活性肽、重组载体、重组细胞、抗氧化组合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种活性肽、重组载体、重组细胞、抗氧化组合物及其制备方法和应用。该活性肽含有氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的短肽。该活性肽具有具有抗氧化性且安全性较高。

Active Peptides, Recombinant Vectors, Recombinant Cells, Antioxidant Compositions, Their Preparation and Application

The invention relates to an active peptide, a recombinant carrier, a recombinant cell, an antioxidant composition, a preparation method and application thereof. The active peptide contains short peptides with amino acid sequences such as SEQ ID No.1. The active peptide has antioxidant activity and high safety.

【技术实现步骤摘要】
活性肽、重组载体、重组细胞、抗氧化组合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种活性肽、重组载体、重组细胞、抗氧化组合物及其制备方法和应用。
技术介绍
正常生命过程中生物体会不断地产生自由基，适量的自由基能够维持生物体的正常生理代谢，但是过量的自由基会导致机体组织受到氧化胁迫，致使机体的氧化系统和抗氧化系统失衡，而导致机体组织中的细胞、蛋白和核酸等生物大分子发生氧化损伤，进而引发癌症、心血管以及衰老等问题，对机体的健康造成极大损害。因此，有效的抗氧化物质进行抗氧化对于维护机体健康具有极其重要的作用。目前，在医学上有多种抗氧化药物，但这些药物大多具有不同程度的副作用，不宜长期服用。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种具有抗氧化性且安全性较高的活性肽。此外，还提供一种重组载体、重组细胞、抗氧化组合物及其制备方法和应用。一种活性肽，所述活性肽含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的短肽。上述活性肽含有Gly-Glu-Gly-Val-Phe-Gly-His，使得该活性肽能够有效地提高抗氧化酶的活性，且该活性肽无毒副作用，安全性较高。经试验验证，该活性肽能够延长N2野生型秀丽隐杆线虫的寿命，提高百草枯处理后的N2野生型秀丽隐杆线虫的超氧化歧化酶(SOD，SuperoxideDismutase)的活性，降低百草枯处理后的N2野生型秀丽隐杆线虫的活性氧簇(ROS，reactiveoxygenspecies)和丙二醛(MDA，Malondialdehyde)的含量，达到修复和治疗氧化性损伤的目的。一种重组载体，含有上述所述短肽的编码序列。在其中一个实施例中，所述编码序列如SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；或所述编码序列为与SEQIDNo.2所示核苷酸序列具有75％同源性的核苷酸序列；或所述编码序列为由SEQIDNo.2所示核苷酸序列中一个或多个碱基被缺失、替代或增加得到的核苷酸序列。一种重组细胞，所述重组细胞含有编码上述所述活性肽的核苷酸；或者，所述重组细胞含有上述所述的重组载体。一种抗氧化组合物，包括活性组分，所述活性组分包括上述所述的活性肽。上述所述的活性肽、上述所述的重组载体、上述所述的重组细胞或上述所述的抗氧化组合物在制备提高抗氧化酶活性或含量的药物、降低丙二醇含量的药物或降低活性氧簇含量的药物中的应用。上述所述的活性肽、上述所述的重组载体、上述所述的重组细胞或上述所述的抗氧化组合物在制备预防或治疗氧化性损伤的药物中的应用。上述所述的活性肽在制备食品、保健品或化妆品中的应用。上述所述的活性肽的制备方法，包括如下步骤：从石金钱龟中分离得到所述活性肽；或通过化学合成方法合成所述活性肽。在其中一个实施例中，所述从石金钱龟中分离得到所述活性肽包括如下步骤：将石金钱龟肉酶解，得到酶解物；及采用有机溶剂对所述酶解物进行萃取，得到所述活性肽。附图说明图1为实施例1的活性肽的质谱图；图2为实施例1的活性肽的高效液相色谱图；图3为I组、II组、III组、IV组的线虫的寿命的对比图；图4为I组、II组、III组、IV组、Par组的线虫的存活率的对比图；图5为I组、II组、III组、IV组、Par组的线虫体内ROS含量的对比图；图6为I组、II组、III组、IV组、Par组的线虫体内MDA含量的对比图；图7为I组、II组、III组、IV组、Par组的线虫体内的超氧化歧化酶活性的对比图。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将参照相关附图对本专利技术进行更全面的描述。附图中给出了本专利技术的较佳的实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。