一种鼠胆酸的制备方法技术

本发明专利技术涉及药物合成技术领域，尤其是涉及一种鼠胆酸的制备方法。所述鼠胆酸的制备方法，以3α，6α‑二羟基‑5β‑胆烷酸为原料经烷基酯化，6位、3位选择性氧化，溴化反应，取代反应，6位还原，水解得到鼠胆酸。本发明专利技术通过上述合成路线制备得到鼠胆酸，即3α，6β，7β‑三羟基‑5α‑胆烷酸，原料来源广泛，供应充足；并且，经过上述步骤得到的鼠胆酸的产率高，可达24.5％，适合大量制备，可为后续的相关研究提供数据支持及参考。

A preparation method of rat cholic acid

The invention relates to the technical field of drug synthesis, in particular to a preparation method of rat cholic acid. The preparation method of rat cholic acid is described. The rat cholic acid is prepared by alkyl esterification, selective oxidation at 6 and 3 positions, bromination reaction, substitution reaction, reduction at 6 positions and hydrolysis from 3 alpha, 6 alpha dihydroxy 5 beta cholic acid. The invention obtains rat cholic acid, namely 3a, 6beta, 7beta trihydroxy 5A cholic acid, by the above synthetic route, which has a wide source of raw materials and sufficient supply; moreover, the yield of rat cholic acid obtained by the above steps is high, reaching 24

