利用天门冬生产总皂甙和多糖的方法技术

本发明专利技术提供利用天门冬生产总皂甙和多糖的的方法，将天门冬绞碎，酶解，高温水浸提，过滤得滤渣Ⅰ和滤液Ⅰ，滤液Ⅰ浓缩，加入乙醚后搅拌萃取，取不含乙醚的溶液，再加入乙醇，醇沉过夜，过滤得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ；将滤液Ⅱ浓缩，上硅胶柱，用70％乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液Ⅰ，浓缩，结晶，过滤得天门冬总皂甙；向滤渣Ⅱ中加入水溶解，上Sephadex G‑200柱，用水洗脱得洗脱液Ⅱ，浓缩，加入乙醇，结晶，过滤，直接冷冻干燥得天门冬多糖。本发明专利技术充分利用天门冬，极大地降低了天门冬总皂甙的生产成本，确保高效地规模化生产天门冬总皂甙，将天门冬多糖充分利用，不直接排出，极大地降低了向环境排放废弃物的风险。

【技术实现步骤摘要】
利用天门冬生产总皂甙和多糖的方法
本专利技术属于天然产物加工领域，涉及了一种利用天门冬资源综合利用的方法，更具体地说是涉及了一种天门冬生产总皂甙和多糖等产品。
技术介绍
天门冬别名：三百棒，武竹，丝冬，老虎尾巴根，天冬草，明天冬。天门冬根部纺锤状，叶状枝一般每3枚成簇，淡绿色腋生花朵，浆果熟时红色，为百合科、天门冬属多年生草本植物。分布于中国华东、中南、河北、河南、陕西、山西、甘肃、四川、台湾、贵州等省区。多生长于山野林缘阴湿地、丘陵地灌木丛中或山坡草丛。一般在秋、冬季采挖，洗净，除去须根，置沸水中煮或蒸至透心，趁热除去外皮，洗净，晒干备用。另外天门冬的块根是常用的中药，有滋阴润燥、清火止咳之效，主治阴虚发热，咳嗽吐血，肺痿，肺痈，咽喉肿痛，消渴，便秘，小便不利。内服：煎汤，2-4钱；熬膏或入丸、散。虚寒泄泻及外感风寒致嗽者忌。天门冬块根含淀粉33％，蔗糖4％及其他多种营养成分。天门冬全草含天冬酰胺(天门冬素)、β-谷固醇、雅姆皂甙、薯蓣皂甙、菝葜皂甙、异菝葜皂甙、黏液质、糖醛衍生物、17种氨基酸、丰富的维生素、无机元素、豆固醇、内酯、黄酮、蒽醌及强心苷等成分。块根含瓜氨酸、丝氨酸、苏氨酸、脯氨酸、甘氨酸等19种氨基酸、β-谷固醇、5-甲氧基甲基糠醛、葡萄糖及果糖。块根尚含多种低聚糖：三聚糖、四聚糖、五聚糖、六聚糖、八聚糖、九聚糖和十聚糖。有相关专利报道总皂甙提取纯化和多糖制备工艺，如公开号为CN102824525A的中国专利公开了一种羊齿天门冬甾体总皂苷提取物的制备方法。其通过下列的步骤得到：1)将羊齿天门冬原料粉碎，用60-80％的乙醇溶液渗漉提取；2)提取液回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，滤出沉淀；3)沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加氧化铝拌样烘干，装柱，正丁醇-醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集甾体皂苷流分，加活性炭脱色，减压浓缩，干燥即得甾体总皂苷提取物。公开号为CN101857644A的中国专利公开了一种天门冬多糖的醇碱提取法和生产工艺，取天门冬饮片，按质量体积比1∶15～1∶6加入乙醇浓度为5～50％的提取溶剂，调节pH至5～13，浸泡0.5～2.5小时后于水浴60～100℃提取0.5～2.5小时，过滤，残渣同上处理至少一次，合并各次滤液得提取液。采用该提取法的生产工艺还包括如下：浓缩提取液，加入95％乙醇进行醇沉，弃掉上清；加入同浓缩液量的水加热溶解沉淀，离心收集上清；再加入体积5倍于浓缩液的95％乙醇进行醇沉，离心弃掉上清；加入适量95％乙醇搅匀，离心再弃上清；加适量无水乙醇搅匀，离心后收集沉淀，冷冻干燥即得。