一种用于防治鸡腹泻的饲料添加剂制造技术

本发明专利技术涉及一种用于治疗鸡腹泻病的饲料添加剂，该饲料添加剂的组分及其重量份数比分别为：含乳酸链球菌素的发酵液2g/100g水。本发明专利技术利用实验室筛选获得的M4型乳酸乳球菌，在培养基配方为：酵母膏15g，蛋白胨15g，磷酸二氢钾20g，蔗糖20g，玉米浆3g，氯化钠1.5g，硫酸镁0.15g的发酵培养基中恒温30℃静置培养8小时。以含有大量乳酸链球菌素以及乳酸乳球菌的发酵液为生物药物制剂。按照2％的比例配比到家禽饮用水中。发现可以起到长期稳定的治疗家禽腹泻的效果，并且M4型乳酸乳球菌本身对动物无害，容易附着于动物肠道，解决了目前市场上抗生素药物长期使用面临的有害残留以及细菌耐药的问题，具有很好的应用前景。

A Feed Additive for Prevention and Treatment of Chicken Diarrhea

The present invention relates to a feed additive for treating chicken diarrhea disease. The feed additive components and their weight fraction ratios are 2 g/100 g water of fermentation broth containing Streptococcus lactis, respectively. The Lactococcus lactis M4, which was screened by the laboratory, was cultured in a fermentation medium of 15g yeast extract, 15g peptone, 20g potassium dihydrogen phosphate, 20g sucrose, 3G corn syrup, 1.5g sodium chloride and 0.15g magnesium sulfate for 8 hours at a constant temperature of 30 C. The fermentation broth containing large amounts of Streptococcus lactis and Lactococcus lactis was used as biopharmaceutical preparation. Poultry drinking water is prepared in proportion of 2%. It has been found that Lactococcus lactis M4 is harmless to animals and easy to adhere to animal intestines. It solves the problem of harmful residues and bacterial resistance in the long-term use of antibiotics on the market, and has a good application prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种用于防治鸡腹泻的饲料添加剂
本专利技术属于禽药
，尤其是一种用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂。
技术介绍
中国人的饮食习惯以谷物蛋白作为主食，辅之以肉蛋蔬菜类丰富饮食结构之余最根本的原因是为身体补充蛋白质和维生素等物质。近年来随着生活水平的提高，中国的饮食文化也随之改变，更加追求健康、养生。传统的饮食习惯也随之发生了变化，餐桌上对肉蛋类的需求与日俱增，因此家禽的养护就变成了一个亟待解决的问题。由于养殖家禽数量的增加，饲养环境不可避免的会出现微生物污染。当家禽所处的环境中细菌超标时极易引起细菌性腹泻。针对这一问题，现在常用的方法是抗生素治疗，但是这种方法却面临着细菌耐药性的挑战，于是我们将眼光放在了新兴生物药领域。乳酸链球菌素是乳酸乳球菌的表达产物之一，而乳酸乳球菌又属于肠道益生菌。此外乳酸链球菌素是一种多肽类物质，具有高效无毒副作用、耐高温、无残留、不产生抗药性等特点。故此乳酸链球菌素在抑制家禽腹泻方面有很好的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供使用安全、绿色环保的一种用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂。其作用实体为M4型乳酸乳球菌产生的乳酸链球菌素。本专利技术是通过以下的技术方案实现的：一种用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂，其组分及其质量份数比为：使用量为100g水中2g发酵液。一种如权利要求1所述的用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂的制备方法，其特征在于：该制备方法的步骤如下：(1)将正常乳酸乳球菌在液体培养基内培养12h，通过紫外诱变技术对其处理，然后在固体培养基上画线分离出单菌落(2)将步骤(1)中分离出的单菌落培养后筛选，选择出高效表达乳酸链球菌素的菌株。然后对其利用培养基方案：酵母膏15g，蛋白胨15g，磷酸二氢钾20g，蔗糖20g，玉米浆20g，氯化钠1.5g，硫酸镁0.15g于30℃恒温静置培养8小时，即可制得该发酵产品。