用于评价和治疗癌症的材料和方法技术

本文件提供了用于检测PCA‑2‑特异性自身抗体的方法和材料，所述PCA‑2‑特异性自身抗体可能同与PCA‑2‑特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症和癌症相关。

Materials and methods for evaluating and treating cancer

This document provides methods and materials for the detection of specific autoantibodies to PCA 2, which may be associated with paraneoplastic neurological disorders and cancer associated with PCA 2 specific autoantibodies.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于评价和治疗癌症的材料和方法相关申请的交叉引用本申请要求于2016年9月27日提交的美国申请系列号62/400,420的优先权。该在先申请的公开内容被认为是本申请的公开内容的一部分，并且以其整体合并入本申请中。背景1.
本文件涉及用于评价和治疗与2型蒲肯野细胞抗体(PCA-2)-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症和癌症的方法和材料。例如，本文件涉及用于使用微管相关蛋白1B(MAP1B)多肽及其片段来检测PCA-2-特异性自身抗体的存在或不存在的方法和材料。2.背景信息神经限制性自身抗体作为获得性神经学病症(特发性的和副肿瘤性的两者)的血清生物标志物而出现。在2000年，PCA-2被描述为由小细胞肺癌(SCLC)引发的副肿瘤性神经学自身免疫性的IgG生物标志物，其中具有在中枢和周围神经组织以及SCLC细胞中表达的～280-kDa的肿瘤神经胞质抗原(Vernino等人,Ann.Neurol.,47:297-305(2000))。该自身抗体被命名为PCA-2，以区分其与卵巢癌和乳腺癌相关性小脑变性的生物标志物PCA-1(AKA抗-Yo；Greenlee等人,Ann.Neurol.,14:609-13(1983))。概述本文件提供了用于检测与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症和/或癌症的方法和材料，以及用于治疗与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症和/或癌症(例如，神经内分泌肿瘤)的方法和材料。如在本文中所描述的，MAP1B是与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症和/或癌症的抗原靶标，所述PCA-2-特异性自身抗体充当小细胞肺癌的强的阳性预测物和关于具有多种多样的神经学表现的副肿瘤性神经学病症的生物标志物。PCA-2-特异性自身抗体(在本文中也称为MAP1B-特异性自身抗体)的检测可以用于支持与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症和癌症的诊断。MAP1B在发育中的神经元和神经内分泌肿瘤(例如SCLC)两者中均高度表达，并且可以被靶向以用于治疗副肿瘤性神经学病症。总体而言，本文件的一个方面刻画了用于检测在来自个体的生物学样品中PCA-2-特异性自身抗体的存在或不存在的方法。所述方法包括下列步骤或基本上由下列步骤组成：使来自个体的生物学样品与MAP1B多肽或其片段相接触，如果所述生物学样品包含所述PCA-2-特异性自身抗体，则形成MAP1B-PCA-2-特异性自身抗体复合物；和检测所述复合物的存在或不存在。在所述生物学样品中所述PCA-2-特异性自身抗体的存在可能与在所述个体中的与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症或癌症相关。所述副肿瘤性神经学病症可以是脑炎/脑病、癫痫发作、睡眠障碍、小脑功能障碍/小脑变性/小脑共济失调、视神经病、视网膜病变、运动障碍/非随意运动、眼球运动异常、周围神经病、自主神经功能障碍、神经肌肉连接综合征、兰-伊肌无力综合征(LEMS)、库欣综合征、抗利尿激素分泌失调综合征(SIADH)、副肿瘤性小脑变性、脑脊髓炎、边缘性脑炎、脑干脑炎、斜视眼阵挛-肌阵挛-共济失调综合征或多肌炎。在一些实施方案中，所述副肿瘤性神经学病症可以是LEMS。所述癌症可以是小细胞肺癌(SCLC)、肾癌、鳞状细胞皮肤癌、肺外小细胞癌(EPSCC)、前列腺腺癌、原发性肝内胆管癌、尤因肉瘤、鼻咽癌、淋巴瘤、肺大细胞神经内分泌癌(LCNEC)、胃肠胰腺神经内分泌肿瘤(GEP-NET)、垂体肿瘤、甲状腺肿瘤或髓样癌。在一些实施方案中，所述癌症可以是SCLC。所述方法还可以包括施行Western印迹以检测所述复合物。所述方法还可以包括检测所述复合物的存在或检测所述复合物的不存在。所述生物学样品可以是血清、血浆、脑脊液或血液。在另一个方面，本文件刻画了试剂盒，其包含MAP1B多肽或其片段以及关于使用所述MAP1B多肽来检测个体中的PCA-2-特异性自身抗体的使用说明书。所述试剂盒可以用于诊断在个体中与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症或癌症的存在或不存在。所述试剂盒还可以包含具有对于MAP1B多肽或其片段的特异性结合亲和力的单克隆抗体。所述试剂盒还可以包含PCA-2-特异性自身抗体。