includes the steps of adding platelet inducers and calcium salts to platelet-containing samples, stirring platelet-containing samples, and acquiring measurement data of electrical properties and/or viscoelasticity of platelet-containing samples.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】血小板凝聚能力分析方法、血小板凝聚能力分析装置、用于分析血小板凝聚能力的程序及血小板凝聚能力分析系统
本专利技术涉及血小板凝聚分析方法、血小板凝聚分析装置、用于血小板凝聚分析的程序以及血小板凝聚分析系统。
技术介绍
抗凝疗法或抗血小板疗法是用于防治血栓形成必不可少的治疗方法，并且其有效性已得到广泛的临床试验证明。然而，存在这样一种情况，即，与抗凝疗法的脑梗塞减少效果相比，抗血小板疗法在降低动脉血栓形成中具有较低的效果。人们认为原因之一在于，在抗凝疗法中，根据凝血酶原时间国际标准化比值(PT-INR)或血栓测试，针对每位病人适当监测药物疗效，而在抗血小板疗法中，监测方法还未建立，尽管有报告已经显示在抗血小板试剂的容受性或效果的维持方面存在显著的个体差异。因此，在即使在抗血小板疗法中也可通过容易理解的方法合适的监测药物疗效的情况下，抗血小板疗法将是用于搜寻在每种情况下药物的适合的使用方法的手段，并且可预期治疗效果的改善。这里，血小板的最基本功能是压敏粘合与凝聚。确定血小板之间附着状态的血小板凝聚检测方法是最常用的定量测定基本功能的方法。具体而言，存在1)渗透率法，2)阻抗法，3)颗粒计算法，等等。在这样的一种检测方法中，根据所使用的凝聚诱导物质的类型或浓度，可以知道血液检查功能减少或增加的细节。特别是渗透率法一般作为日常检查。1)渗透率法是通过添加血小板刺激物质并且利用富血小板血浆(PRP)的透明度随PRP中血小板凝聚而增加的事实，在时间上定量血小板凝聚的方法。渗透率法包括诸如以下的问题：(i)问题：血浆分离是必要的，并且因此，直至测量前测试体的处理是复杂的，利用离心条件获得的PRP的量会变化，血小板的采集率不恒定，且当进行PRP分离操作时，具有高密度的血小板随血红细胞沉淀，并且因此不能观察到这种凝聚方式；(ii)问题：血小板的强度(凝聚率)在一定程度上取决于在凝聚PRP中血小板的数量，并且因此，在血小板数量小于或等于100000/μl的情况下，凝聚前后光吸收率之间的差值很小，因此不能够检测到细微的变化；(iii)问题：不能进行使用诸如全血和乳糜血浆的不透明血浆的检查；以及(iv)问题：在血小板凝聚的形成与透光率之间的相关性差。2)阻抗法是一种检测血小板凝聚随电极之间的电阻变化的方法，并且是一种其中可观察到全血中血小板凝聚的方法，由于没有离心操作，可以观察到血小板的整个凝聚方式。阻抗法包括诸如以下的问题：(v)问题：电阻的初始下降是由于电极之间血红细胞的存在所造成，并且难以确定血小板凝聚的初始状态；以及(vi)问题：与透射率法相比，凝聚模式不稳定。3)颗粒计算法是一种借助于库耳特计数器(Coultercounter)计算未包含在血小板凝聚体或凝聚体形成中的单个血小板的数量而知道凝聚方式的方法。颗粒计算法包括诸如以下的问题：(vii)问题：操纵复杂；(viii)问题：不能够记录连续的变化；以及(ix)问题：根据凝聚诱导物质引起的血小板溶解被错误地计算为单个血小板的减少。另一方面，近年来，已提出对血液凝固过程进行电解质测量的方法作为一种可以简单且正确评估出血液凝固性测量的方法(专利文献1)。该方法是这样一种方法，其中：将包括一对电极等的冷凝器状的样品部分填满血液，对样品部分施加交变电场，并且因此，可测量介电常数根据血液凝固过程的变化。这里，通过使用柠檬酸作抗凝剂，从血液测试体的静脉采集血液，在马上开始测量之前向血液测试体添加氯化钙水溶液，并且因此，通过中和柠檬酸的抗凝作用，血液凝固反应得以进行。根据预定算法分析上述获得的数据，这样可以获得与血液凝固有关的参数，诸如血液凝固时间。然后，在复杂介电常数频谱中出现变化的基础上已发展出获取与血液凝固性有关的信息的血液凝固系统分析方法，该变化是在血液凝固过程中通过进一步研究血液凝固过程的介电测量、并且通过向血液中添加激活或灭活血小板的物质来测量(专利文献2)。在血液凝固系统分析方法中，在使用血小板激活物质的情况下，可以基于因血小板激活造成的复介电常数频谱中出现的变化，获取与失活状态下血液中包含的血小板的凝固性有关的信息。此外，在使用血小板失活物质的情况下，可以基于因血小板失活造成的复介电常数频谱中出现的变化，获取与活性状态下血液中包含的血小板的凝固性有关的信息。现有技术文献专利文献专利文献1：特开2010-181400号公报专利文献2：特开2012-194087号公报
