一种从药物中检测右乙拉西坦的方法技术

本发明专利技术公开了从左乙拉西坦注射液中检测右乙拉西坦(R‑异构体)的方法，采用高效液相色谱的方法对R‑异构体进行定性或/和定量检测，液相色谱的检测条件包括：色谱柱：纤维素‑三(3，5‑二氯苯基氨基甲酸酯)硅胶柱；流动相：正己烷、无水乙醇；其中，正己烷(vol.％)∶无水乙醇(vol.％)＝90～70∶10～30；流动相采用等度洗脱。采用本发明专利技术的方法能够有效检测左乙拉西坦注射液中的右乙拉西坦，具有专属性和稳定性指示能力。且可直接将左乙拉西坦注射液稀释后检测，无需对样品进行前处理，方便快捷；本发明专利技术方法检测限达到0.003％，定量限达到0.005％，准确灵敏。

A Method for the Detection of Dextiracetam from Drugs

The present invention discloses a method for the determination of dextracetam (R_ isomer) from levetiracetam injection. The method of high performance liquid chromatography is used for the qualitative or/and quantitative detection of R_ isomer. The detection conditions of liquid chromatography include: a Cellulose Tri (3,5_ dichlorophenyl carbamate) silica gel column; a mobile phase: n-hexane and anhydrous ethanol; and a mobile phase: n-hexane;\uff08 Vol.%:absolute ethanol (vol.%)= 90-70:10-30; mobile phase was eluted by equal degree. The method of the invention can effectively detect dextracetam in levetiracetam injection, and has specificity and stability indicative ability. The method can directly dilute the levetiracetam injection and detect it without pretreatment, which is convenient and fast. The detection limit of the method is 0.003%, the quantitative limit is 0.005%, and the method is accurate and sensitive.

