天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因的应用以及抗病毒药物制造技术

技术编号:21013937 阅读:77 留言:0更新日期:2019-05-03 23:10
本发明专利技术属于生物医药技术领域,具体涉及一种天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因的应用以及抗病毒药物。一种天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因在制备抗病毒药物中的应用;其中,所述天蚕素C蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述天蚕素C基因的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。在本发明专利技术中通过试验验证,天蚕素C蛋白具有显著抑制多种病毒复制的功能。因此,该天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因可以用于制备抗病毒药物,具有广泛的应用前景。

Application of cecropin C protein and/or cecropin C gene and antiviral drugs

The invention belongs to the field of biomedical technology, in particular to the application of cecropin C protein and/or cecropin C gene and antiviral drugs. The application of a cecropin C protein and/or cecropin C gene in the preparation of antiviral drugs is described, in which the amino acid sequence of the cecropin C protein is shown as SEQ ID NO.1 and the nucleic acid sequence of the cecropin C gene is shown as SEQ ID NO.2. In the present invention, the cecropin C protein has a remarkable function of inhibiting the replication of various viruses. Therefore, the cecropin C protein and/or cecropin C gene can be used to prepare antiviral drugs, and have a broad application prospect.

【技术实现步骤摘要】
天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因的应用以及抗病毒药物
本专利技术属于生物医药
,具体涉及一种天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因的应用以及抗病毒药物。
技术介绍
天蚕素C(CecropinsC)是一种抗菌肽,是对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有活性的约31-37个氨基酸残基的小蛋白,最早从Hyalophoracecropia的血淋巴中分离出来。抗菌肽构成了昆虫无细胞免疫的主要部分,而天蚕素既能裂解细菌细胞膜,也抑制脯氨酸摄取并引起渗膜漏。水疱性口炎病毒(VesicularStomatitisVirus,VSV)在感染脊椎动物细胞后,可以很快引起明显的细胞病变,而感染昆虫细胞(如果蝇细胞)则引起持续性感染,无细胞病变。登革病毒(DengueVirus,DENV)主要通过埃及伊蚊和白纹伊蚊等媒介昆虫传播,引起登革热以及发病率和死亡率很高的登革出血热和登革休克综合征。据世界卫生组织统计,目前已有100多个国家及地区出现登革病毒感染流行,大约有25亿人生活在受登革病毒感染威胁的区域,每年约有1-3亿人被登革病毒初次感染或重复感染。虽然登革感染可以引起人类烈性疾病,但是蚊子却可以终身携带,对其生命周期没有影响。昆虫缺乏获得性免疫系统,只能依靠天然免疫系统消灭病原微生物,抗菌肽作为天然免疫系统的一部分可能扮演了重要的角色。另外,越来越多的细菌逐渐产生抗生素耐药性,这已经成了对抗细菌感染的一大挑战,寻找新型抗生素就成为了一个迫在眉睫的问题。抗菌肽由于活性高,抗菌谱广,来源多样,而且由于其通过电荷吸附作用于病原微生物的膜上这一特殊机制,使得靶菌株不容易发生突变,因而在医药工业上认为有广阔的应用前景。昆虫只有天然免疫系统的保护,抗菌肽的作用是其免疫功能的重要部分,因此从昆虫分离得到的抗菌肽可能具有更强的抗病原微生物作用。抗病毒感染的途径很多,如直接抑制或杀灭病毒、干扰病毒吸附、阻止病毒穿入细胞、抑制病毒生物合成、抑制病毒释放或增强宿主抗病毒能力等。抗病毒药物的作用主要是通过影响病毒复制周期的某个环节而实现的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因的应用以及抗病毒药物,旨在解决为现有抗病毒药物提供更多选择的技术问题。为实现上述专利技术目的,本专利技术采用的技术方案如下:本专利技术一方面提供一种天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因在制备抗病毒药物中的应用;其中,所述天蚕素C蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,所述天蚕素C基因的核酸序列如SEQIDNO.2所示。本专利技术另一方面提供一种抗病毒药物,所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列,或所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的氨基酸序列;和/或所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列,或所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:2所示的核苷酸经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的核苷酸序列。本专利技术提供的天蚕素C蛋白(或天蚕素C基因)是一种来自果蝇的分泌型功能蛋白,在本专利技术中通过试验验证,其具有显著抑制多种病毒复制的功能。因此,该天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因可以用于制备抗病毒药物,具有广泛的应用前景。