SB203580在制备抗肿瘤药物中的应用及抗肿瘤药物制造技术

本发明专利技术公开了一种小分子化合物SB203580在制备抗肿瘤药物中的应用以及一种抗肿瘤药物。本发明专利技术研究发现低剂量p38抑制剂SB203580通过提高体内IL‑9

【技术实现步骤摘要】
SB203580在制备抗肿瘤药物中的应用及抗肿瘤药物
本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种小分子化合物SB203580在制备抗肿瘤药物中的应用以及一种抗肿瘤药物。
技术介绍
目前，癌症已超过心血管疾病，成为全球第一大死亡原因。一直以来，手术切除、放疗和化疗仍然是肿瘤临床治疗的主要手段。尽管靶向治疗对乳腺癌、非小细胞型肺癌等部分癌症的治疗取得了重要突破，但是绝大部分肿瘤仍然缺乏有效的治疗手段。2013年度的《科学》杂志将癌症的免疫疗法列为2013年度重大突破之首，2018年诺贝尔生理和医学奖也颁发给了JamesP.Allison教授和TasukuHonjo教授以表彰他们在肿瘤免疫治疗方面做出的贡献，因而免疫治疗将有望成为未来治疗肿瘤的手段之一。新近发现的以产IL-9细胞因子为主并具有一定抗肿瘤效应的TH9细胞受到广泛关注。回输肿瘤特异性TH9细胞可以根除小鼠肿瘤并保护存活的荷瘤小鼠免受肿瘤的再攻击(YongLuetal.,2018)。Fas信号通路除了介导T细胞凋亡功能，还可以参与T细胞的增殖和活化。已有文献报道Fas促进TH17细胞极化，抑制TH1细胞极化，而Fas是否参与TH9细胞极化仍不清楚。p38是一类可由多种应激信号和炎性细胞因子激活的普遍存在于细胞中的蛋白激酶，活化p38激酶导致肿瘤细胞在化疗中存活，因此，抑制p38激酶具有潜在的临床治疗意义。此外，p38信号通路是否参与TH9细胞极化仍不清楚，因此，具体研究p38信号途径在TH9极化及免疫治疗中的作用可为进一步的肿瘤治疗提供理论指导。SB203580的分子式为C21H16FN3OS，结构式如式(Ⅰ)所示。SB203580是一种常用的p38MAPK抑制剂。SB203580可以通透细胞，抑制p38MAPK(p38MAPkinase)，抑制后续MAPKAPKinase-2和MAPKAPKinase-3的激活。通过抑制p38MAPK，SB203580可以有效抑制一些炎症因子(如IL-1β、TNF-α)诱导的部分信号转导。但尚未有关于SB203580抗肿瘤方面的报道。
技术实现思路
本专利技术经研究发现p38的小分子抑制剂SB203580具有通过促进TH9细胞极化来抑制肿瘤生长的作用。本专利技术提供了小分子化合物SB203580在制备抗肿瘤药物中的应用。小分子化合物SB203580是一种p38抑制剂，能够抑制p38的磷酸化，从而抑制p38活性，而p38活性被抑制后，能够提高Jo2(FasL)促进CD4+T细胞向TH9细胞极化，TH9细胞是一类能够表达IL-9的CD4+T细胞，具有抑制肿瘤生长作用。优选的，所述抗肿瘤药物针对的肿瘤类型为肺癌。小分子化合物SB203580通过抑制p38活性来提高FasL诱导CD4+T细胞向TH9细胞极化，从而起到抗肿瘤作用。本专利技术又提供了Fas或其配体FasL作为靶点在制备抗肿瘤药物中的应用。本专利技术经研究发现，Fas/FasL通路能够促进CD4+T细胞向TH9细胞极化，从而起到抗肿瘤作用。所述抗肿瘤药物通过提高Fas或其配体FasL活性来促进诱导CD4+T细胞向TH9细胞极化，从而起到抗肿瘤作用。优选的，所述肿瘤为肺癌。本专利技术还提供了一种抗肿瘤药物，活性成分为小分子化合物SB203580。小分子化合物SB203580是一种p38抑制剂，通过抑制p38的活性，从而提高Jo2(FasL)促进CD4+T细胞向TH9细胞极化。相当于小分子化合物SB203580间接提高了FasL的活性，从而增加CD4+T细胞向TH9细胞极化，TH9细胞增加能够抑制肿瘤生长。本专利技术体外实验发现Fas缺失的CD4+T细胞往TH9细胞极化能力减弱，蛋白免疫印迹(westernblot)结果显示Fas缺失的TH9细胞中磷酸化p38表达减弱，而SB203580联合FasL(Jo2)刺激后，Jo2促TH9细胞极化能力大大增加。通过动物肿瘤模型发现低剂量SB203580就能够明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长，延长其生存时间。