在另一个方面，本文件刻画了用于治疗具有与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症的个体的方法。所述方法包括下列步骤或基本上由下列步骤组成：将个体鉴定为具有与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症；和向所述个体施用免疫调谐剂。所述将个体鉴定为具有与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症的步骤可以包括：使来自所述个体的生物学样品与MAP1B多肽或其片段相接触，如果所述生物学样品包含所述PCA-2-特异性自身抗体，则形成MAP1B-PCA-2-特异性自身抗体复合物；和检测所述复合物的存在。所述免疫调谐剂可以包括皮质类固醇。所述免疫调谐剂可以包括环磷酰胺。所述免疫调谐剂可以包括他克莫司。除非另外定义，在本文中所使用的所有技术和科学术语都具有与本公开内容所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。在本文中描述了方法和材料以用于在本公开内容中使用；也可以使用本领域中已知的其他合适的方法和材料。所述材料、方法和实例仅是举例说明性的，而并不意在进行限制。在本文中所提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献均通过提及而以其整体合并入本文。在出现冲突的情况下，本说明书(包括定义)将会进行控制。在附图和下面的描述中阐明本专利技术的一个或多个实施方案的详情。本专利技术的其他特征、目标和优点将会从所述描述和附图中以及从权利要求书中变得明显。附图描述图1为间接免疫荧光，其显示了来自血清的患者的MAP1B(PCA-2)-特异性IgG(以1:240的稀释度)与小鼠神经系统和其他器官组织的混成体的结合。图版A显示了蒲肯野细胞细胞质，并且树突被染成明亮的颜色。还看到分子层(ML)和颗粒层(GL)的突触染色。图版B显示了在小脑齿状神经元的细胞质中的强烈的免疫反应性。图版C显示了在胃的平滑肌内在肠肌神经丛和神经纤维内被染成明亮颜色的神经节。在胃粘膜内的神经也被染色。图版D显示了邻近肾血管的自主(交感)神经的强烈的免疫反应性。图版E显示了弥散的“突触”染色和锥体细胞细胞质及其树突的染色，在海马的CA-1区域中。图版F显示了在皮质中锥体细胞的树突被染色。弥散的“突触”染色也是明显的。图2A-2B显示，PCA-2IgG与天然神经蛋白质相结合。A)在患者血清(泳道1和2)中通过IgG(PCA-2)揭示了一个共同的条带(～280kDa，通过参考分子量标准参照物)，但是在对照人血清(泳道3和4)中通过IgG没有揭示出这样的条带。为了验证特异性，将患者IgG在推定的抗原条带和对照条带上进行亲和力纯化。B)将来自推定的抗原条带和对照条带的洗脱物重新施加至混成小鼠组织底基载玻片上，并且与在混成小鼠组织载玻片上全患者血清IgG的原始免疫染色模式进行比较。来自推定的抗原条带的洗脱物揭示出相同的染色模式，如在图1中所显示的。图版A显示，在分子层(ML)和颗粒层(GL)的弥散的“突触”染色的背景上，蒲肯野细胞及其树突被染成明亮的颜色；和图版B显示了在胃本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测在来自个体的生物学样品中PCA‑2‑特异性自身抗体的存在或不存在的方法，所述方法包括下列步骤：使所述生物学样品与MAP1B多肽或其片段相接触，如果所述生物学样品包含所述PCA‑2‑特异性自身抗体，则形成MAP1B‑PCA‑2‑特异性自身抗体复合物；和检测所述复合物的存在或不存在。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.27 US 62/400,4201.用于检测在来自个体的生物学样品中PCA-2-特异性自身抗体的存在或不存在的方法，所述方法包括下列步骤：使所述生物学样品与MAP1B多肽或其片段相接触，如果所述生物学样品包含所述PCA-2-特异性自身抗体，则形成MAP1B-PCA-2-特异性自身抗体复合物；和检测所述复合物的存在或不存在。2.权利要求1的方法，其中在所述生物学样品中所述PCA-2-特异性自身抗体的存在与在所述个体中的与PCA-2-特异性自身抗体相关的副肿瘤性神经学病症或癌症相关。3.权利要求2的方法，其中所述副肿瘤性神经学病症选自由下列各项组成的组：脑炎/脑病、癫痫发作、睡眠障碍、小脑功能障碍/小脑变性/小脑共济失调、视神经病、视网膜病变、运动障碍/非随意运动、眼球运动异常、周围神经病、自主神经功能障碍、神经肌肉连接综合征、兰-伊肌无力综合征(LEMS)、库欣综合征、抗利尿激素分泌失调综合征(SIADH)、副肿瘤性小脑变性、脑脊髓炎、边缘性脑炎、脑干脑炎、斜视眼阵挛-肌阵挛-共济失调综合征和多肌炎。4.权利要求3的方法，其中所述副肿瘤性神经学病症是LEMS。5.权利要求2的方法，其中所述癌症选自由下列各项组成的组：小细胞肺癌(SCLC)、肾癌、鳞状细胞皮肤癌、肺外小细胞癌(EPSCC)、前列腺腺癌、原发性肝内胆管癌、尤因肉瘤、鼻咽癌、淋巴瘤、肺大细胞神经内分泌癌(LCNEC)、胃肠胰腺神经内分泌肿瘤(GEP-NET)、垂体肿瘤、甲状腺肿瘤和髓样癌。6.权利要求5的方法，其中所述癌症是SCLC。7.权...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·J·皮托克，T·J·克里泽尔，A·加多思，A·麦基翁，V·A·伦农，J·P·弗赖尔，
申请(专利权)人：梅奥医学教育及研究基金会，
类型：发明
国别省市：美国,US