特女贞苷作为细胞自噬诱导剂的应用制造技术

本发明专利技术实施例公开了特女贞苷在制备细胞自噬诱导剂或药物组合物中的应用。本发明专利技术实施例的特女贞苷的自噬诱导效果的发现，使其有待开发成一种新的自噬诱导剂，应用到疾病的治疗或辅助治疗中，例如细菌感染疾病的辅助治疗，肿瘤的辅助治疗中。

【技术实现步骤摘要】
特女贞苷作为细胞自噬诱导剂的应用
本专利技术实施例涉及医药
，具体涉及一种细胞自噬诱导剂及应用。
技术介绍
自噬是指细胞内的长寿命蛋白质以及受损的细胞器经溶酶体途径被降解的过程，是真核细胞所特有的现象。高温、缺氧、饥饿等应激时产生自噬能帮助细胞抵御这些不利因素，发挥细胞保护作用。但是，自噬过度激活或不适时则会导致细胞死亡，即自噬性细胞死亡(autophagiccelldeath)。已有研究表明自噬的失调与肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病以及感染等疾病密切相关。在发生应激时，细胞自噬能够防止有毒或致癌的损伤蛋白质和细胞器的累积，抑制细胞癌变；然而肿瘤一旦形成，细胞自噬为癌细胞提供更丰富的营养，促进肿瘤生长。尽管自噬在绝大多数肿瘤中低表达，提示自噬可能起到抑制肿瘤生长的作用。但研究表明上调自噬同样使得肿瘤细胞的侵袭性和化疗药物抵抗性增强。自噬在化疗或者放疗的情况下能够帮助肿瘤细胞在凋亡缺陷的情况下渡过代谢压力的难关。代谢压力不仅存在于放化疗的肿瘤细胞中，在肿瘤细胞血供不足，或者远处转移到缺乏营养的器官中也同样能见到。因此，自噬诱导在肿瘤形成早期具有重要意义。在抗菌研究中，自噬是天然免疫应答和特异性免疫应答的重要环节。自噬在抗细菌毒素、增强MHCII类分子的抗原提成能力、清除病原菌方面发挥了重要作用。目前，常用的自噬诱导剂主要有雷帕霉素、BredeldinA、Carbamazepine、XestosponginB/C、N-Acetyl-D-sphingosine。现有的自噬诱导剂可供选择的种类较少，多为合成的化合物分子，有待开发出新的自噬诱导剂。专利技术内容为此，本专利技术实施例提供特女贞苷在制备细胞自噬诱导剂或药物组合物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术的实施方式提供如下技术方案：特女贞苷在制备细胞自噬诱导剂或药物组合物中的应用。优选的，所述特女贞苷在诱导腺癌人类肺泡基底上皮细胞A549自噬中的应用。优选的，所述诱导剂为口服剂型或注射剂型。优选的，所述药物组合物还包括杀菌或者治疗肿瘤的有效成分。优选的，所述治疗肿瘤的有效成分包括顺铂或者紫杉醇。优选的，所述药物组合物治疗的病症包括与细胞自噬相关的细菌感染及肿瘤。优选的，所述的肿瘤为白血病、肺癌、结肠癌、肾癌、前列腺癌、卵巢癌、脑癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫颈癌、胃癌、肝癌、肉瘤或黑色素瘤。所述的细菌感染包括MRSA、Staphylococcusaureus等葡萄球菌，或肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等革兰氏阳性菌。在荧光显微镜下采用GFP-mCherry-LC3融合蛋白来示踪自噬形成。无细胞自噬时，GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中；自噬体形成时，GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜，在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点，一个斑点相当于一个自噬体，可以通过计数来评价自噬活性的高低。本专利技术实施例中的特女贞苷，是木犀科女贞Ligustrumlucidum的叶及女贞子(女贞的果实)提取物，分子式C31H42O17。其结构式如图1所示。本专利技术实施例中，自噬是指细胞内的长寿命蛋白质以及受损的细胞器经溶酶体途径被降解的过程，是真核细胞所特有的现象。高温、缺氧、饥饿等应激时产生自噬能帮助细胞抵御这些不利因素，发挥细胞保护作用。但是，自噬过度激活或不适时，则会导致细胞死亡，即自噬性细胞死亡(autophagiccelldeath)。已有研究表明自噬的失调与肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病以及感染等疾病密切相关。