傣药肾茶酚类提取物的制备方法及其用途技术

本发明专利技术公开了一种傣药肾茶酚类提取物的制备方法及应用。制备方法如下：选择的原料为紫花肾茶，开花期割取地上部分，切断、烘干、粉碎；原料投入提取罐中，加入重量比10~30倍量的0%~95%乙醇‑水溶液40~60℃回流提取1~3次；提取液过滤，减压浓缩，大孔吸附树脂吸附，0%~95%乙醇梯度洗脱纯化，得到肾茶酚类提取物。所得的提取物主要成分为黄酮类化合物和多酚类成分，二者的重量百分比不低于50.0%，其中主要酚类化合物迷迭香酸和泽兰黄素的含量分别不低于5.5%和0.8%。本发明专利技术肾茶提取物的制备工艺简单易行，所得的酚类提取物具有抑菌、抗炎活性，用于治疗泌尿系统感染和炎症等疾病，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
傣药肾茶酚类提取物的制备方法及其用途
本专利技术涉及一种傣药肾茶酚类提取物的制备方法及其应用，属于植物提取物

技术介绍
肾茶（Clerodendranthusspicatus（Thunb.）C.Y.Wu）为唇形科肾茶属植物，又名猫须草，主要分布于东南亚的印度尼西亚、马来西亚、澳大利亚及周边岛屿；国内主要分布于福建、台湾、广西、广东和云南。肾茶全草入药，具有清热利湿、排石通淋的功效，主治急慢性肾炎、膀胱炎、尿路结石、胆结石、胆囊炎、肝炎、高血压、风湿性关节炎、前列腺炎等疾病，尤其对泌尿系结石有特殊疗效，被誉为“国际利尿化石药”。西双版纳版纳药业生产的国药准字号产品肾茶袋泡茶具有清洗肾脏、抗炎利尿、抑菌排毒之功效。用于急慢性肾炎、膀胱炎、尿路结石及风湿等症。肾茶为西双版纳地区傣族常用药，傣药名“雅糯妙”，在傣族医术“档哈雅”“贝叶经”中记载用于治疗小便热、涩、疼痛等泌尿系统疾病，已有两千多年应用历史，疗效确切。肾茶也是泰国、马来西亚、印度尼西亚等东南亚国家传统药物的重要组成部分，民间广泛用于治疗扁桃体炎、风湿病、糖尿病、淋病、癫痫、高血压、月经紊乱、梅毒感染、肾结石、胆结石、水肿、发疹、发热、流感、肝炎和黄疸病。引入欧洲和日本被当做保健茶使用。现代研究显示，肾茶中含有多种化学成分，包括黄酮类、二萜类、木脂素类、甾体类、多酚类等。国内外药理学研究显示：肾茶提取物具有利尿、抑菌、抗炎、抗氧化、免疫调节、健肾、降血糖、抗血栓等功效，临床主要用于尿路感染、尿路结石、肾功能不全、肾病综合征等疾病的治疗。根据文献报道，肾茶所含的酚类物质（黄酮和多酚）为治疗慢性肾炎的有效部位。国内对肾茶提取工艺的研究多以总黄酮（杨江媛，2015；汤须崇，2011；蓝伦礼，2017；）或总多酚（李晓花，2016；张素斌，2015；）含量为指标，采用水、乙醇-水系统回流、超声等方法进行，总酚类物质的提取和纯化工艺研究极少（薛松，2016；辛雪；2014）。国内对肾茶药理活性的研究主要集中于水煎液对肾脏相关疾病的治疗（高敏，2017；谢丽萍，2012；刘广建，2007；张少贵，2014；高南南，1996；王丽敏，2013；刘旭航，2014；王立强，2011）和降尿酸和利尿活性（黄幼霞，2016；陈珠，2016；黄荣贵，1999）、抗泌尿系结石活性（蔡华芳，2008；蒋维晟，2009）、提高免疫力活性（岑小波，1999）、抑菌活性（易富，2013）、改善记忆的作用（汪泽栋，2013）和降血糖活性（李光，2013）。除此以外，涉及肾茶总黄酮的抗肿瘤活性（龙贺明，2017）、抑菌活性（甘典辉，2013；陈涛，2016）、神经保护作用（游建军，2015）；肾茶醇提取物的抗氧化活性（苏德禹，2014）等。