【技术实现步骤摘要】
一种鼠胆酸的制备方法
本专利技术涉及药物合成
，尤其是涉及一种鼠胆酸的制备方法。
技术介绍
胆汁酸是与无数生物学功能相关的重要内源性分子，包括胆固醇的吸收和排泄，在脂肪代谢中起到重要作用。疏水性胆汁酸的肝内积聚诱导细胞损伤,并且可导致各种疾病，例如肝炎和黄疸。通过细胞色素P450(CYP)酶对疏水性胆汁酸的羟基化被认为是防止胆汁酸毒性的防御机制。鼠胆酸(Muricholicacid，MCA)是重要的胆汁酸，主要存在三种不同的构型分别为α-鼠胆酸(α-Muricholicacid)、β-鼠胆酸(β-Muricholicacid)、ω-鼠胆酸(ω-Muricholicacid)，其结构如图1所示。鼠胆酸是这种解毒机制中潜在的一种代谢物，并且经过不断研究发现鼠胆酸在研究大鼠胆汁的代谢及肝移植术中有着广泛的应用，并且鼠胆酸的钠盐是肝脏释放的胆汁酸盐，通常多用于胆石病的研究。MichaelB.Francis发现鼠胆酸抑制艰难梭菌孢子的萌发和生长，可能对艰难梭菌感染的小鼠模型中的艰难梭菌毒力具有影响，可以为由艰难梭菌引起的感染类疾病的动物模型建立提供了参考和依据，进一步来解决由艰难梭菌引起的感染类疾病问题。鼠胆酸还是一种保肝剂，对慢性胆汁淤积性肝病有益，同时尿液中的牛磺酸-β-鼠胆酸被鉴定为有希望的生物标志物，以促进中药何首乌(PMR)诱导的肝毒性的临床监测，并且可以作为潜在的治疗靶标。然而，由于大多数CYP产生多种羟基化产物，因此在不知道它们的化学成分和组成的情况下，难以表征这些代谢物，因此，需要合成这些胆汁酸来进一步了解胆汁酸的生物动力学，并且对这种转化的了解可以促进胆汁淤积药物的开发，进一步调节胆汁酸积累。另外为后续的其他研究提供标样。目前，鼠胆酸的制备主要通过从动物胆汁提取和人工合成两种方法获得。以动物胆汁为来源，多从鼠胆汁中来提取，但鼠胆来源有限，提取麻烦，所以来源受限。人工合成主要通过鹅去氧胆酸经过一系列的转化得到的。20世纪90年代左右，鼠胆酸的合成主要通过鹅去氧胆酸甲酯，经氧化，亲电取代，还原，水解一系列转化得到的。但鹅去氧胆酸原料的来源较困难，工艺难度高，不适合大量生产，因此导致了鼠胆酸的工艺成本升高，价格昂贵。因此发现一种新途径，新方法来合成鼠胆酸解决其来源问题是迫切需要的。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鼠胆酸的制备方法，以猪去氧胆酸(3α，6α-二羟基-5β-胆烷酸)作为原料，来源广泛，价格低廉，并且合成路线各步骤条件温和，收率高，适合大量制备，解决了现有技术中存在的鼠胆酸合成工艺复杂、成本高的技术问题。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：一种鼠胆酸的制备方法，包括如下步骤：以3α，6α-二羟基-5β-胆烷酸为原料经如下反应制备得到鼠胆酸；，其中R为烷基。优选的，R包括甲基、乙基、异丙基等低脂肪链中的任一种，优选为甲基。以3α，6α-二羟基-5β-胆烷酸(A)为原料经烷基酯化得到3α,6α-二羟基-5β-胆烷酸烷基酯(B)，3α,6α-二羟基-5β-胆烷酸烷基酯(B)6位选择性氧化得到3α-羟基-6-酮-5β-胆烷酸烷基酯(C)，3α-羟基-6-酮-5β-胆烷酸烷基酯(C)的3位选择性氧化得到3α-乙酰基-6-酮-5β-胆烷酸烷基酯(D)，3α-乙酰基-6-酮-5β-胆烷酸烷基酯(D)进行溴化反应得到3α-乙酰基-7α-溴-6-酮-5α-胆烷酸烷基酯(E)，3α-乙酰基-7α-溴-6-酮-5α-胆烷酸烷基酯(E)的7位进行取代反应得到3α-乙酰基-7β-羟基-6-酮-5α-胆烷酸烷基酯(F)，3α-乙酰基-7β-羟基-6-酮-5α-胆烷酸烷基酯(F)的6位还原得到6β,7β-二羟基-3α-乙酰氧基-5α-胆烷酸烷基酯(G)，6α，7α-二羟基-3α-乙酰氧基-5α-胆烷酸烷基酯(G)水解得到鼠胆酸(H)。本专利技术通过上述合成路线制备得到鼠胆酸，即3α，6β，7β-三羟基-5α-胆烷酸，原料来源广泛，供应充足；并且，经过上述步骤得到的鼠胆酸的产率高，可达24.5％，适合大量制备，可为后续的相关研究提供数据支持及参考。优选的，步骤(a)包括：在催化剂作用下，化合物A与醇在60-70℃进行酯化反应得到化合物B。优选与甲醇在上述条件下进行酯化反应。反应温度在上述范围内均可，可根据实际需求进行调整，如反应温度可以为60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃、66℃、67℃、68℃、69℃、70℃等等。可根据酯化反应进度调节反应时间，优选反应时间为3-6h，使酯化反应完全，如可以为3h、3.5h、4h、4.5h、5h、5.5h、6h等等。催化剂包括浓盐酸、浓硫酸、对甲苯磺酸一水合物中的任一种或多种，优选浓盐酸。优选的，化合物A、甲醇和催化剂的质量比为1﹕(5-15)﹕(0.5-1)。在这一范围内能够保证化合物A顺利甲酯化，如在不同实施方式中，化合物A和甲醇的质量比可以为1﹕5、1﹕6、1﹕7、1﹕8、1﹕9、1﹕10、1﹕11、1﹕12、1﹕13、1﹕14、1﹕15等等；化合物A和催化剂的质量比可以为1﹕0.5、1﹕0.6、1﹕0.7、1﹕0.8、1﹕0.9、1﹕1等等。优选的，将步骤(a)反应后的反应液进行提纯，得到化合物B。优选的，化合物B的提纯的方法包括：反应结束后，将步骤(a)的反应液冷却至室温，除去醇，加入乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，干燥，除去溶剂，得到化合物B。其中，乙酸乙酯的加入质量优选为原料化合物A的10-20倍。优选的，步骤(b)包括：化合物B、2-碘酰基苯甲酸和第一有机溶剂混合，回流反应，得到化合物C。可根据反应进度调节反应时间，优选反应时间为0.5-2h，使反应完全。第一有机溶剂优选为叔丁醇。优选将化合物B与叔丁醇预先混合，使化合物B溶解后，再加入2-碘酰基苯甲酸，升温至回流反应。优选的，化合物B和2-碘酰基苯甲酸的摩尔比为1﹕(1-3)，优选为1﹕(1.2-1.5)。如在不同实施方式中可以为1﹕1、1﹕1.2、1﹕1.5、1﹕2、1﹕2.5、1﹕3等等。优选的，化合物B和第一有机溶剂的质量比为1﹕(10-20)。可在该范围内进行调整。优选的，将步骤(b)反应后的反应液进行提纯，得到化合物C。更优选的，化合物C的提纯方法包括：反应结束后，将步骤(b)的反应液过滤，收集滤液，浓缩得到残余样品，用二氯甲烷溶解，依次用质量分数为10％的NaHSO3(3×25mL)溶液和饱和食盐水(3×25mL)洗涤，收集有机相，干燥，柱层析分离，得到化合物C。进一步优选的，柱层析分离的洗脱液为乙酸乙酯和石油醚，乙酸乙酯和石油醚的体积比为1﹕6-1﹕2。优选的，步骤(c)包括：化合物C溶解于第二有机溶剂中，加入4-二甲氨基吡啶、三乙胺、乙酸酐，室温反应1-5h，得到化合物D。更优选的，将反应后的反应液加入水中，调节pH为6-7，分液收集有机相，得到化合物D。第二有机溶剂优选乙酸乙酯。其中，可采用浓度为0.1-2M的盐酸调节pH。优选的，化合物C、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、乙酸酐的摩尔比为1﹕(0.1-0.5)﹕(1.5-3)﹕(2-3.5)。其中，化合物C与乙酸酐的摩尔比优选为1﹕(2.5-3.3)。优选的，化合物C和第二本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鼠胆酸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以3α，6α‑二羟基‑5β‑胆烷酸为原料经如下反应制备得到鼠胆酸；

