一种血清抗体检测敏感度能力验证方法及其检测试剂盒技术

本发明专利技术涉及血液检测领域，具体公开一种血清抗体检测敏感度能力验证方法、试剂盒。所述方法包括：评估者将已标定浓度的弱抗体质控品、说明书交付给受试者；受试者接收弱抗体质控品、说明书，按照说明书的方法检测质控品中的每个样品是否含有抗体，并将检测材料、方法和结果交付评估者；评估者根据受试者交付的材料、方法和结果，将受试者检测时所用的试剂厂商纳入评估因素，以受试者检测到的最低抗体浓度作为检测能力主要指标，通过分析受试者检测结果，准确评估参与受试者对弱抗体的检测能力。本发明专利技术有助于客观准确的评估免疫血液学等相关实验室或技术人员对弱抗体的检测能力。

【技术实现步骤摘要】
一种血清抗体检测敏感度能力验证方法及其检测试剂盒
本专利技术涉及血液检测领域，具体地说，是一种血清抗体检测敏感度能力验证方法及其检测试剂盒。
技术介绍
免疫血液学相关实验室或专业技术人员在血清抗体检测敏感度方面应具备足够的能力，以满足临床或科研的需求。目前市场上缺乏用于血清抗体检测敏感度能力验证方法。现有类似的质控品，为行业、组织或实验室发放的“室间质控品”，质检质控品是由一个或几个人血液样本组成，可以包括正常的抗筛阴性样本或抗筛阳性样本。通过发放这些样本给参与实验室，并回收实验室的检测结果加以分析，获得该实验室对血型抗体检测能力的评估。这类室间质控品的不足之处，在于无法准确评估参与实验室的抗体检测能力。血型抗体的检测能力体现在对弱抗体检测能力(特别是在发生急性溶血性输血反应时，患者体内的抗体效价都是比较低的)。为了准确评估这方面的能力，较为理想的方法是制备出一组低效价抗体能力验证品，通过和国际标准品比对进行抗体定量，以模拟输血反应发生时患者体内的抗体情况。而由于目前抗体检测室间质控品均未进行抗体定量，且抗体效价设置相对较高，主要考察实验室对于抗体特异性的判定，因此无法准确评估参与实验室的弱抗体检测能力。《中国输血杂志》2015年4月第28卷第4期，刊出的论文“基层输血科自制室内质控品的方法与可行性探讨”，自制单独血浆与红细胞质控品，经亲和力、抗体效价检测、凝集强度和稳定性等验证后，按照自行设计的室内质控模式，进行ABO血型鉴定、RhD血型、交叉配血试验及不规则抗体筛查等试验，结果表明自制的室内质控品，其有效性、特异性、稳定性和可靠性，符合《ISO15189医学实验室认可准则》中对IQC的基本要求，可以有效控制输血差错事故的发生。《临床输血与检验》2016年8月第18卷第4期，刊出的论文“输血相容性检测室内质控品自制及应用探讨”，利用输血科现有血液样本资源自制室内质控品，具体选取A、B、O、AB型血液样本各10份，同型混合后离心，分离血浆备用；压积红细胞用生理盐水洗涤后与CPDA保养液等量混合备用；选取ABO同型Rh(D)阴性血液样本1～2份，经确认后，与CPDA保养液等量混合备用；IgG抗-D血清采用商品化试剂。各型血液的红细胞和血浆按照标准操作规程进行血清学验证试验，符合血清学反应格局，且质控红细胞与标准血清凝集强度达4+、质控血浆与相应红细胞凝集强度为2+，方作为室内质控品使用。室内质控品用于监测输血相容性检测结果的准确度，结果表明制备的室内质控品合格，能满足4～6周使用。专利文献CN107576807A，公开日2018.01.12，公开了一种血型检测试剂质控品及其制备方法和在血型检测中的应用，所述质控品包括6瓶ABO、RhD血型检测质控品、5瓶交叉配血质控品和4瓶不规则抗体筛检质控品，所述6瓶ABO、RhD血型检测质控品分别为：A1型RhD(+)红细胞、B型RhD(+)红细胞、A血清、B血清、O型RhD(+)红细胞及RhD(-)红细胞各1瓶；所述5瓶交叉配血质控品分别为AB型(+)红细胞、O型RhD(+)红细胞、RhD(-)红细胞、O血清、含IgG型抗D的AB血清各1瓶；所述4瓶不规则抗体筛检质控品分别为O血清及含IgG型抗D的AB血清各2瓶。所述血型检测试剂质控品用于确保血型检测的准确性、特异性、亲和力、稳定性，避免检测过程中因为检测本身不合格而使检测结果受到影响。然而以上质控品均为室内质控，用于监控实验室内部检测过程，考察实验室对于抗体的特异性判定，无法用来评估比较各免疫血液学实验室之间的血清抗体检测敏感度能力。现有技术中，关于本专利技术血清抗体检测敏感度能力验证方法及其检测试剂盒，目前还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是针对现有技术中的不足，提供一种血清抗体检测敏感度能力验证方法。本专利技术的第二个目的是针对现有技术中的不足，提供一种血清抗体检测敏感度能力验证试剂盒。为实现上述第一个目的，本专利技术采取的技术方案是：一种血清抗体检测敏感度能力验证方法，包括以下步骤：a)评估者将已标定浓度的弱抗体质控品、说明书交付给受试者；所述弱抗体质控品为一组包括不同浓度的抗体样本，所述抗体的效价为0.01-4；所述说明书记载了所述弱抗体能力验证产品的操作方法；b)受试者接收弱抗体质控品、说明书，按照所述操作方法将每个抗体样本与相应红细胞反应，以检测每个样品是否含有抗体，并将使用的材料、方法和结果交付给评估者；c)评估者根据受试者交付的材料、方法和结果，将受试者检测时所用的试剂厂商纳入评估因素，以受试者检测到的最低抗体浓度作为检测能力主要指标，通过分析受试者检测结果，准确评估参与实验室对弱抗体的检测能力。在上述血清抗体检测敏感度能力验证方法中，作为一个优选方案，所述弱抗体质控品还包括抗筛阴性血清样品。在上述血清抗体检测敏感度能力验证方法中，作为一个优选方案，所述弱抗体质控品的制备方法如下：使用AB型血浆将高效价抗体稀释为一组不同浓度的抗体；利用已知浓度的国际标准品与制备的抗体进行比对，确定每个抗体的浓度，再加入抗筛阴性的血清，即制备成一组弱抗体质控品。在上述血清抗体检测敏感度能力验证方法中，所述弱抗体质控品中抗体样本的浓度取值可以是随机的不同浓度取值，只要在弱抗体质控品中形成从小到大具有不同浓度差异的抗体样本即可；示范性所述弱抗体质控品中抗体样本的浓度例如可以是1.3ng/ml、3.9ng/ml、6.4ng/m、7.8ng/ml、10.3ng/ml、13.1ng/ml或52.1ng/ml中的任意一种或多种不同浓度的组合。本领域技术人员在获知上述血清抗体检测敏感度能力验证方法后，可根据实际检测需要，设置多个不同浓度差异方案的弱抗体质控品。在上述血清抗体检测敏感度能力验证方法中，作为一个优选方案，所述抗体为抗Rh17抗体。在上述血清抗体检测敏感度能力验证方法中，作为一个优选方案，所述抗体为抗Rh29抗体。为实现上述第二个目的，本专利技术采取的技术方案是：一种血清抗体检测敏感度能力验证试剂盒，包含：(1)弱抗体质控品：所述弱抗体质控品为一组包括不同浓度抗体样本，所述抗体样本的效价为0.01-4，抗体样本的标准浓度对于试剂盒提供者来说是已知的；(2)说明书：所述说明书记载了所述弱抗体能力验证产品的操作方法和试剂盒评估方法。在上述血清抗体检测敏感度能力验证试剂盒中，作为一个优选方案，所述抗体样本的标准浓度为1-52.1ng/ml；所述弱抗体质控品还包括抗筛阴性血清样品。在上述血清抗体检测敏感度能力验证试剂盒中，作为一个优选方案，所述试剂盒评估方法包括：将受试者检测时所用的试剂厂商纳入评估因素，以受试者检测到的最低抗体浓度作为检测能力主要指标，通过分析受试者检测结果，准确评估参与实验室对弱抗体的检测能力。本申请专利技术人经过广泛而深入的研究，认识到目前血清抗体检测的质控产品或质控方法均无法用于客观验证或评估免疫血液学相关实验室或专业技术人员的抗体检测敏感度能力，尤其是对弱抗体的检测能力，且目前抗体检测室间质控品均未进行抗体定量，抗体效价设置相对较高，多用于考察实验室对于抗体特异性的判定，无法准确评估参与实验室的弱抗体检测能力。本专利技术首次提出血清抗体检测敏感度能力验证方法，首先将高效价的抗体稀释为一组具有一定浓度的低效本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血清抗体检测敏感度能力验证方法，其特征在于，包括以下步骤：a)评估者将已标定浓度的弱抗体质控品、说明书交付给受试者；所述弱抗体质控品为一组包括不同浓度的抗体样本，所述抗体的效价为0.01‑4；所述说明书记载了弱抗体能力验证产品的操作方法或检测能力评估方法；b)受试者接收弱抗体质控品、说明书，按照所述操作方法将每个抗体样本与相应红细胞反应，以检测每个样品是否含有抗体，并将使用的材料、方法和结果交付给评估者；c)评估者根据受试者交付的材料、方法和结果，将受试者检测时所用的试剂厂商纳入评估因素，以受试者检测到的最低抗体浓度作为检测能力主要指标，通过分析受试者检测结果，准确评估参与受试者对弱抗体的检测能力。