一实施方式的活性肽含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的短肽。具体地，SEQIDNo.1所示的氨基酸序列为Gly-Glu-Gly-Val-Phe-Gly-His。其中，Gly表示甘氨酸，缩写为G。Glu表示谷氨酸，也简写为E。Val表示缬氨酸，缩写为V。Phe表示苯丙氨酸，缩写为F。His表示组氨酸，缩写为H。由于蛋白编码序列的多态性及变异，天然存在的蛋白质会出现基因突变，编码序列中碱基被缺失、替代或增加，或氨基酸的缺失、插入、取代或其它变异，从而导致蛋白质的氨基酸序列出现一个或多个氨基酸被缺失、替代或增加。因此，存在着一些生理和生物活性上基本等同于无变异蛋白质的蛋白。这些结构不同于相应的蛋白质，但与该蛋白质没有明显的功能差异的多肽或蛋白称为功能等同变异体。功能等同的变异体同样适用于通过缺失、插入和突变等人工手段改变一个或多个密码子，从而向一种蛋白质的氨基酸序列中导入这类变异而制成的短肽。尽管这样能获得更多不同形式的变异体，但所得的变异体作为功能等同变异体的前提是其生理活性基本等同于原始无变异蛋白质的活性。一般的，功能等同变异体的编码序列是同源的，因此，由至少一种改变(如蛋白质的编码序列中一个或多个碱基的缺失、插入或取代或者蛋白质的氨基酸序列中有一个或多个氨基酸缺失、插入或取代)所得的多肽或蛋白一般具有功能上等同于所述蛋白质的活性。因此，由上述氨基酸序列组成的短肽，如果其构成的活性肽没有明显的功能差异，也包括在本研究的范围内。在具体实施例中，短肽具有如下结构式：在其中一个实施例中，活性肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。该活性肽的肽链较短，易于吸收和利用。上述活性肽含有Gly-Glu-Gly-Val-Phe-Gly-His，使得该活性肽能够有效地提高抗氧化酶的活性，且该活性肽无毒副作用，安全性较高。经试验验证，该活性肽能够延长N2野生型秀丽隐杆线虫的寿命，提高百草枯处理后的N2野生型秀丽隐杆线虫的超氧化歧化酶(SOD)的活性，降低百草枯处理后的N2野生型秀丽隐杆线虫的活性氧簇(ROS)和丙二醛(MDA)的含量，达到修复和治疗氧化性损伤的目的。同时，该活性肽能够直接参加蛋白质的合成，提高机体对蛋白质的利用率。此外，由于该活性肽具有能够提高抗氧化酶的活性、降低ROS和MDA的含量，能够用于制备提高抗氧化酶活性或含量的药物、降低丙二醇含量的药物或降低活性氧簇的药物中，并且能够用于制备预防或治疗氧化性损伤的药物中，还能够应用于食品、保健品或化妆品中。其中，超氧化物歧化酶是生物体内重要的抗氧化酶，具有特殊的生理活性，是生物体内清除自由基的首要物质。ROS是生物有氧代谢过程中的一种副产品，包括氧离子、过氧化物和含氧自由基等。细胞中存在过多的ROS能够导致细胞快速凋亡。丙二醛能够引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，且具有细胞毒性，丙二醛是膜脂过氧化最重要的产物之一，能够加剧膜的损伤。一实施方式的食品包括上述活性肽。上述活性肽作为食用添加剂，以增强食品的抗氧化性，以达到保健功能，同时，上述活性肽能够给机体补充所需的蛋白和氨基酸。在其中一个实施例中，食品为片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂、溶液剂、混悬剂或气雾剂。在其中一个实施例中，食品中活性肽的质量百分含量为5％～10％。一实施方式的保健品包本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种活性肽，其特征在于，所述活性肽含有氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的短肽。

【技术特征摘要】
1.一种活性肽，其特征在于，所述活性肽含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的短肽。2.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求1所述短肽的编码序列。3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于，所述编码序列如SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；或所述编码序列为与SEQIDNo.2所示核苷酸序列具有75％同源性的核苷酸序列；或所述编码序列为由SEQIDNo.2所示核苷酸序列中一个或多个碱基被缺失、替代或增加得到的核苷酸序列。4.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有编码权利要求1所述活性肽的核苷酸；或者，所述重组细胞含有权利要求2～3任一项所述的重组载体。5.一种抗氧化组合物，其特征在于，包括活性组分，所述活性组分包括权利要求1所述的活性肽。6.权利要求1所述的活性肽、权利要求2～...

【专利技术属性】
技术研发人员：单凯，王怀玲，刘杰，
申请(专利权)人：深圳凯联健康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44