一种酿酒酵母菌株KSA01及其用途制造技术

本发明专利技术提供了一种酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)菌株KSA01及其用途，所述酿酒酵母菌菌株KSA01是从构树叶或桑树叶的青贮发酵物中分离得到，已经保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.13989，所述酿酒酵母菌菌株KSA01在改善动物胃肠道、促生长、提高免疫力、生产性能方面具有显著的优势，且同时具有安全高效、无残留、无毒副作用的特点，可作为饲用抗生素的替代品。

A Saccharomyces cerevisiae strain KSA01 and its application

The present invention provides a Saccharomyces cerevisiae strain KSA01 and its application. The Saccharomyces cerevisiae strain KSA01 is isolated from silage fermentation of Broussonetia leaf or mulberry leaf and has been stored in the General Microbial Center of China Council for the Preservation of Microbial Species. The preservation number is CGMCC No. 13989. The Saccharomyces cerevisiae strain KSA01 is used to improve animals. Gastrointestinal tract, growth promotion, immunity enhancement and production performance have significant advantages, and at the same time, it has the characteristics of safety, high efficiency, no residual, non-toxic side effects. It can be used as a substitute for feeding antibiotics.

【技术实现步骤摘要】
一种酿酒酵母菌株KSA01及其用途
本专利技术属于微生物领域，具体涉及一种酿酒酵母菌株KSA01及其用途。
技术介绍
我国养殖业发展迅速，生产规模不断扩大，畜禽产品总量大幅增加。然而在养殖过程中，畜禽经消化道感染或经外物传染的病毒性、细菌性疾病和肠道疾病爆发频率增加，而大规模的养殖更是增大了疫情爆发扩散的风险，严重制约了养殖业的健康发展。为了畜禽养殖业的健康发展，人们通常选择在畜禽饲料中添加抗生素，提高畜禽的抗病力、改善生产性能和防治畜禽疾病。但随着抗生素长期广泛的在畜禽养殖中乱用和滥用，不仅导致了严重的病原菌耐药性和可抗药基因转移问题，引起人和动物机体免疫力下降、二次用药量增加、双重和内源性感染、致敏等一系列问题，而且还造成了药物残留等公共卫生隐疾。由抗生素乱用和滥用引发的动物源性食品安全隐患备受消费者关注和重视，尤其在生猪养殖产业中，抗生素的滥用降低了生猪产品的品质，无法满足人们对绿色食品的需求，严重影响了生猪产品的出口。因此，研制和应用无毒无公害的新型绿色饲料添加剂，部分或完全替代抗生素在饲料添加剂及畜禽疾病防治中的应用已成为当前饲料学科及兽医学工作的一项重要内容。大量试验表明，在单胃动物或反刍动物饲料中添加酿酒酵母或其培养物，具有改善动物的胃肠道环境、提高动物的生产能力和免疫力的作用。酵母菌作为一种真核单细胞微生物，具有繁殖快、培养条件简单、不产生毒素等一系列优点，因此，将其开发出具有单细胞蛋白且能增强畜禽免疫力的双重功能饲料具有更广阔的应用前景。为此，本专利技术提供一株酿酒酵母，能够提高畜禽的抗病力、改善生产性能和防治畜禽疾病，可以有效替代饲用抗生素。
技术实现思路
因此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种酿酒酵母菌株KSA01及其用途。为此，本专利技术提供了一种酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)菌株KSA01，从构树叶或桑树叶的青贮发酵物中分离得到。所述的酿酒酵母菌株KSA01，于2017年4年7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCCNo.13989。本专利技术提供了一种含有所述的酿酒酵母菌株KSA01的菌剂。本专利技术提供了一种制备所述的酿酒酵母菌株KSA01的菌剂的方法，将所述的酿酒酵母菌株KSA01进行液体发酵培养，取发酵液即得。所述的方法，包括如下步骤：(1)将所述的酿酒酵母菌株KSA01依次在斜面固体培养基、液体培养基中培养活化，得到活化的所述的酿酒酵母菌株KSA01的菌液，备用；(2)将步骤(1)中的菌液接种到种子培养基中进行扩大培养，得到扩大培养液；(3)取步骤(2)中获得的扩大培养液接种到液体发酵培养基中发酵，即得。所述的方法，在所述步骤(1)中，将所述的酿酒酵母菌株KSA01接种到斜面固体培养基上，在28-32℃下培养36-60小时，然后将酿酒酵母菌株KSA01从所述固体斜面培养基上转接到所述液体培养基中，在28-32℃、160-220转/分钟下摇床培养15-25小时。所述的方法，在所述步骤(2)中，将所述的菌液按体积百分比0.5-1.5％的接种量接种到液体种子培养基中，在28-32℃、160-220转/分钟下摇床培养16-20小时，获得一级液体种子培养液，将所述一级液体种子培养物按体积百分比0.5-1.5％的接种量接种到液体种子培养基中，在培养温度28-32℃、搅拌速度200-400转/分钟下培养16-20小时，控制溶氧≥20％，获得二级液体种子培养液，即得所述扩大培养液。所述的方法，在所述步骤(3)中，将所述的扩大培养液按体积百分比8-12％的接种量接种到发酵培养基中，发酵温度28-32℃，控制pH为4.9-5.1，控制溶氧≥20％，在搅拌速度200-400转/分钟下培养22-26小时。所述的方法，每升所述种子培养基的组分包括：酵母粉3-7g，蛋白胨3-7g，质量浓度为85％的浓磷酸1ml，总糖18-22g，其余为水；每升发酵培养基的组分包括：酪蛋白胨1-2g，酵母浸粉2-3g，葡萄糖2-4g，磷酸二氢钾0.2-0.3g，磷酸氢二钾1-2g，其余为水。所述的酿酒酵母菌株KSA01或所述的酿酒酵母菌株KSA01的菌剂在制备饲料或饲料添加剂中的用途。本专利技术提供了一种含有所述的酿酒酵母菌株KSA01或所述的酿酒酵母菌株KSA01的菌剂的微生态制剂。本专利技术提供了一种含有所述的酿酒酵母菌株KSA01或所述的酿酒酵母菌株KSA01的菌剂的饲料。本专利技术技术方案，具有如下优点：1.本专利技术提供的一种酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)菌株KSA01，从构树叶或桑树叶的青贮发酵物中分离得到的酿酒酵母菌株KSA01在改善动物胃肠道、促生长、提高免疫力方面具有显著的优势，且同时具有安全高效、无残留、无毒副作用的特点，可替代饲用抗生素。2.本专利技术提供的含有所述的酿酒酵母菌株KSA01的菌剂，可用于动物饲料，调节动物免疫力，增强动物的抗病力，提高动物的体质，改善生产性能，如用于猪饲料中，实验证明，相比使用添加抗生素的饲料或添加普通的酿酒酵母的饲料饲喂仔猪和育肥猪，添加本专利技术所述的酿酒酵母菌株KSA01的菌剂的饲料饲喂仔猪和育肥猪可以显著地提高仔猪和育肥猪的平均日增重，降低腹泻率和死淘率，提高饲料利用率。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例1中酿酒酵母菌株KSA01的菌落照片图；图2是本专利技术实施例1中酿酒酵母菌株KSA01的显微镜下照片图；图3是本专利技术实施例1中酿酒酵母菌株KSA0126SrDNA的PCR产物电泳图；图4是本专利技术实施例1中酿酒酵母菌株KSA01DNA序列与GenBank中报道的酿酒酵母序列同源性比较；其中U44806为GenBank中收录的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)26SrDNA的基因序列，KSA01为本专利技术菌株的26SrDNA基因序列；图5是本专利技术实验例1中酿酒酵母菌株KSA01的生长曲线图；图6是本专利技术实验例2中酿酒酵母菌株KSA01的发酵菌体破碎物稀释倍数与猪外周血单个核细胞的增殖指数关系的柱状图。具体实施方式下述实施例中每100mL的YPD液体培养基包括如下组分：蛋白胨2g，酵母提取物1g，葡萄糖2g，余量为蒸馏水；按照上述配方称取各组分并混合，121℃灭菌15min，控制pH为7.0，即得。YPD固体培养基为在每100mL的YPD液体培养基配方的基础上添加琼脂粉2g,121℃灭菌15min，控制pH为7.0，即得。实施例1酿酒酵母菌株KSA01的分离和筛选本实施例所述的酿酒酵母菌株KSA01的分离和筛选，包括如下步骤：1、桑树叶或构树叶青贮发酵物的制备：取新鲜构树叶或桑树叶(购自康盛京构(北京)科技有限公司)粉碎，装填入窖，每填入一层，进行压实，窖填装满后，窖体顶面用塑料膜密封，密封后，塑料膜表面覆盖30～50厘米厚的土，在25℃～30℃下，发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)菌株KSA01，其特征在于，所述的酿酒酵母菌菌株KSA01从构树叶或桑树叶的青贮发酵物中分离得到。