技术实现思路
本专利技术要解决的问题然而，在对血液凝固过程进行介电测量的方法中以及在血液凝固系统分析方法中，需要通过使用具有正常凝固性的样品(全血)，提前设定将成为参考的血液凝固时间的缩短宽度Δts(参考值)。此外，当凝固反应进行时，没有添加加速试剂，因此测量时间很长。在添加加速试剂的情况下，根据血小板功能的差异消失。解决问题的方案因此，为了提供一种简单快速测量血小板凝聚的方法，本专利技术者们已经进行了大量的研究。随后，本专利技术者们发现向全血中添加少量氯化钙水溶液和血小板诱导物质，并搅拌恒定时间，之后在血液的无障碍凝固(自然血液凝固)过程中测量的介电常数的变化与在添加非血小板诱导物质的情况下的介电常数的变化之间，出现了偏差，从而完成了本技术。也就是说，本技术提供了血小板凝聚分析方法，包括：向含血小板的样品中添加血小板诱导物质和钙盐的步骤；搅拌含血小板样品的步骤；以及获取含血小板样品的电特性和/或粘弹性的测量数据的步骤。优选的是电特性的测量数据为含血小板样品的介电常数。此外，粘弹性的测量数据可以是根据流变仪含血小板样品的测量数据。在本技术的血小板凝聚分析方法中，可以进一步包括在含血小板样品的电特性和/或粘弹性的测量数据、以及从其中没有添加血小板诱导物质的含血小板样品中获取的电特性和/或粘弹性的测量数据的基础上，对血小板凝聚的分析步骤。含血小板样品可以是血液或血浆。此外，可通过从施用抗血小板凝聚剂和/或抗凝固剂的测试受试者采集血液或血浆使用。本技术还提供了血小板凝聚分析装置，包括：生物样品保持单元，配置为保持含血小板样品；医疗剂供给单元，配置为向含血小板样品供应血小板诱导物质和/或钙盐；搅拌机构，配置为搅拌含血小板样品；以及测量单元，配置为测量含血小板样品的电特性。此外，本技术进一步提供一种用于血小板凝聚分析的程序，其允许计算机执行：在从其中添加血小板诱导物质和钙盐的含血小板样品获取的电特性和/或粘弹性的测量数据、以及从没有添加血小板诱导物质的含血小板样品获取的电特性和/或粘弹性的测量数据的基础上，分析血小板凝聚。在该分析中，可将从其中添加血小板诱导物质和钙盐的含血小板样品获取的电特性和/或粘弹性的测量数据、与从没有添加血小板诱导物质的含血小板样品获取的电特性和/或粘弹性的测量数据，作比较。本技术能够进一步提供血小板凝聚分析系统，包括：血小板凝聚分析装置：生物样品保持单元，配置为保持含血小板样品；医疗剂供给单元，配置为向含血小板样品供应血小板诱导物质和/或钙盐；搅拌机构，配置为搅拌含血小板样品；以及测量单元，配置为测量含血小板样品的电特性，具有用于分析血小板凝聚的程序的计算机，其搭建在血小板凝聚分析装置中，该程序允许计算机在从其中添加血小板诱导物质和钙盐的含血小板样品获取的电特性和/或粘弹性的测量数据、以及从其中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血小板凝聚分析方法，包括：向含血小板样品添加血小板诱导物质和钙盐的步骤；搅拌所述含血小板样品的步骤；以及获取所述含血小板样品的电特性和/或粘弹性的测量数据的步骤。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.10.05 JP 2016-1971561.一种血小板凝聚分析方法，包括：向含血小板样品添加血小板诱导物质和钙盐的步骤；搅拌所述含血小板样品的步骤；以及获取所述含血小板样品的电特性和/或粘弹性的测量数据的步骤。2.根据权利要求1所述的血小板凝聚分析方法，其中，所述电特性的测量数据为所述含血小板样品的介电常数。3.根据权利要求1所述的血小板凝聚分析方法，其中，所述粘弹性的测量数据是所述含血小板样品的根据流变仪的测量数据。4.根据权利要求1所述的血小板凝聚分析方法，进一步包括：在所述含血小板样品的所述电特性和/或所述粘弹性的测量数据、以及从其中没有添加所述血小板诱导物质的含血小板样品获取的电特性和/或粘弹性的测量数据的基础上，分析血小板凝聚的步骤。5.根据权利要求1所述的血小板凝聚分析方法，其中，所述含血小板样品为血液或血浆。6.根据权利要求5所述的血小板凝聚分析方法，其中，从施用抗血小板凝聚剂和/或抗凝剂的受试者采集所述血液或血浆。7.一种血小板凝聚分析装置，包括：生物样品保持单元，配置为保持含血小板样品；医疗剂供给单元，配置为向所述含血小板样品供应血小板诱导物质和/或钙盐；搅拌机构，配置为搅拌所述含血小板样品；以及测量单元，配置为测量所述含血小板样...

【专利技术属性】
技术研发人员：村田彩，林义人，町田贤三，李丞玟，
申请(专利权)人：索尼公司，
类型：发明
国别省市：日本,JP