虽然国内外对肾茶的化学成分研究较多，但目前关于肾茶有效部位的制备鲜有文献报道；药理活性研究中也缺少化学成分与活性相关联的研究。《国家中成药标准汇编内科肾系分册》收载了“肾茶袋泡茶”傣药制剂，其制法为：肾茶切断、粉碎成粗粉，过筛，混匀，灭菌后低温干燥制得。制剂较为粗糙，有效成分在制剂中的含量较低，增加了病人口服用药剂量。本专利中，申请人在前期实验的基础上，为了获得一种更有效的肾茶提取物及其制剂，对肾茶中有效成分酚类物质（包括总黄酮和多酚类）的提取方法和活性进行了考察，通过本方法，提取物中总酚类物质含量不少于50.0%。提取物的药理活性显示其具有显著的抗炎和抑菌活性，为其临床应用和综合开发提供了科学依据。
技术实现思路
（一）要解决的技术问题本专利技术提供了一种傣药肾茶酚类提取物的制备方法及其用途。本方法制备的样品酚类物质含量不少于50.0%，主要酚类化合物迷迭香酸和泽兰黄素的含量分别不低于5.5%和0.8%，两种化合物的结构式为图1所示：本专利技术获得的肾茶酚类提取物可用于制备治疗泌尿系统感染和炎症等疾病的药物。（二）技术方案本专利技术的目的之一为提供一种肾茶酚类提取物，其特征在于，所述肾茶酚类提取物主要成分为黄酮类和多酚类成分，总酚类的质量百分含量不低于50.0%，主要酚类化合物迷迭香酸和泽兰黄素的含量分别不低于5.5%和0.8%。本专利技术中酚类物质的含量测定采用文献报道的分光光度法（辛雪等，2014），以迷迭香酸为对照品，亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色剂，检测波长为500nm。本专利技术的第二个目的是提供一种肾茶酚类提取物的制备方法，包括以下步骤：步骤1：原料处理：采收开花期紫花肾茶地上部分，切断，干燥，粉碎，过10~100目筛；步骤2：提取：肾茶干燥全草，用10~30倍量的0%~90%乙醇-水溶剂浸泡过夜，60~80℃回流提取1~3次，过滤，得到提取液。步骤3：浓缩：将步骤2获得的提取液浓缩，得到提取物；所选用的浓缩方法为常压浓缩或减压浓缩。步骤4：纯化：提取物用适量水溶解，按照物料比1:5~1:15进行大孔树脂吸附，0%~95%乙醇-水系统洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.0~1.5。所选用的大孔树脂为AB-8、D101、HPD100、HPD400、NKA-2和NKA-9。步骤5：干燥：将浓缩液经薄膜干燥、高温喷雾干燥或低温冷冻干燥，得到肾茶酚类提取物。优选地，步骤1中肾茶粉碎后过10~20目筛；更优选地，肾茶粉碎后过20目筛。优选地，步骤2中所述的液料比为10~20倍，乙醇浓度为50~70%，回流提取温度为70~80℃，回流提取2~3次；更优选地，步骤2中所述的液料比为液料比10:1，乙醇浓度为50%，回流提取3次，每次2h。优选地，步骤4中酚类物质的纯化工艺，上样量与大孔树脂的比值为1:10~1:15，先用纯水洗脱，再用的乙醇浓度为50%~70%，洗脱体积为3~4个柱体积，大孔吸附树脂为AB-8或D101型。更优选地，步骤4中酚类物质的纯化工艺：选用AB-8大孔树脂，上样量与大孔树脂的比值为1:15，纯水洗脱3个柱体积后，50%乙醇洗脱3个柱体积。优选地，该方法包括如下步骤：步骤1：原料处理：采收开花期紫花肾茶地上部分，切断，干燥，粉碎，过20目筛；步骤2：提取：肾茶干燥全草，用10倍量的50%乙醇-水溶剂浸泡过夜，80℃回流提取3次，过滤，得到提取液。