酶联免疫吸附测定溶液系统技术方案

本发明专利技术提供了生物科技领域内的酶联免疫吸附测定溶液系统，包括包被缓冲溶液、封闭液一、磷酸盐缓冲液、底物缓冲液、终止液、洗涤缓冲液、抗体稀释液、酶标抗体稀释液、硼酸盐包被缓冲液、封闭液二、封闭液三、封闭液四和饲料谷物样品提取液。

【技术实现步骤摘要】
酶联免疫吸附测定溶液系统
本专利技术属于生物科技领域，特别涉及酶联免疫吸附测定溶液系统。
技术介绍
OTA广泛存在于粮谷类、葡萄干、可可、巧克力、咖啡、葡萄酒、调料、乳制品等多种食品和饲料中，可以通过食物链进入人和动物体内，具有蓄积毒性。饲料中OTA的污染较为严重，动物通过采食被污染的饲料摄入ota。研究发现，单胃动物摄入体内的OTA大部分通过血液被转移至肾脏，并在消化道和肾小管的近端和远端被吸收，OTA通过肝肠循环被反复分泌和吸收，位于肠道的微生物会把OTA转化成无毒性的代谢产物OTα；而进入血液的OTA与HAS紧密结合，在动物体内非常稳定，不易被代谢降解，因此动物性食品，尤其是猪的肾脏、肝脏、肌肉、血液等常有OTA检出。针对人体或动物体内可能存在OTA，需要制备出单克隆抗体。
技术实现思路
针对现有技术中的缺陷，本专利技术的目的在于克服上述现有技术中OTA污染的技术问题，提供酶联免疫吸附测定溶液系统，本专利技术可提高人体或动物对抗OTA的免疫力。本专利技术的目的是这样实现的：酶联免疫吸附测定溶液系统，包括包被缓冲溶液、封闭液一、磷酸盐缓冲液、底物缓冲液、终止液、洗涤缓冲液、抗体稀释液、酶标抗体稀释液、硼酸盐包被缓冲液、封闭液二、封闭液三、封闭液四和饲料谷物样品提取液。作为本专利技术的进一步改进，所述包被缓冲液由NaCO3和NaHCO3加入去离子水定容至1L制成。作为本专利技术的进一步改进，所述封闭液一由蔗糖、酪蛋白、Na2HPO4•12H2O、Na2HPO4•2H2O、小牛血清、Proclin300和去离子水制成，去离子水为950mL；所述封闭液二由蔗糖、酪蛋白、Na2HPO4•12H2O、Na2HPO4•2H2O和Proclin300加入去离子水定容至1L而制成；其中，封闭液一和封闭液二中，所述蔗糖为50g，酪蛋白为2.5g，Na2HPO4•12H2O为5.8g，Na2HPO4•2H2O为0.593g，小牛血清为50mL，Proclin300为300μL；所述封闭液三由脱脂奶粉加去离子水定容至100mL制成，脱脂奶粉为5.0g；所述封闭液四由BSA加去离子水定容至100mL制成，所述BSA为1.0g。作为本专利技术的进一步改进，所述磷酸盐缓冲液由NaCl、KCl和Na2HPO4加去离子水定容至1L制成，所述NaCl、KCl和Na2HPO4分别为8.00g、0.20g和1.15g；所述底物缓冲液由Na2HPO4•12H2O和柠檬酸加去离子水定容至1L制成，所述Na2HPO4•12H2O和柠檬酸的重量分别为3.68g和0.94g。作为本专利技术的进一步改进，所述TMB底物测定液由TMB储存液、底物缓冲液和30%H2O2制成，其中，所述TMB储存液、底物缓冲液和30%H2O2的容积分别为0.4mL、10mL和10μL。作为本专利技术的进一步改进，所述终止液由浓硫酸和去离子水制成，所述浓硫酸和去离子水的容积分别为22.2mL和177.8mL；所述洗涤缓冲液由Tween-20和PBS制成，所述Tween-20和PBS的容积分别为0.5mL和1000mL。作为本专利技术的进一步改进，所述抗体稀释液由0.1M的Na2HPO4溶液和0.1M的NaH2PO4溶液加入去离子水溶解定容至100mL制成；所述酶标抗体稀释液由小牛血清、Na2HPO4、NaH2PO4•2H2O、NaCl、KCl和Proclin300加去离子水定容至1L制成，其中，所述小牛血清和Proclin300的容积分别为50mL和200μL，Na2HPO4、NaH2PO4•2H2O、NaCl和KCl的重量分别为1.072g、0.593g、16g和0.4g。作为本专利技术的进一步改进，所述饲料谷物样品提取液由85%的磷酸和NaCl加去离子水定容至1L制成，所述磷酸的容积为33.7mL,NaCl的重量为118g。具体实施方式一种酶联免疫吸附测定溶液系统，包括包被缓冲溶液、封闭液一、磷酸盐缓冲液、底物缓冲液、终止液、洗涤缓冲液、抗体稀释液、酶标抗体稀释液、硼酸盐包被缓冲液、封闭液二、封闭液三、封闭液四和饲料谷物样品提取液。其中，包被缓冲液由NaCO3和NaHCO3加入去离子水定容至1L制成。封闭液一由蔗糖、酪蛋白、Na2HPO4•12H2O、Na2HPO4•2H2O、小牛血清、Proclin300和去离子水制成，去离子水为950mL；封闭液二由蔗糖、酪蛋白、Na2HPO4•12H2O、Na2HPO4•2H2O和Proclin300加入去离子水定容至1L而制成；其中，封闭液一和封闭液二中，蔗糖为50g，酪蛋白为2.5g，Na2HPO4•12H2O为5.8g，Na2HPO4•2H2O为0.593g，小牛血清为50mL，Proclin300为300μL；封闭液三由脱脂奶粉加去离子水定容至100mL制成，脱脂奶粉为5.0g；封闭液四由BSA加去离子水定容至100mL制成，BSA为1.0g；封闭液一的配制方法为：小牛血清应预先在4°C下解冻,用前慢慢摇勻;配制前先在1L的三角瓶中放入搅拌子,将除新生牛血清之外的成分加入适量的去离子水搅拌至全部溶解,加入新生牛血清混匀,最后加入去离子水定容至1L,分装至500mL溶剂瓶中4°C保存。磷酸盐缓冲液由NaCl、KCl和Na2HPO4加去离子水定容至1L制成，NaCl、KCl和Na2HPO4分别为8.00g、0.20g和1.15g；底物缓冲液由Na2HPO4•12H2O和柠檬酸加去离子水定容至1L制成，Na2HPO4•12H2O和柠檬酸的重量分别为3.68g和0.94g。TMB底物测定液由TMB储存液、底物缓冲液和30%H2O2制成，其中，TMB储存液、底物缓冲液和30%H2O2的容积分别为0.4mL、10mL和10μL。终止液由浓硫酸和去离子水制成，浓硫酸和去离子水的容积分别为22.2mL和177.8mL；洗涤缓冲液由Tween-20和PBS制成，Tween-20和PBS的容积分别为0.5mL和1000mL。抗体稀释液由0.1M的Na2HPO4溶液和0.1M的NaH2PO4溶液加入去离子水溶解定容至100mL制成；酶标抗体稀释液由小牛血清、Na2HPO4、NaH2PO4•2H2O、NaCl、KCl和Proclin300加去离子水定容至1L制成，其中，小牛血清和Proclin300的容积分别为50mL和200μL，Na2HPO4、NaH2PO4•2H2O、NaCl和KCl的重量分别为1.072g、0.593g、16g和0.4g。饲料谷物样品提取液由85%的磷酸和NaCl加去离子水定容至1L制成，磷酸的容积为33.7mL,NaCl的重量为118g。通过以上溶液的混合制成酶联免疫测定溶液。本专利技术并不局限于上述实施例，在本专利技术公开的技术方案的基础上，本领域的技术人员根据所公开的
技术实现思路
，不需要创造性的劳动就可以对其中的一些技术特征作出一些替换和变形，这些替换和变形均在本专利技术保护范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.酶联免疫吸附测定溶液系统，其特征在于，包括包被缓冲溶液、封闭液一、磷酸盐缓冲液、底物缓冲液、终止液、洗涤缓冲液、抗体稀释液、酶标抗体稀释液、硼酸盐包被缓冲液、封闭液二、封闭液三、封闭液四和饲料谷物样品提取液。