本专利技术的优点及效果是：1、本专利技术中饲料添加剂为乳酸乳球菌表达产生的乳酸链球菌素，是一种细菌代谢产物避免了抗生素的耐药性问题。2、本专利技术中的采用的乳酸乳球菌本身是一种益生菌。本专利技术通过以下实施例进一步详述。需要说明的是；下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以以下实施例来限定本专利技术的保护范围。本专利技术设计的初代乳酸乳球菌在市场上购买得到。实施例1一种用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂，其组分及其质量份数比为：含乳酸链球菌素的发酵液1g/100g水。一种如权利要求1所述的用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂的制备方法，其特征在于：该制备方法的步骤如下：利用培养基方案：酵母膏15g，蛋白胨15g，磷酸二氢钾20g，蔗糖20g，玉米浆20g，氯化钠1.5g，硫酸镁0.15g将筛选好的M4型乳酸乳球菌于30℃恒温静置培养8小时，即可制得该发酵产品。实施例2一种用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂，其组分及其质量份数比为：含乳酸链球菌素的发酵液2g/100g水。其制备方法的步骤同实施例1实施例3一种用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂，其组分及其质量份数比为：含乳酸链球菌素的发酵液3g/100g水。其制备方法的步骤同实施例1临床应用乳酸乳球菌是动物肠道益生菌，其本身无致病性。我们选择M4型乳酸乳球菌作为载体，是因为其更容易附着在肠壁上，不会轻易被动物排便时排出体外。而且乳酸乳球菌M4菌株是表达乳酸链球菌素的高产菌株，故此利用该菌株喂食给患病动物可以起到持续治疗且完全无害的效果。另外考虑到菌体进入肠道后内环境的不可控因素，不能直接给患病动物喂食菌粉而应该将乳酸乳球菌在发酵培养基中培养。以含有大量代谢产物的发酵液做为药剂，以2％的比例拌入饮水中让患病动物饮用，从而提高治疗效果。但是为了让其高效表达，需要良好的发酵培养基，我们采用的发酵培养基配方为：实验过程实验目的目前已经广为人知的是腹泻会受到脑部调控，而引起这种调控的正是单胺类的神经递质。那么如何实现通过肠道给药增加肠道血液中的有效递质，递质又随着血液运输到大脑后完成脑部调控。本实验主要是为了验证乳酸链球菌素可以对脑调控腹泻应激的5羟色胺、去甲肾上腺素两种单胺类神经递质产生影响，从而减轻、治愈腹泻。实验材料M4型乳酸乳球菌，乳酸菌固体培养基，伊红美蓝培养基。5羟色胺ELISA检测试剂盒、去甲肾上腺素ELISA检测试剂盒，菌落计数板，试管若干，解剖刀等。实验方法1.鸡生理病症观察在鸡舍腹泻的鸡当中随机选择20只病鸡分为两组，实验组在其饮水中以2％的比例拌入乳酸乳球菌发酵液，对照组不做处理，持续5天，观察病鸡的腹泻症状以及生理特征有无变化。2.鸡肠道菌落计数将实验组、对照组病鸡在5天后做解剖，取出鸡的肠道，然后将肠道内容物用生理盐水冲下，梯度稀释到10-5倍。利用乳酸菌固体培养基，伊红美蓝固体培养基分别做菌落计数。3.鸡肠道血清样本中单胺类物质含量检测抽取实验组和对照组的病鸡血液样本，利用ELISA试剂盒分别检测其血清中的5羟色胺和去甲肾上腺素含量，计算方法按说明书。实验结果1.生理变化结果发现实验组病鸡出现腹泻减轻，站立，竟食，精神恢复，体重增加的现象，而对照组病鸡则出现病情逐渐加重，爬伏，厌食，精神不振，体重减轻的症状。对两组病鸡的粪便进行处理，分离出菌液在固体培养基上接种，然后进行革兰氏染色，呈现红色，认定为革兰氏阴性菌。符合大肠杆菌至腹泻的致病机理。2.鸡肠道菌落平板计数结果实验结果发现大肠杆菌方面实验组比对照组平均减少了11.46％而乳酸乳球菌方面实验组却比对照组平均增加了8.40％。故认定饮用乳酸链球菌素后实验组病鸡肠道内大肠杆菌数量开始下降，益生菌乳酸乳球菌有效存留在了肠道内，并且数量开始增长。3.鸡肠道血液中单胺类物质含量通过实验结果我们可以看出，乳酸链球菌素的出现明显增加了血清中调控腹泻的单胺类递质，所以认为食用乳酸链球菌素有助于腹泻的治疗。综上所述，M4型乳酸乳球菌在进入家禽的肠道后，可以有效附着并持续的产生乳酸链球菌素。产生的乳酸链球菌素又会造成肠道中单胺类物质的增加，从而增加血液中的单胺类递质。伴随血液输送单胺类递质到达脑部后，会诱发机体调控机制，从而减少了肠道中大肠杆菌的含量，减轻、治愈腹泻症状。并且此方法不会引起细菌的耐药性，乳酸乳球菌本身又属于益生菌，故是一种更有前景的治疗家禽腹泻的新型生物药。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于治疗鸡腹泻的生物饲料添加剂，其作用实体为M4型乳酸乳球菌产生的乳酸链球菌素。使用量为100g水中2g发酵液。

【技术特征摘要】
1.一种用于治疗鸡腹泻的生物饲料添加剂，其作用实体为M4型乳酸乳球菌产生的乳酸链球菌素。使用量为100g水中2g发酵液。2.一种如权利要求1所述的用于治疗鸡腹泻的饲料添加剂，其特征在于：该制备方法的步骤如下：(1)将正常乳酸乳球菌在液体培养基内培养12h，通过紫外诱变技术对其处理，然后...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘鼎阔，董惠峰，刘芳，李源，胡鹏程，
申请(专利权)人：鼎正动物药业天津有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12