【技术实现步骤摘要】
一种从药物中检测右乙拉西坦的方法
本专利技术涉及药物中检测杂质领域，特别是涉及药物中检测右乙拉西坦的方法。
技术介绍
左乙拉西坦(Levetiracetam)，别名乐凡替拉西坦、利维西坦、左旋乙拉西坦，是一种白色结晶粉末的化学品。化学名称(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺，分子式为C8H14N2O2，分子量为170.20900。左乙拉西坦为抗癫痫药，临床上主要用于成人及4岁以上儿童癫痫患者部分性发作的加用治疗。众所周知，药物中的工艺杂质含量决定着药物的品质，而左乙拉西坦是一个手性化合物，具有一个手性中心，其R-异构体右乙拉西坦的抗癫痫药效作用不明显，可见，右乙拉西坦的含量的多少会大大影响左乙拉西坦相关药物的药物疗效，需严格的控制左乙拉西坦的药物中右乙拉西坦的含量。在USP40原料质量标准中，对左乙拉西坦的R-异构体进行了控制，限度为0.8％；注射液质量标准中未进行控制；左乙拉西坦注射液进口注册标准(JX20150256)中对R-异构体控制限度为0.80％；可见，两种标准的质量控制标准限度均较高，不能很好地控制药品质量。想要对药品进行更好的质量控制，除了对其原料药进行检测分析以外，仍需对最终的产品进行质量检测，才能真正对投入使用的药物进行好的质量控制。USP40原料质量标准以及左乙拉西坦注射液进口注册标准中，使用的色谱柱均为表面涂敷有直链淀粉三-3，5二甲基苯基氨基甲酸酯多孔球状硅胶柱，该类色谱柱不能接触水，若用于左乙拉西坦注射液检测，会导致色谱柱柱效快速下降，只能将左乙拉西坦注射液的样品进行繁琐的前处理，除去样品中的水分后，再用检测左乙拉西坦原料药中各物质的方法进行质量检测，非常麻烦。因此，即使改进技术降低了对左乙拉西坦原料药质量控制标准限度，提高了左乙拉西坦原料药的质量控制技术，也无法从根本上解决如何方便且准确地对左乙拉西坦注射液进行好的质量控制的问题。
技术实现思路
本专利技术提供了一种检测右乙拉西坦的方法，能够准确便捷灵敏地测定左乙拉西坦原料药或注射液中右乙拉西坦的含量，分离度符合规定。具体的，本专利技术提供一种检测右乙拉西坦的方法，其特征在于，采用高效液相色谱进行定性或/和定量检测，液相色谱的检测条件包括：色谱柱：纤维素-三(3，5-二氯苯基氨基甲酸酯)硅胶柱；流动相：正己烷、无水乙醇；其中，正己烷(vol.％)∶无水乙醇(vol.％)＝82～78∶18～22；流动相采用等度洗脱。所述等度洗脱，是指液相色谱操作中，在样品组分的分析周期中，流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。在本专利技术的一个具体实施方式中，所述流动相中正己烷(vol.％)∶无水乙醇(vol.％)＝80∶20。在本专利技术的具体实施方式中，所述液相色谱检测条件还包括以下的i～iv中的一项或多项：i色谱柱规格：4.6×100～250mm，5μm；ii流速：0.5～1.5ml/min；iii柱温：25℃～35℃；iv检测波长：210～220nm。进一步地，所述液相色谱检测条件还包括以下的i～iv中的一项或多项：i色谱柱规格：4.6×250mm，5μm；ii流速：1.0ml/min；iii柱温：30℃；iv检测波长：215nm。本专利技术具体实施方式中使用的色谱柱为CHIRALPAKIC，250mm×4.6mm，5μm，但是，与上述色谱柱等效的色谱柱亦可用于本专利技术的检测方法中。进一步地，所述检测方法包括以下内容：(1)制备供试品溶液；(2)制备对照品溶液；(3)将对照品溶液进样检测；(4)将供试品溶液进样检测。所述检测方法可使用面积归一化法、自身对照法、内标法、外标法等方法分析、计算检测结果。进一步地，制备供试品溶液或/和对照溶液的步骤为：将样品用溶剂溶解，再用稀释剂稀释到指定浓度；或直接用稀释剂将样品溶解并稀释到指定浓度。进一步地，所述溶剂选自水、无水乙醇、氯化钠溶液、醋酸-醋酸钠缓冲液中的一种或几种的混合溶剂；所述稀释剂选自无水乙醇。进一步地，所述供试品溶液溶液浓度为5～15mg/ml，优选为10mg/ml。进一步地，所述对照品溶液溶液浓度为10～50μg/ml，优选为20μg/ml。进一步地，进样量为10～50μl，优选为20μl。本专利技术方法可单独对左乙拉西坦注射液进行质量控制，同时由于色谱柱可直接用于含水供试品检测，因此在药品质量控制中与原料药质量检测共用色谱柱，快速方便得进行原料药和注射液的质量控制。本专利技术还提供一种左乙拉西坦注射液，包括左乙拉西坦和杂质，所述杂质包括左乙拉西坦的R-对映异构体，其中，所述R-对映异构体的含量不超过0.2％。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术提供了一种可直接检测左乙拉西坦注射液R-对映异构体杂质的方法，补充了左乙拉西坦注射液质量控制方法的空白，对左乙拉西坦药品质量提供了进一步地控制方法，有利于提高药品质量。(2)采用本专利技术的检测方法能够有效检测左乙拉西坦相关药物中的R-异构体，具有专属性和稳定性指示能力，能与左乙拉西坦主峰有效分开，该方法耐用性好，能很好地满足对工艺过程中的杂质监控及左乙拉西坦相关成品中的杂质控制要求。(3)本专利技术可将左乙拉西坦注射液直接稀释进行检测，无需对其中含有的水进行预处理，得到的检测谱图峰形好、无拖尾，较现有技术方便快捷很多，是首个针对左乙拉西坦注射液的质量控制的方法。(4)本专利技术分析方法灵敏度高，可对左乙拉西坦的R-异构体进行严格控制，本专利技术方法检测限达到0.003％，定量限达到0.005％，准确灵敏，可将异构体限度控制为不得过0.2％，能更好地控制药品质量。附图说明图1是本专利技术色谱条件下空白溶剂、系统适用性、供试品重叠谱图；图2是本专利技术色谱条件下空白溶剂的检测谱图；图3是本专利技术色谱条件下空白辅料的检测谱图；图4是本专利技术色谱条件下左乙拉西坦消旋体的检测谱图；图5是本专利技术色谱条件下左乙拉西坦对照品的检测谱图；图6是本专利技术色谱条件下本专利技术色谱条件下的检测谱图；图7是采用AD-H色谱柱的左乙拉西坦消旋体色谱图图8是采用AD-H色谱柱的供试品色谱图(初次测定注射液)。图9是采用AD-H色谱柱的消旋体、对照品、供试品重叠色谱图(再次测定注射液)。具体实施方式实施例1空白溶液：无水乙醇。空白辅料储备液：按照处方量配制不含左乙拉西坦原料药的空白溶液；称取氯化钠约4.5g、醋酸钠约0.82g、量取5％醋酸约0.6ml至500ml的注射用水中。空白辅料溶液：精密量取空白辅料储备液1.0ml至10ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，即得。系统适用性溶液：称取左乙拉西坦消旋体对照品11.60mg，置100ml量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，制成每1ml中约含0.1mg的溶液，即得。左乙拉西坦对照品溶液：精密称取左乙拉西坦对照品11.03mg，置200ml量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，制成每1ml中约含50μg/ml的溶液，即得。供试品溶液：取左乙拉西坦注射液1.0ml，置10ml量瓶中，用无水乙醇稀释定容至刻度，制成每1ml中约含10mg/ml的溶液，即得。对比USP40和进口注册标准中对R-异构体的检测方法。因USP40注射液质量标准中未控制异构体，故对比其原料质量标准(见表1)。表1异构体质量标准对比USP40和进口注册标准的色谱柱代表型号有CHIRALPAKAD-H(250m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.左乙拉西坦注射液中R‑对映异构体的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱进行定性或/和定量检测，液相色谱的检测条件包括：色谱柱：纤维素‑三(3，5‑二氯苯基氨基甲酸酯)硅胶柱；流动相：正己烷、无水乙醇；其中，正己烷(vol.％)∶无水乙醇(vol.％)＝90～70∶10～30；流动相采用等度洗脱。

【技术特征摘要】
1.左乙拉西坦注射液中R-对映异构体的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱进行定性或/和定量检测，液相色谱的检测条件包括：色谱柱：纤维素-三(3，5-二氯苯基氨基甲酸酯)硅胶柱；流动相：正己烷、无水乙醇；其中，正己烷(vol.％)∶无水乙醇(vol.％)＝90～70∶10～30；流动相采用等度洗脱。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相中正己烷(vol.％)∶无水乙醇(vol.％)＝80∶20。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱检测条件还包括以下的i～iv中的一项或多项：i色谱柱规格：4.6×100～250mm，5μm；ii流速：0.5～1.5ml/min；iii柱温：25℃～35℃；iv检测波长：210～220nm。4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱检测条件还包括以下的i～iv中的一项或多项：i色谱柱规格：4.6×250mm，5μm；ii流速：1.0ml/min；iii柱温：30℃；iv检测波长：215nm。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：丁凤，童庆国，罗鸣，黄浩喜，苏忠海，
申请(专利权)人：成都倍特药业有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51