本发明专利技术公开了一种多肽用于制备防治阿尔茨海默病药物的用途。其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述多肽为TREM2受体蛋白的胞外段41‑81位氨基酸，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。所述多肽具有促进小胶质介导的炎症反应，抑制小胶质细胞的凋亡，增强小胶质细胞的迁移能力，促进小胶质细胞对Aβ的内吞及降解，增加大脑内小胶质细胞的密度，降低大脑内Aβ淀粉样斑沉积的用途。
Application of a polypeptide in the preparation of drugs for the prevention and treatment of Alzheimer's disease
The invention discloses the use of a polypeptide for preparing medicines for preventing and treating Alzheimer's disease. Its amino acid sequence is shown as SEQ ID NO:1, the polypeptide is 41 81 amino acid of TREM2 receptor protein, and its nucleotide sequence is shown as SEQ ID NO:2. The polypeptide has the functions of promoting microglia-mediated inflammatory reaction, inhibiting apoptosis of microglia, enhancing migration ability of microglia, promoting endocytosis and degradation of microglia to A beta, increasing density of microglia in brain, and reducing deposition of amyloid plaque in brain.
【技术实现步骤摘要】
一种多肽用于制备防治阿尔茨海默病药物的用途
本专利技术涉及生物医学领域，尤其涉及一种多肽用于制备防治阿尔茨海默病药物的用途。
技术介绍
阿尔茨海默病(Alzheimer’sDisease,AD)是一种以渐进性认知功能丧失为主要特征的神经退行性疾病，是最为常见的老年痴呆类型。AD是继心血管病、脑血管病和癌症后，老年健康的“第四杀手”。随着全球人口老龄化，AD正在成为二十一世纪最大的疾病之一。然而，尽管已付出巨大的科学努力，截至目前美国FDA和欧盟EMA只批准5种AD药物，所有这些药物都只是对症治疗，没有一种能够阻止或者延缓AD病情的进展。因此，寻找新的AD药物靶点并研制靶向药物有着极其重要的经济和社会意义。AD患者早期出现记忆丧失、意识错乱、注意力差、失语、失用、缺乏方向感等症状，逐渐丧失思考及判断能力，难以与人沟通，生活无法自理。最终因神经细胞大量死亡影响到大部分脑区时，身体各组织器官受损，病人出现死亡。对AD病人尸检发现其大脑中具有两个主要的病理学特征：神经元内神经纤维缠结(Neurofibrillarytangles，NFTs)及神经细胞外淀粉样斑(Amyloidplaques)沉积。淀粉样斑主要由β-淀粉样肽(Amyloid-β，通常缩写为Aβ)聚集而成，Aβ沉积引起大脑中神经突触的退化和神经元凋亡，最终引发认知功能损伤及痴呆。因而，抑制Aβ产生或促进Aβ降解对于AD的防治具有重要的意义。除了上述两种主要病理特征外，AD病人大脑内还有其他的病理特征：包括神经炎症过度激活、神经元丢失、神经突触丧失等。2型髓系细胞触发受体(Triggeringreceptorexpressedonmyeloidcells2,TREM2)属于Ig(Immunoglobulin,Ig)超家族，其编码基因位于染色体6p21上，编码的核苷酸和氨基酸序列在Genbank中的编号为NM_018965.3。TREM2是近年来新发现的AD风险基因，其编码区突变R47H可使晚发型AD的发病风险增加3倍左右，与AD的头号风险因子——APOE4的风险性相当。TREM2主要表达于大脑中的小胶质细胞上，而小胶质细胞是极其重要的先天性免疫相关细胞，为中枢神经系统提供着第一层也是最主要的一层防线，抵御外来感染，维持大脑稳态。在AD中，小胶质细胞参与并调节神经炎症反应，实时监控周围环境，迁移并聚集到病灶部位，清除中枢神经系统中的Aβ沉积和受损的神经元，从而改善AD症状，延缓进程。越来越多的证据支持TREM2介导的小胶质细胞功能维持在AD中起着十分重要的保护作用，因而TREM2成为AD药物研发的新热门靶标。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种具有防治阿尔茨海默病的多肽。为实现上述目的，本专利技术提供一种氨基酸序列如SEQIDNO：1所示的多肽用于制备防治阿尔茨海默病药物的用途。进一步，所述多肽为TREM2受体蛋白的胞外段41-81位氨基酸，其核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。