步骤3：浓缩：将步骤2获得的提取液浓缩，得到提取物；步骤4：纯化：提取物适量水混悬，采用AB-8大孔树脂，按照物料比1:15进行吸附，纯水洗脱3个柱体积后，50%乙醇-水洗脱，收集3个柱体积的洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.0~1.5。步骤5：干燥：将浓缩液经薄膜干燥、高温喷雾干燥或低温冷冻干燥，得到肾茶酚类提取物。经上述步骤获得的肾茶酚类提取物中，总酚类成分的含量高达80.5%，其中迷迭香酸含量为16.8%，泽兰黄素含量为2.4%。本专利技术的第三个目的是提供肾茶酚类提取物的用途，用于制备预治疗泌尿系统感染和炎症等疾病的药物。本专利技术人将所制备的肾茶酚类提取物进行了体外抗炎和抑菌活性实验，并采用动物模型进行了药效学实验，结果证明肾茶酚类提取物具有良好的抗菌、抗炎活性，可用于制备治疗泌尿系统感染和炎症等疾病的药物，为肾茶的临床应用和新产品开发提供了依据。附图说明图1泽兰黄素和迷迭香酸的结构式图2肾茶酚类提取物对RAW264.7细胞炎症因子释放的影响具体实施方式：实施例1：肾茶酚类物质的提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肾茶酚类提取物，其特征在于，所述肾茶酚类提取物主要成分为黄酮类和多酚类成分，总酚类的质量百分含量不低于50.0%，主要酚类化合物迷迭香酸和泽兰黄素的含量分别不低于5.5%和0.8%；所述的肾茶酚类提取物的制备方法包括以下步骤：步骤1：原料处理：采收开花期紫花肾茶地上部分，切断，干燥，粉碎，过10~100目筛；步骤2：提取：肾茶干燥全草，用10~30倍量的0%~90%乙醇‑水溶剂浸泡过夜，60~80℃回流提取1~3次，过滤，得到提取液；步骤3：浓缩：将步骤2获得的提取液浓缩，得到提取物；所选用的浓缩方法为常压浓缩或减压浓缩；步骤4：纯化：提取物用适量水溶解，按照物料比1:5~1:15进行大孔树脂吸附， 0%~95%乙醇‑水系统洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.0~1.5；所选用的大孔树脂为非极性大孔树脂HPD‑100、HPD‑200A、HPD‑400A、HPD‑500、HPD‑600、HPD‑826、D101和AB‑8；步骤5：干燥：将浓缩液经薄膜干燥、高温喷雾干燥或低温冷冻干燥，得到肾茶酚类提取物。

【技术特征摘要】
1.一种肾茶酚类提取物，其特征在于，所述肾茶酚类提取物主要成分为黄酮类和多酚类成分，总酚类的质量百分含量不低于50.0%，主要酚类化合物迷迭香酸和泽兰黄素的含量分别不低于5.5%和0.8%；所述的肾茶酚类提取物的制备方法包括以下步骤：步骤1：原料处理：采收开花期紫花肾茶地上部分，切断，干燥，粉碎，过10~100目筛；步骤2：提取：肾茶干燥全草，用10~30倍量的0%~90%乙醇-水溶剂浸泡过夜，60~80℃回流提取1~3次，过滤，得到提取液；步骤3：浓缩：将步骤2获得的提取液浓缩，得到提取物；所选用的浓缩方法为常压浓缩或减压浓缩；步骤4：纯化：提取物用适量水溶解，按照物料比1:5~1:15进行大孔...

【专利技术属性】
技术研发人员：王剑，
申请(专利权)人：西双版纳版纳药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南,53