用于接触活化系统相关的疾病的蛋白生物标记技术方案

本文提供了用于分析从患有与接触活化系统相关的疾病、疑似患有与接触活化系统相关的疾病或处在与接触活化系统相关的疾病的风险中的受试者获得的生物样品的方法和试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于接触活化系统相关的疾病的蛋白生物标记相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2017年6月12日提交的美国临时申请No.62/518,492和于2016年9月16日提交的美国临时申请No.62/395,712的权益。这些参考申请的每篇的全部内容通过引用并入本文。
技术介绍
血浆接触活化系统是涉及一组血浆蛋白酶的促炎症反应的且促凝血的系统。其通过暴露于外源物质或带负电的表面时被因子XIIa或在内皮细胞表面上被脯氨酰羧肽酶活化(SainzI.M.等，Thromb.Haemost.(2007)98，77-83)。不适当的或未经调节的接触系统活化涉及多种疾病，包括遗传性血管性水肿(HAE)。HAE是造成肿胀阵发性发作的疾病，其可影响身体的多个部分，比如面部、四肢、生殖器、胃肠道和上气道。因为HAE症状通常与变态反应或肠绞痛的症状类似，所以通常难以确诊HAE患者，直到他们显示严重的或威胁生命的症状。早期诊断将使得更好地管理与急性HAE发作相关的紧急情况，并且也将有助于管理HAE患者来预防或减少急性HAE发作，例如，允许HAE患者避免暴露于可能触发HAE发作的刺激。因此，非常感兴趣的是鉴定用于HAE的生物标记，并且开发可靠的诊断和预后方法，用于鉴定患有某些类型的HAE或处在遭受急性HAE发作的风险中的受试者。这种生物标记也将有益于关于发病机理的研究，这可促进开发用于该疾病的有效的新疗法。
技术实现思路
本公开基于鉴定与从健康个体相比，在从患有与接触活化系统相关的疾病的受试者获得的生物样品中区别存在的蛋白质，或在从这种疾病的不同阶段(例如，发作对静息)的受试者获得的生物样品中区别存在的蛋白质。因此，本公开的一个方面提供了分析样品的方法，所述方法包括(i)提供从患有与接触活化系统相关的疾病、疑似患有与接触活化系统相关的疾病或处在与接触活化系统相关的疾病的风险中的受试者，比如人受试者获得的生物样品(例如，血清样品或血浆样品)；和(ii)测量包括选自表1中的至少一种蛋白质的生物标记组的水平，其中如果生物标记组由一种蛋白质组成，则所述蛋白质不是C4、血浆前激肽释放酶、凝血酶、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)和热休克蛋白90。在一些实施方式中，与接触活化系统相关的疾病是遗传性血管性水肿(HAE)，比如1型HAE或II型HAE。在一些实施方式中，生物标记组由选自表1中的2-10种蛋白质组成。在一些实施方式中，至少一种蛋白质是线粒体蛋白，其可为ATP合酶亚单位O(ATPO)、亲环蛋白F或线粒体热休克蛋白60(HSP60)。在一些实施方式中，至少一种蛋白质是14-3-3ζ/δ或14-3-3β/α。在一些实施方式中，至少一种蛋白质是蛋白激酶，其可为蛋白激酶YES、蛋白激酶LYN或丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)。在一些实施方式中，至少一种蛋白质是糖原合酶激酶3α/β。在一些实施方式中，至少一种蛋白质是ATP依赖性RNA解旋酶DDX19B(DEADbox19B)。在一些实施方式中，至少一种蛋白质为真核翻译起始因子5A-1(eIF-5A-1)。在一些实施方式中，提供生物样品包括将生物样品收集至包括一种或多种蛋白酶抑制剂的真空采血管中。在一些实施方式中，使用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹试验或侧流测定(lateralflowassay)进行测量生物标记组的水平。在一些实施方式中，方法进一步包括如果受试者的生物标记组的水平偏离对照受试者的相同生物标记组的水平，则将受试者鉴定为患有与接触系统相关的疾病。在一些实施方式中，方法进一步包括如果受试者被鉴定为患有疾病，则向受试者施用有效量的用于治疗该疾病的治疗剂，比如血浆激肽释放酶(pKal)抑制剂、缓激肽2受体抑制剂和/或C1酯酶抑制剂。在一些实施方式中，pKal抑制剂是抗pKal抗体(例如，lanadelumab)或抑制性肽(例如，艾卡拉肽(ecallantide))。在一些实施例中，缓激肽2受体抑制剂是抑制性肽(例如，艾替班特(icatibant))。在一些实施例中，C1酯酶抑制剂是人血浆衍生的C1酯酶抑制剂。在一些实施方式中，受试者是正在治疗该疾病的人患者，并且其中方法进一步包括基于生物标记组的水平评估治疗的功效，受试者的生物标记组的水平与对照受试者的生物标记组的水平的偏离表示治疗功效。在一些实施方式中，方法进一步包括基于生物标记组的水平，鉴定用于受试者的适当的治疗。在一些实施方式中，方法进一步包括基于生物标记组的水平，将受试者鉴定为用于疾病治疗的候选者。本公开提供了能够鉴定具有与接触活化系统相关的疾病(例如，HAE)的患者的生物标记。测量生物标记组的水平也可用于这种疾病的评估和治疗。在另一方面中，提供了用于分析患有与接触系统相关的疾病、疑似患有与接触系统相关的疾病或处在与接触系统相关的疾病的风险中的受试者的样品的试剂盒，该试剂盒包括对于选自表1中的第一蛋白生物标记特异性的第一结合剂；和对于选自表1中的第二蛋白生物标记特异性的第二结合剂；其中第一蛋白生物标记和第二蛋白生物标记不同。在一些实例中，第一和/或第二结合剂是对于蛋白标记特异性的抗体。在一些实施方式中，试剂盒可进一步包括结合第一结合剂的第一检测试剂和结合第二结合剂的第二检测试剂。在一些实施方式中，第一结合剂和第二结合剂固定在支撑元件上。下面描述中阐释了本公开的一个或多个实施方式的细节。本公开的其他特征或优势从下述附图和数个实施方式的详细描述中、并且也从所附的权利要求中将是显而易见的。