公开号为CN102516403A的中国专利公开了一种从天门冬中提取天冬多糖的方法，包括清洗粉碎、超声提取、过滤浓缩、脱蛋白、脱色、醇析、抽滤、洗涤、真空冷冻干燥等步骤，其特征在于具体步骤如下：⑴清洗粉碎：将检验合格的天门冬洗涤、晾干；放入粉碎机中粉碎，过0.5mm筛；⑵超声提取：将粉末加入21-23倍量蒸馏水，在77-80℃温度下采用频率为30-35kHz的超声波提取两次，每次30分钟；⑶过滤浓缩：将提取的溶液过滤，合并两次滤液，在旋转蒸发仪上减压浓缩20倍；⑷脱蛋白：用10％三氯乙酸调节其pH值至3,放置过夜,在3000r/min条件下离心5分钟,弃去沉淀；⑸脱色：将上清液加0.1％的活性炭脱色2次；⑹醇析：将脱色液加4倍量无水乙醇沉淀，放置过夜；⑺抽滤：将醇析液进行固液分离，留取沉淀物；⑻洗涤：分别用乙醇、丙酮将沉淀物洗涤2次；⑼真空冷冻干燥：将沉淀物置于干燥盘内，于真空度为30Pa，温度为-10℃下干燥2小时，即得天冬多糖。天门冬块根含淀粉量较高，又含有薯蓣皂甙等皂甙类物质，对后期多糖纯化影响较大，针对目前天门冬资源不足，充分利用天门冬本身有效成分的同时，加大利用淀粉，不仅能有效降低总皂甙的生产成本，也有效地解决生产总皂甙过程中废水排放问题，同时在节约粮食的条件下生产出大量功能性多糖。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对目前天门冬资源不足和产生大量废弃物，严重影响了天门冬长期利用发展前景，而采用目前提取方法都会对环境造成大量的废弃物，本专利技术提供了一种利用从天门冬根茎中规模化生产天门冬总皂甙，又有效解决利用淀粉产生二次污染等问题。因此，本专利技术提供利用天门冬生产总皂甙和多糖的的方法，其具体步骤如下：(1)将天门冬进行洗净、绞碎，加入糖化酶，使溶液中酶活力达到200U/L以上，50～60℃酶解1.5～3h；(2)加入水在90～100℃浸提1.5～3h，过滤得滤渣Ⅰ和滤液Ⅰ，其中加入水的量L与天门冬重量kg比为4～8：1；(3)将滤液Ⅰ在50～60℃减压浓缩至1/10～1/20，向其中加入两至四倍体积的乙醚后搅拌萃取30～60min，再静置8～12h，取不含乙醚的溶液(水相)；(4)向不含乙醚的溶液中加入乙醇，使溶液含乙醇达到60～80％，在4～8℃下进行醇沉过夜，过滤得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ；(5)将滤液Ⅱ在50～60℃减压浓缩至1/10～1/20，上100～200目的硅胶柱，用四至六倍柱体积的70％乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液Ⅰ；(6)将洗脱液Ⅰ在50～60℃减压浓缩至1/15～1/30，在4～8℃下过夜结晶，过滤得天门冬总皂甙产品；(7)向滤渣Ⅱ中加入水溶解，上SephadexG-200柱，直接用水进行洗脱，得洗脱液Ⅱ，其中加入水的量L与滤渣Ⅱ重量kg比为1.5～2.5：1；(8)将洗脱液Ⅱ在50～60℃减压浓缩至1/15～1/30，在4～8℃下加入乙醇至终浓度为60～80％，过夜结晶，过滤，直接冷冻干燥得天门冬多糖。上述过滤为陶瓷膜过滤1次，膜孔径在0.2～0.3微米之间。技术效果1、本专利技术方法操作简单，充分利用天门冬，极大地降低了天门冬总皂甙的生产成本，简化了生产过程，确保高效地规模化生产天门冬总皂甙。2、将天门冬多糖充分利用，不直接排出，极大地降低了向环境排放废弃物的风险。具体实施方式下面用本专利技术的实施实例来进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限制本专利技术。