【技术特征摘要】
1.酶联免疫吸附测定溶液系统，其特征在于，包括包被缓冲溶液、封闭液一、磷酸盐缓冲液、底物缓冲液、终止液、洗涤缓冲液、抗体稀释液、酶标抗体稀释液、硼酸盐包被缓冲液、封闭液二、封闭液三、封闭液四和饲料谷物样品提取液。2.根据权利要求1所述的酶联免疫吸附测定溶液系统，其特征在于，所述包被缓冲液由NaCO3和NaHCO3加入去离子水定容至1L制成。3.根据权利要求1或2所述的酶联免疫吸附测定溶液系统，其特征在于，所述封闭液一由蔗糖、酪蛋白、Na2HPO4•12H2O、Na2HPO4•2H2O、小牛血清、Proclin300和去离子水制成，去离子水为950mL；所述封闭液二由蔗糖、酪蛋白、Na2HPO4•12H2O、Na2HPO4•2H2O和Proclin300加入去离子水定容至1L而制成；其中，封闭液一和封闭液二中，所述蔗糖为50g，酪蛋白为2.5g，Na2HPO4•12H2O为5.8g，Na2HPO4•2H2O为0.593g，小牛血清为50mL，Proclin300为300μL；所述封闭液三由脱脂奶粉加去离子水定容至100mL制成，脱脂奶粉为5.0g；所述封闭液四由BSA加去离子水定容至100mL制成，所述BSA为1.0g。4.根据权利要求1或2所述的酶联免疫吸附测定溶液系统，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液由NaCl、KCl和Na2HPO4加去离子水定容至1L制成，所述NaCl、KCl和Na2HPO4分别为8.00g、0.20g和1.15g；所述底物缓冲液由Na2HPO4•12H2O和柠...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷仲德，
申请(专利权)人：雷仲德，
类型：发明
国别省市：江苏,32