【技术特征摘要】
1.一种酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)菌株KSA01，其特征在于，所述的酿酒酵母菌菌株KSA01从构树叶或桑树叶的青贮发酵物中分离得到。2.根据权利要求1所述的酿酒酵母菌菌株KSA01，其特征在于，所述的酿酒酵母菌菌株KSA01保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.13989。3.一种含有权利要求1或2所述的酿酒酵母菌菌株KSA01的菌剂。4.一种制备权利要求3所述的酿酒酵母菌菌株KSA01的菌剂的方法，其特征在于，将权利要求1或2所述的酿酒酵母菌菌株KSA01进行液体发酵培养，取发酵液即得。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将所述的酿酒酵母菌菌株KSA01依次在斜面固体培养基、液体培养基中培养活化，得到含有活化的所述的酿酒酵母菌菌株KSA01的菌液，备用；(2)将步骤(1)中的菌液接种到种子培养基中进行扩大培养，得到扩大培养液；(3)取步骤(2)中获得的扩大培养液接种到液体发酵培养基中发酵，即得。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，(1)将所述的酿酒酵母菌菌株KSA01接种到斜面固体培养基上，在28-32℃下培养36-60小时，然后将酿酒酵母菌菌株KSA01从所述固体斜面培养基上转接到所述液体培养基中，在28-32℃、160-220转/分钟下摇床培养15-25小时；(2)将步骤(1)中的菌液按体积...

【专利技术属性】
技术研发人员：纪刚，
申请(专利权)人：康盛中科北京技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11