【技术特征摘要】
1.一种鼠胆酸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以3α，6α-二羟基-5β-胆烷酸为原料经如下反应制备得到鼠胆酸；其中R为烷基。2.根据权利要求1所述的鼠胆酸的制备方法，其特征在于，所述R包括甲基、乙基、异丙基中的任一种；优选的，所述R为甲基；优选的，步骤(a)包括：在催化剂作用下，化合物A与醇在60-70℃进行酯化反应得到化合物B；更优选的，所述醇包括甲醇和乙醇中的任一种；更优选的，所述化合物A、所述甲醇和所述催化剂的质量比为1﹕(5-15)﹕(0.5-1)；优选的，所述催化剂包括浓盐酸、浓硫酸、对甲苯磺酸一水合物中的任一种或多种；优选的，将所述步骤(a)反应后的反应液进行提纯，得到所述化合物B；优选的，所述化合物B的提纯的方法包括：反应结束后，除去步骤(a)的反应液中的醇，加入乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，干燥，除去溶剂，得到所述化合物B。3.根据权利要求1所述的鼠胆酸的制备方法，其特征在于，步骤(b)包括：化合物B、2-碘酰基苯甲酸和第一有机溶剂混合，回流反应，得到化合物C；优选的，所述第一有机溶剂包括叔丁醇；优选的，所述化合物B和所述2-碘酰基苯甲酸的摩尔比为1﹕(1-3)；优选的，所述化合物B和所述第一有机溶剂的质量比为1﹕(10-20)；优选的，将所述步骤(b)反应后的反应液进行提纯，得到所述化合物C；优选的，所述化合物C的提纯方法包括：反应结束后，将步骤(b)的反应液过滤，收集滤液，浓缩得到残余样品，用二氯甲烷溶解，用NaHSO3水溶液和饱和食盐水洗涤，收集有机相，干燥，柱层析分离，得到所述化合物C。4.根据权利要求1所述的鼠胆酸的制备方法，其特征在于，步骤(c)包括：化合物C溶解于第二有机溶剂中，加入4-二甲氨基吡啶、三乙胺、乙酸酐，室温反应1-5h，得到化合物D；优选的，将所述步骤(c)中反应后的反应液加入水中，调节pH为6-7，分液收集有机相，得到化合物D；优选的，所述第二有机溶剂包括乙酸乙酯；优选的，所述化合物C、所述4-二甲氨基吡啶、所述三乙胺、所述乙酸酐的摩尔比为1﹕(0.1-0.5)﹕(1.5-3)﹕(2-3.5)；优选的，所述化合物C和第二有机溶剂的质量比为1﹕(30-50)；优选的，将所述步骤(c)中分液收集的有机相进行提纯，得到所述化合物D；更优选的，所述化合物D的提纯方法包括：用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水溶液洗涤有机相，干燥，除去溶剂，得到化合物D。5.根据权利要求1所述的鼠胆酸的制备方法，其特征在于，步骤(d)包括：化合物D溶解于第三有机溶剂中，加入溴化铜，回...

【专利技术属性】
技术研发人员：张雷，李阳，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东,44