利用IL-9阻断抗体(anti-IL-9)和Il9r-/-小鼠进一步分析发现，低剂量SB203580能够抑制荷瘤小鼠的肿瘤主要是通过提高体内IL-9+CD4+T细胞(TH9细胞)数目，且无肝肾功能毒性副作用。本专利技术具有如下优点：本专利技术研究发现低剂量p38抑制剂SB203580通过提高体内IL-9+CD4+T细胞数目从而对肺癌具有良好的抑制作用，为抑制剂的新用途提供理论基础，为开发p38抑制剂SB203580的抗癌作用提供了新思路；其次，p38抑制剂SB203580除了具有一定的抗肿瘤作用，其副作用较小，无肝肾功能毒性，具有很好的临床应用前景。附图说明图1为Faslpr小鼠和对照WT小鼠CD4+T细胞向TH9细胞极化能力检测结果图，其中，图a为流式分析检测IL-9+CD4+T细胞比例，图b为流式分析统计结果，图c为RT-PCR检测IL-9的mRNA水平，图d为ELISA检测IL-9的蛋白水平，“***”表示P＜0.001(下同)。图2为Faslpr小鼠和对照WT小鼠TH9细胞或者Jo2刺激WT小鼠TH9细胞后p38活化水平的Westernblot检测结果，图中ISO是isotype，即同型对照抗体，Jo2是FasL。图3为CD4+T细胞在Jo2和p38抑制剂(SB203580)的共同作用下极化为TH9细胞的流式结果图，其中，“NS”表示没有统计学意义(下同)。图4为SB203580对小鼠肿瘤大小及小鼠生存率变化检测结果图，其中，图a为肿瘤大小结果，图b为生存率变化结果，第一组DMSO表示注射DMSO和anti-IL9的同型对照抗体，第二组SB203580表示注射SB203580和anti-IL9的同型对照抗体，第三组DMSO+anti-IL9表示注射DMSO和anti-IL9抗体，第四组SB203580和anti-IL9表示注射SB203580和anti-IL9抗体，“**”表示P<0.01(下同)。图5为OT-II小鼠来源的Jo2及Jo2联合SB203580刺激TH9细胞对小鼠肿瘤大小及小鼠生存率变化检测结果图，其中，图a为肿瘤大小结果，图b为生存率变化结果，NT表示未处理组，FasL-TH9表示回输Jo2单独刺激TH9组，FasL+p38i-TH9表示回输Jo2联合SB203580刺激TH9组。图6为OT-II小鼠来源的Jo2及Jo2联合SB203580刺激TH9细胞对Il9r-/-小鼠肿瘤大小及小鼠生存率变化检测结果图，其中，图a为肿瘤大小结果，图b为生存率变化结果。图7为低剂量p38抑制剂对小鼠肝肾功能影响检测结果图，其中，图a为血清检测丙氨酸转氨酶含量，图b为血清检测肌酐含量。具体实施方式雌性C57BL/6小鼠(6-8周，以下简称C57小鼠)购买于上海斯莱克实验动物有限公司。Faslpr小鼠(Fas缺失小鼠)及对应的对照WT小鼠(Fas正常小鼠，两杂合子小鼠配，繁殖得到Fas基因缺失的纯合子小鼠及Fas基因正常的小鼠，该正常小鼠作为对照用，其余遗传背景相同。)；OT-II小鼠(一种CD4转基因小鼠，其TCR(T细胞受体)可被OVA323-339所识别。)和Il9r-/-小鼠(IL-9受体缺失小鼠)购买于美国Jacksonla本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.小分子化合物SB203580在制备抗肿瘤药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.小分子化合物SB203580在制备抗肿瘤药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗肿瘤药物针对的肿瘤类型为肺癌。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，小分子化合物SB203580通过抑制p38活性来提高FasL诱导细胞向TH9细胞极化，从而起到抗肿瘤作用。4.Fas或其配体FasL...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建莉，蔡志坚，沈颖颖，宋正波，马泽宇，张贝，路超杰，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33