进一步，所述多肽具有增加小胶质细胞促炎反应的用途。进一步，所述多肽具有抑制小胶质细胞凋亡的用途。进一步，所述多肽具有增加小胶质细胞迁移的用途。进一步，所述多肽具有增加小胶质细胞对Aβ内吞的用途。进一步，所述多肽具有增加小胶质细胞对Aβ降解的用途。进一步，所述多肽具有增加大脑中小胶质细胞密度的用途。进一步，所述多肽具有降低大脑中Aβ淀粉样斑数目的用途。另一方面，本专利技术还提供这一种所述多肽的重组载体用于制备防治阿尔茨海默病药物的用途。TREM241-81的氨基酸序列为：MKHWGRRKAWCRQLGEKGPCQRVVSTHNLWLLSFLRRWNGSSEQIDNO：1；TREM241-81对应的核苷酸序列为：ATGAAGCACTGGGGGAGGCGCAAGGCCTGGTGCCGCCAGCTGGGAGAGAAGGGCCCATGCCAGCGTGTGGTCAGCACGCACAACTTGTGGCTGCTGTCCTTCCTGAGGAGGTGGAATGGGAGCSEQIDNO：2。由实施例可得，TREM241-81多肽能够显著改善小胶质细胞的多种功能，具体体现在：促进炎症反应，抑制细胞凋亡，促进细胞迁移，并增加小胶质细胞对寡聚体Aβ42的内吞和降解。通过脑立体定位注射sTREM241-81多肽到APP/PS1小鼠大脑中，能够显著增加海马区域小胶质细胞的密度，并显著降低海马区域的淀粉样斑沉积。附图说明图1是pFUSE-hIgG1-Fc1载体的酶切图谱；图2是sTREM241-81-Fc和sTREM21-171-Fc融合蛋白的SDS-PAGE银染电泳图；图3是sTREM241-81-Fc和sTREM21-171-Fc融合蛋白促进小胶质细胞炎症反应的结果图；图4是sTREM241-81-Fc和sTREM21-171-Fc融合蛋白抑制小胶质细胞凋亡的结果图；图5是sTREM241-81-Fc和sTREM21-171-Fc融合蛋白促进小胶质细胞迁移的结果图；图6是sTREM241-81-Fc融合蛋白增加小胶质细胞对Aβ42的内吞图；图7是sTREM241-81-Fc融合蛋白增加小胶质细胞对Aβ42的降解图；图8是sTREM241-81-Fc融合蛋白增加海马区域小胶质细胞密度的结果图；图9是sTREM241-81-Fc融合蛋白降低海马区域Aβ淀粉样斑沉积的结果图。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。实施例1：sTREM241-81-Fc和sTREM21-171-Fc融合蛋白的制备pFUSE-sTREM21-171-hIgG1-Fc1表达质粒构建：选用pFUSE-hIgG1-Fc1(购买自Invivogen，货号为pfuse-hg1fc1，载体图片见图1)为真核表达载体，克隆位点选用EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点，构建pFUSE-sTREM21-171-hIgG1-Fc1表达质粒。步骤如下：设计上游引物：5’-CGGAATTCATGGAGCCTCTCCGGCTGC-3’SEQIDNO：3，其中下划线为EcoRⅠ酶切位点；下游引物：5’-CCGCTCGAGTTTGGGAAGGGGATTTCTC-3’SEQIDNO：4，其中下划线为XhoⅠ酶切位点。TREM2的核苷酸序列为(购买自北京义翘神州生物技术有限公司，货号HG11084-M：TREM-2cDNAORFCloneinCloningVector,Human)：其中单下划线为蛋白的信号肽序列，波浪下划线为sTREM241-81氨基酸，双下划线为蛋白的跨膜(TM)和胞内段对应的核苷酸序列。以cDNA(SEQIDNO：5)为模板，可人工合成，SEQIDNO：3为上游引物，SEQIDNO：4为下游引物，PCR克隆sTREM21-171表达基因，胶回收纯化目的产物。再利用限制性内切酶EcoRⅠ和XhoⅠ酶切pFU本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的多肽用于制备防治阿尔茨海默病药物的用途。
【技术特征摘要】
1.一种氨基酸序列如SEQIDNO：1所示的多肽用于制备防治阿尔茨海默病药物的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述多肽为TREM2受体蛋白的胞外段41-81位氨基酸，其核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述多肽具有增加小胶质细胞促炎反应的用途。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述多肽具有抑制小胶质细胞凋亡的用途。5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述多肽具有增加...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈小芬，徐颖，姚蕴玲，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建,35
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