实施例1将200kg天门冬进行洗净、绞碎，加入糖化酶，使溶液中酶活力达到400U/L以上，60℃酶解1.5h；加入700L水在100℃浸提1.5h，过滤得滤渣Ⅰ和滤液Ⅰ；将滤液Ⅰ在55℃减压浓缩至50L，向其中加入150L乙醚后搅拌萃取60min，再静置8～12h，取不含乙醚的溶液(水相)；向不含乙醚的溶液中加入乙醇，使溶液含乙醇达到70％，在4～8℃下进行醇沉过夜，过滤得滤液Ⅱ和7.37kg滤渣Ⅱ；将滤液Ⅱ在55℃减压浓缩至20L，上100～200目的硅胶柱，用六倍柱体积的70％乙醇溶液进行洗脱，得120L洗脱液Ⅰ；将洗脱液Ⅰ在55℃减压浓缩至6L，在4～8℃下过夜结晶，过滤得2.42kg天门冬总皂甙产品；向滤渣Ⅱ中加入15L水溶解，上SephadexG-200柱，直接用水进行洗脱，得60L洗脱液Ⅱ；将洗脱液Ⅱ在55℃减压浓缩至4L，在4～8℃下加入乙醇至终浓度为70％，过夜结晶，过滤，直接冷冻干燥得6.13kg天门冬多糖。经HPLC法进行天门冬总皂甙含量检测达到99.02％。实施例2将400kg天门冬进行洗净、绞碎，加入糖化酶，使溶液中酶活力达到350U/L以上，60℃酶解2h；加入1200L水在100℃浸提3h，过滤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.利用天门冬生产总皂甙和多糖的的方法，其具体步骤如下：(1)将天门冬进行洗净、绞碎，加入糖化酶，使溶液中酶活力达到200U/L以上，50～60℃酶解1.5～3h；(2)加入水在90～100℃浸提1.5～3h，过滤得滤渣Ⅰ和滤液Ⅰ，其中加入水的量L与天门冬重量kg比为4～8：1；(3)将滤液Ⅰ在50～60℃减压浓缩至1/10～1/20，向其中加入两至四倍体积的乙醚后搅拌萃取30～60min，再静置8～12h，取不含乙醚的溶液(水相)；(4)向不含乙醚的溶液中加入乙醇，使溶液含乙醇达到60～80％，在4～8℃下进行醇沉过夜，过滤得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ；(5)将滤液Ⅱ在50～60℃减压浓缩至1/10～1/20，上100～200目的硅胶柱，用四至六倍柱体积的70％乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液Ⅰ；(6)将洗脱液Ⅰ在50～60℃减压浓缩至1/15～1/30，在4～8℃下过夜结晶，过滤得天门冬总皂甙产品；(7)向滤渣Ⅱ中加入水溶解，上Sephadex G‑200柱，直接用水进行洗脱，得洗脱液Ⅱ，其中加入水的量L与滤渣Ⅱ重量kg比为1.5～2.5：1；(8)将洗脱液Ⅱ在50～60℃减压浓缩至1/15～1/30，在4～8℃下加入乙醇至终浓度为60～80％，过夜结晶，过滤，直接冷冻干燥得天门冬多糖。...

【技术特征摘要】
1.利用天门冬生产总皂甙和多糖的的方法，其具体步骤如下：(1)将天门冬进行洗净、绞碎，加入糖化酶，使溶液中酶活力达到200U/L以上，50～60℃酶解1.5～3h；(2)加入水在90～100℃浸提1.5～3h，过滤得滤渣Ⅰ和滤液Ⅰ，其中加入水的量L与天门冬重量kg比为4～8：1；(3)将滤液Ⅰ在50～60℃减压浓缩至1/10～1/20，向其中加入两至四倍体积的乙醚后搅拌萃取30～60min，再静置8～12h，取不含乙醚的溶液(水相)；(4)向不含乙醚的溶液中加入乙醇，使溶液含乙醇达到60～80％，在4～8℃下进行醇沉过夜，过滤得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ；(5)将滤液Ⅱ在50～60℃减压浓缩...

【专利技术属性】
技术研发人员：向华，
申请(专利权)人：长沙湘资生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43