附图说明下述附图形成本说明书的一部分并且被包括以进一步表明本公开的某些方面，这些方面可通过参考这些附图中的一个或多个结合本文呈现的具体实施方式的详细描述而被更好地理解。图1呈现了显示在来自患有HAE(I型/II型)的患者在基础水平(“基础”，N＝33)和HAE发作期间(“发作”，N＝33)和健康个体(“正常”，N＝22)的血浆样品中检测的蛋白质水平的箱线图。A：补体蛋白4(C4)水平。B：从健康个体(N＝22)、基础HAE(I/II)(N＝33)和发作HAE(I/II)(N＝33)血浆获得的血浆样品中的前激肽释放酶水平。RFU是相对荧光单位。图2呈现了显示在用FXIIa活化之后，来自患有HAE(I型/II型)在基础水平(“HAE基础”，N＝9)的患者、来自HAE发作期间的HAE患者(“HAE发作”，N＝10)和来自健康个体(“HV”，N+28)的血浆样品中血浆激肽释放酶生成速率的图。图3呈现了显示在来自患有HAE(I型/II型)在基础水平(“HAEB”，N＝18)和HAE发作期间(“HAEA”，N＝19)的患者和健康个体(“正常”，N＝22)的血浆样品中检测的C1-酯酶抑制剂(C1-INH)蛋白水平的箱线图。A：显示了来自每个个体的血浆样品中检测的C1-INH，包括由箭头指示的异常值。B：显示了来自每个个体的血浆样品中检测的C1-INH，忽略了异常值。RFU是相对荧光单位。来自健康的患者的血浆样品中的平均C1-INH是6522RFU±1852(标准偏差，SD)。来自在基础水平的患有HAE的患者的血浆样品中的平均C1-INH是1231RFU±673(SD)，并且来自在发作期间的患有HAE的患者的血浆样品中的平均C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于分析样品的方法，所述方法包括：(i)提供从患有与接触活化系统相关的疾病、疑似患有与接触活化系统相关的疾病或处在与接触活化系统相关的疾病的风险中的受试者获得的生物样品；和(ii)测量包括选自表1中的至少一种蛋白质的生物标记组的水平，其中如果所述生物标记组由一种蛋白质组成，则所述蛋白质不是C4、血浆前激肽释放酶、凝血酶、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)或热休克蛋白90。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.16 US 62/395,712;2017.06.12 US 62/518,4921.一种用于分析样品的方法，所述方法包括：(i)提供从患有与接触活化系统相关的疾病、疑似患有与接触活化系统相关的疾病或处在与接触活化系统相关的疾病的风险中的受试者获得的生物样品；和(ii)测量包括选自表1中的至少一种蛋白质的生物标记组的水平，其中如果所述生物标记组由一种蛋白质组成，则所述蛋白质不是C4、血浆前激肽释放酶、凝血酶、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)或热休克蛋白90。2.如权利要求1所述的方法，其中所述生物标记组由选自表1中的2至10种蛋白质组成。3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述生物样品是血清样品或血浆样品。4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述与接触活化系统相关的疾病是遗传性血管性水肿(HAE)。5.如权利要求4所述的方法，其中所述HAE是I型HAE或II型HAE。6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述至少一种蛋白质是选自由下述组成的组中的线粒体蛋白：ATP合酶亚单位O(ATPO)、亲环蛋白F和线粒体热休克蛋白60(HSP60)。7.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述至少一种蛋白质是14-3-3ζ/δ或14-3-3β/α。8.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述至少一种蛋白质是选自由下述组成的组中的蛋白激酶：蛋白激酶YES、蛋白激酶LYN和丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)。9.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述至少一种蛋白质选自由下述组成的组：糖原合酶激酶3α/β、ATP依赖性RNA解旋酶DDX19B和真核翻译起始因子5A-1。10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中步骤(i)包括将所述生物样品收集至包括一种或多种蛋白酶抑制剂的真空采血管中。11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中步骤(ii)使用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹试验或侧流试验进行。12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述受试者是人患者。13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，进一步包括如果所述受试者的生物标记组的水平偏离对...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·J·塞克斯顿，M·维斯瓦纳坦，R·福塞特，T·伽尔，
申请(专利权)人：戴埃克斯有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US