根据本专利技术实施例具有如下优点：本专利技术实施例的特女贞苷的自噬诱导效果的发现，特女贞苷为天然化合物分子，使其有待开发成一种新的自噬诱导剂，应用到疾病的治疗或辅助治疗中，例如细菌感染疾病的辅助治疗，肿瘤的辅助治疗中。附图说明为了更清楚地说明本专利技术的实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图引伸获得其它的实施附图。图1为本专利技术实施例的特女贞苷分子结构示意图；图2为本专利技术的实施例的特女贞苷0.34ug/mL处理组的confocalmicroscopy检测荧光的示意图，其中，图2A为DAPI染色图，图2BGFP荧光图，图2C为mCherry荧光图，图2D为GFP与mCherry融合后的荧光图；图3为本专利技术实施例的特女贞苷1.1ug/mL处理组的confocalmicroscopy检测荧光的示意图，其中，图3A为DAPI染色图，图3B为GFP荧光图，图3C为mCherry荧光图，图3D为GFP与mCherry融合后的荧光图；图4为本专利技术实施例的特女贞苷3.4ug/mL处理组的confocalmicroscopy检测荧光的示意图，其中，图4A为DAPI染色图，图4B为GFP荧光图，图4C为mCherry荧光图，图4D为GFP与mCherry融合后的荧光图；图5为本专利技术实施例的MRSA处理组的confocalmicroscopy检测荧光的示意图，其中，图5A为DAPI染色图，图5B为GFP荧光图，图5C为mCherry荧光图，图5D为GFP与mCherry融合后的荧光图；图6为本专利技术实施例的阳性对照组雷帕霉素的confocalmicroscopy检测荧光的示意图，其中，图6A为DAPI染色图，图6B为GFP荧光图，图6C为mCherry荧光图，图6D为GFP与mCherry融合后的荧光图；图7为本专利技术实施例的阴性对照组氯喹的confocalmicroscopy检测荧光的示意图，其中，图7A为DAPI染色图，图7B为GFP荧光图，图7C为mCherry荧光图，图7D为GFP与mCherry融合后的荧光图；图8为本专利技术实施例的正常组的confocalmicroscopy检测荧光的示意图，其中，图8A为DAPI染色图，图8B为GFP荧光图，图8C为mCherry荧光图，图8D为GFP与mCherry融合后的荧光图。具体实施方式以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术实施例中，利用小分子化合物特女贞苷作为小分子的自噬诱导剂。本专利技术实施例中，自噬过程进行观察和检测，细胞经诱导或抑制后，需对自噬过程进行观察和检测。本专利技术实施例中，具有自噬诱导作用的单体化合物特女贞苷，其具有明显的自噬诱导作用，而且来源广泛，扩充了诱导自噬工具药的种类，有待开发出新的自噬诱导剂治疗疾病。本专利技术实施例中，MOI：multiplicityofinfection，即为感染复数。本法明实施例中，细胞自噬是机体的一种防御和保护机制，当细菌感染腺癌人类肺泡基底上皮细胞A549时，腺癌人类肺泡基底上皮细胞A549可通过细胞自噬降解细菌，但有些细菌可以逃避自噬对其的吞噬作用而有利于自身的存活，如耐甲氧西林金葡菌MRSA。本专利技术实施例中，自噬流检测原理为：Ad-mCherry-GFP-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.特女贞苷在制备细胞自噬诱导剂或药物组合物中的应用。

【技术特征摘要】
1.特女贞苷在制备细胞自噬诱导剂或药物组合物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述特女贞苷在诱导耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的腺癌人类肺泡基底上皮细胞A549自噬中的应用。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述诱导剂为口服剂型或注射剂型。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物组合物还包括杀菌或者治疗肿瘤的有效成分。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述治疗肿瘤的...

【专利技术属性】
技术研发人员：高亮亮，
申请(专利权)人：高亮亮，
类型：发明
国别省市：北京,11