附图说明图1为本专利技术实施例1中水泡性口炎病毒复制的结果图;图2为本专利技术实施例2中重组质粒pMT-DmCeCc-V5-HisA的转染结果图;图3为本专利技术实施例2中登革2型病毒复制的结果图。具体实施方式为了使本专利技术要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合实施例,对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术,并不用于限定本专利技术。一方面,本专利技术实施例提供了一种天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因在制备抗病毒药物中的应用;其中,所述天蚕素C蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,所述天蚕素C基因的核酸序列如SEQIDNO.2所示。本专利技术提供的天蚕素C蛋白(或天蚕素C基因)是一种来自果蝇的分泌型功能蛋白,在本专利技术中通过试验验证,其具有显著抑制多种病毒复制的功能。因此,该天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因可以用于制备抗病毒药物,具有广泛的应用前景。本专利技术实施例的天蚕素C蛋白、天蚕素C基因的ORF(开放阅读框)的具体序列如下:天蚕素C蛋白序列(SEQIDNO.1):MNFYKIFVFVALILAISIGQSEAGWLKKLGKRIERIGQHTRDATIQGLGIAQQAANVAATARG;下划线部分为信号肽。天蚕素C基因序列(SEQIDNO.2):ATGAACTTCTACAAGATCTTCGTTTTCGTCGCCCTCATCCTGGCCATCAGCATTGGACAATCGGAAGCCGGTTGGCTGAAGAAACTTGGCAAGAGAATCGAGCGCATTGGCCAGCACACCCGGGATGCAACCATTCAAGGACTGGGAATTGCGCAACAGGCCGCCAATGTGGCAGCCACCGCCAGAGGATGA;下划线部分为表达信号肽的序列。进一步地,在本专利技术实施例中,通过试验验证了,该天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因可以抑制水泡性口炎病毒(VesicularStomatitisVirus,VSV)、登革2型病毒(DengueVirustype-2,DENV-2)的复制。因此,该天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因用于制备的抗病毒药物可以包括抗水泡性口炎病毒药物、抗登革2型病毒药物中的至少一种。进一步地,在本专利技术实施例中,该抗病毒药物可以是蛋白类药物,具体地,该抗病毒药物含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列,或如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的氨基酸序列,如缺失上述信号肽的部分氨基酸序列。或者,该抗病毒药物可以是核酸类药物,具体地,所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列,或如SEQIDNO:2所示的核苷酸经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的核苷酸序列,如缺失上述表达信号肽的部分核苷酸序列。进一步地,在本专利技术实施例中,所述天蚕素C蛋白的制备方法包括:S01:构建含有SEQIDNO.2所示序列的重组质粒;S02:将所述重组质粒转入宿主细胞中进行表达,得到所述天蚕素C蛋白。在本专利技术实施例中,在验证天蚕素C蛋白的功能时,构建SEQIDNO.2中不存在表达信号肽的部分核苷酸序列的重组质粒就可以实现功能验证,具体步骤包括:合成单链DNA分子甲(SEQIDNO.12)和单链DNA分子乙(SEQIDNO.13),两条单链混合退火后得到双链DNA分子即含有SEQIDNO.2中非信号肽部分的核苷酸序列;然后将该双链DNA分子与骨架质粒载体连接,得到所述重组质粒。另一方面,本专利技术实施例还提供一种抗病毒药物,所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列,或所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的氨基酸序列;和/或所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列,或所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:2所示的核苷酸经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的核苷酸序列。优选地,所述抗病毒药物包括抗水泡性口炎病毒药物、抗登革2型病毒药物中的至本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因在制备抗病毒药物中的应用;其中,所述天蚕素C蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述天蚕素C基因的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种天蚕素C蛋白和/或天蚕素C基因在制备抗病毒药物中的应用;其中,所述天蚕素C蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,所述天蚕素C基因的核酸序列如SEQIDNO.2所示。2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗病毒药物包括抗水泡性口炎病毒药物和抗登革2型病毒药物中的至少一种。3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列,或所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的氨基酸序列。4.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列,或所述抗病毒药物含有如SEQIDNO:2所示的核苷酸经缺失、插入或替换所获得的具有相同功能的核苷酸序列。5.如权利要求1-4任一项所述的应用,其特征在于,所述天蚕...

【专利技术属性】
技术研发人员:肖小平林颖阳帆黄达娜张仁利
申请(专利权)人:深圳市疾病预防控制中心
类型:发明
国别省市:广东,44

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