【技术特征摘要】
1.一种血清抗体检测敏感度能力验证方法，其特征在于，包括以下步骤：a)评估者将已标定浓度的弱抗体质控品、说明书交付给受试者；所述弱抗体质控品为一组包括不同浓度的抗体样本，所述抗体的效价为0.01-4；所述说明书记载了弱抗体能力验证产品的操作方法或检测能力评估方法；b)受试者接收弱抗体质控品、说明书，按照所述操作方法将每个抗体样本与相应红细胞反应，以检测每个样品是否含有抗体，并将使用的材料、方法和结果交付给评估者；c)评估者根据受试者交付的材料、方法和结果，将受试者检测时所用的试剂厂商纳入评估因素，以受试者检测到的最低抗体浓度作为检测能力主要指标，通过分析受试者检测结果，准确评估参与受试者对弱抗体的检测能力。2.根据权利要求1所述血清抗体检测敏感度能力验证方法，其特征在于，所述弱抗体质控品还包括抗筛阴性血清样品，如阴性测试样品检测出现阳性结果将作为减分项，降低受试者检测能力的评估结果。3.根据权利要求2所述血清抗体检测敏感度能力验证方法，其特征在于，弱抗体质控品的制备方法如下：使用AB型血浆将高效价抗体稀释为一组不同浓度的抗体；利用已知浓度的国际标准品与制备的抗体进行比对，确定每个抗体的浓度，再加入抗筛阴性的血清，即制备成一组弱抗体质控品。4.根据权利要求3所述血清抗体检测敏感度能...

【专利技术属性】
技术研发人员：向东，金沙，沈伟，
申请(专利权)人：上海市血液中心，
类型：发明
国别省市：上海,31