一种L-羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法技术

一种L‑羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法，属于菌接种技术领域。其特征在于：采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8g/L~10g/L，酵母粉：2 g/L~5g/L，氯化钠：8 g/L~10g/L。本发明专利技术用菌悬液菌种接种，减少了人力，物力，最大限度的保证菌种的活力，预防交叉污染，减少废液排放，满足车间扩大再生产。

A method of inoculating L-hydroxyproline bacterial suspension into pot

The invention relates to a method for inoculating L hydroxyproline bacterial suspension into a tank, belonging to the technical field of inoculation. The characteristics are as follows: inoculating bacterial suspension into shaking flask culture medium, the formula of shaking flask culture medium is: tryptone: 8g/L~10g/L, yeast powder: 2g/L~5g/L, sodium chloride: 8g/L~10g/L. The invention uses bacterial suspension inoculation, reduces manpower and material resources, maximizes the vitality of bacteria, prevents cross-contamination, reduces waste liquid discharge, and meets the expansion of reproduction in workshop.

【技术实现步骤摘要】
一种L-羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法
一种L-羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法，属于菌接种

技术介绍
L-羟基脯氨酸或羟脯氨酸，主要存在于动物的胶原蛋白中，含量可达10%左右，其作用是加强结缔组织的弹性和韧性。在食品添加剂领域，由于羟脯氨酸具有呈苦味中的独特甜味，能改善果汁饮料风味，而且还具有皮肤修复功能，常作为饮料添加剂。在化妆品添加剂领域，由于羟脯氨酸具有抗氧化、抗辐射的作用，可消除氧化剂以及调整细胞的氧化还原状态的潜在效果，以期保养皮肤和延缓衰老，是化妆品的重要添加剂。在医药领域，由于羟脯氨酸存在两个手性中心，易于衍生化，药理活性多样，用于合成新一代培南类抗生素，还应用于多种新创新制药物的合成，既可作为各种软组织疾病的药物，如结缔组织受损、风湿性关节炎等；又可加快伤口愈合以及治疗各种皮肤疾病。可见，羟脯氨酸广泛应用于食品添加剂、化妆品和药物中间体。L-羟脯氨酸菌的传统接种方法为采用冻存管菌种传接斜面经12h培养后，再用斜面菌种接多个摇瓶培养液培养8~10h，检测od值，得进罐摇瓶培养液菌种，这期间菌种制备周期较长，不仅如此，还增加了废液的排放，加大了人力物力和交叉污染的机会。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供一种操作简单、废液排放少、避免交叉污染的L-羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：该L-羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法，其特征在于：采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8g/L~10g/L，酵母粉：2g/L~5g/L，氯化钠：8g/L~10g/L。本专利技术采用菌悬液进罐接种方式接种L-羟脯氨酸菌，主要的提供一种L-羟脯氨酸菌适合菌悬液进罐接种方式的摇瓶培养液配方，在本配方下能最大限度的保证L-羟脯氨酸菌的菌种活力，提高产品产量。优选的，所述菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液时菌种采用压力差注入法接种。优选的，所述的压力差注入法接种具体为提高发酵罐内气压至0.067MPa~0.073MPa，待气泡停止溢入，再把发酵罐内气压降低至0.024MPa~0.026MPa，摇瓶内的菌悬液开始压入发酵罐内，反复上述升压、降压过程3~5次。优选的压力差注入法接种工艺下，接入更加方便安全，L-羟脯氨酸菌的菌种活力更好。优选的，所述的摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8.5g/L~9.5g/L，酵母粉：3g/L~4g/L，氯化钠：8.7g/L~9.4g/L。优选的，所述的摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8.7g/L~9.2g/L，酵母粉：3.4g/L~3.6g/L，氯化钠：8.9g/L~9.2g/L。原进罐接种是采用冻存管传接斜面培养基后经培养12h制得斜面菌种，用斜面菌种接摇瓶培养基得需要培养12h左右，才制得摇瓶培养液，这期间最少要经历12h的时间才能接种进罐，不仅如此，还增加了废液的排放，大量的人力物力和交叉污染的机会。本专利技术采用了由菌悬液（冻存液）直接接种进罐，此方法操作简单，更重要的是减少废液的排放和交叉污染，有利于车间扩大生产。与现有技术相比，本专利技术的所具有的有益效果是：本专利技术用菌悬液菌种接种，减少了人力，物力，最大限度的保证菌种的活力，预防交叉污染，减少废液排放，满足车间扩大再生产。对比本专利技术与摇瓶培养液菌种两种不同接种方法接种，相同培养基并培养条件相同的情况下，本专利技术的菌悬液直接接种耗时少，操作简单，更主要的是最大限度的保证菌种的活力，减少每批次污染机会，提高生产效率。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步说明，其中实施例1为最佳实施。实施例1采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，提高发酵罐内气压至0.069MPa，待气泡停止溢入，再把发酵罐内气压降低至0.025MPa，摇瓶内的菌悬液开始压入发酵罐内，反复升压、降压4次；摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8.7g/L，酵母粉：3.6g/L，氯化钠：8.9g/L。保存周期200d。实施例2采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，提高发酵罐内气压至0.068MPa，待气泡停止溢入，再把发酵罐内气压降低至0.025MPa，摇瓶内的菌悬液开始压入发酵罐内，反复升压、降压4次；摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：9.2g/L，酵母粉：3.4g/L，氯化钠：9.2g/L。保存周期200d。实施例3采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，提高发酵罐内气压至0.070MPa，待气泡停止溢入，再把发酵罐内气压降低至0.025MPa，摇瓶内的菌悬液开始压入发酵罐内，反复升压、降压5次；摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：9.5g/L，酵母粉：3g/L，氯化钠：9.4g/L。保存周期195d。实施例4采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，提高发酵罐内气压至0.071MPa，待气泡停止溢入，再把发酵罐内气压降低至0.024MPa，摇瓶内的菌悬液开始压入发酵罐内，反复升压、降压3~5次；摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8.5g/L，酵母粉：4g/L，氯化钠：8.7g/L。保存周期195d。实施例5采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，提高发酵罐内气压至0.073MPa，待气泡停止溢入，再把发酵罐内气压降低至0.025MPa，摇瓶内的菌悬液开始压入发酵罐内，反复升压、降压3~5次；摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8g/L，酵母粉：5g/L，氯化钠：8g/L。保存周期182d。实施例6采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，提高发酵罐内气压至0.067MPa，待气泡停止溢入，再把发酵罐内气压降低至0.26MPa，摇瓶内的菌悬液开始压入发酵罐内，反复升压、降压3~5次；摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：10g/L，酵母粉：2g/L，氯化钠：10g/L。保存周期182d。本专利技术与摇瓶培养液进罐接种两种接种方法对比检测说明，对比内容及数据如下表：。以上所述，仅是本专利技术的较佳实施例而已，并非是对本专利技术作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的
技术实现思路
加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本专利技术技术方案内容，依据本专利技术的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本专利技术技术方案的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种L‑羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法，其特征在于：采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8g/L ~10g/L，酵母粉：2 g/L ~5g/L，氯化钠：8 g/L ~10g/L。

【技术特征摘要】
1.一种L-羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法，其特征在于：采用菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液，摇瓶培养液的配方为：胰蛋白胨：8g/L~10g/L，酵母粉：2g/L~5g/L，氯化钠：8g/L~10g/L。2.根据权利要求1所述的一种L-羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法，其特征在于：所述菌悬液进罐接种接入摇瓶培养液时菌种采用压力差注入法接种。3.根据权利要求2所述的一种L-羟脯氨酸菌悬液进罐接种方法，其特征在于：所述的压力差注入法接种具体为提高发酵罐内气压至0.067MPa~0.073MPa，待气泡停止溢入，再把发酵罐内气压...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏哲，赵丽，蒲刚，李松，
申请(专利权)人：山东金洋药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37