新型杉树花粉蛋白制造技术

本发明专利技术提供一种新型的杉树花粉蛋白以及使用其的以杉树花粉为原因的过敏性疾病的诊断药、预防药和治疗药等。该杉树花粉蛋白选自以下的(a)～(c)：(a)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)包含在序列号2所示的氨基酸序列中1个或多个氨基酸被取代、缺失或添加而成的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质；(c)包含与序列号2所示的氨基酸序列具有90％以上的同一性的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质。

A New Pollen Protein from Cunninghamia lanceolata

The invention provides a novel Chinese fir pollen protein and diagnostic, preventive and therapeutic drugs for allergic diseases caused by Chinese fir pollen. The Chinese fir pollen proteins are selected from (a)~ (c): (a) proteins containing amino acid sequences shown in sequence 2; (b) proteins containing amino acid sequences substituted, deleted or added by one or more amino acids in sequence 2 and having allergen activity of Chinese fir pollen; (c) proteins containing more than 90% of the same amino acid sequences as those shown in sequence 2. A single amino acid sequence with allergen activity in Chinese fir pollen.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型杉树花粉蛋白
本专利技术涉及一种来自杉树花粉的新型的蛋白质和该蛋白质的应用。
技术介绍
花粉症因吸入空气中飞散的花粉而发病，是表现出眼睛发痒或疼痛等的过敏性结膜炎、鼻炎、皮肤的炎症或哮喘等症状的过敏性疾病。作为花粉症的原因的植物已知有很多，但在日本最多的花粉症是杉树(スギ、柳杉)花粉症(以杉树花粉为原因的过敏性疾病)。在2003年的报告中，推定杉树花粉症的发病率在2001年时为19.4％(非专利文献1)，推定至少2000万人以上受杉树花粉症折磨，称之为国民病也不为过。有关杉树花粉症的更严重的问题之一，可以列举杉树花粉飞散量的逐年增加。已知杉树花粉的飞散量与花粉飞散期前一年的夏季的平均气温正相关，已有报告称，随着日本的平均气温的上升，杉树花粉飞散量逐年增加(非专利文献2)。随之，也容易想到今后杉树花粉症患者的增加，有损害日本国民的健康的危险。实际上已经有报告，根据使用了38份报告的元分析(meta-analysis)的结果，从1980年至2000年期间杉树花粉症发病率已上升到2.6倍(非专利文献3)。在这些杉树花粉症的治疗中，已使用了以抗组胺药等的使用为代表的一系列的对症疗法，作为能够期待杉树花粉症的根治的唯一的治疗方法，过敏原免疫疗法(减敏疗法)受到了期待。这是通过将作为过敏性疾病的原因的过敏原经皮下或舌下等投予而期待缓解过敏症状的治疗方法。在这些过敏原免疫疗法的开发或其治疗效果的提高过程中，确定原因过敏原及对其的理解不可或缺。作为与杉树花粉症的发病相关联的主要的杉树花粉过敏原，迄今为止已报告了Cryj1、Cryj2、Cryj3(非专利文献4、5和6)，特别是Cryj1和Cryj2，已开发了以它们为主要成分的标准化杉树花粉提取物(非专利文献7)，在日本已经能够实施对杉树花粉症的过敏原免疫疗法。然而，也存在过敏原免疫疗法无法奏效的患者群。已暗示了杉树花粉中还存在未被鉴定的新型过敏原(非专利文献8)，要求有效性更高的以杉树花粉症的免疫疗法为目的的特征性新型过敏原蛋白。现有技术文献专利文献非专利文献1：OkudaM，AnnAllergyAsthmaImmunol.，91:288-296，2003非专利文献2：YamadaT,etal.,JAllergyClinImmunol.,133:632-639,2014非专利文献3：KanekoY,etal.,IntArchAllergyImmunol.,136:365-371,2005非专利文献4：YasuedaH,etal.,J.AllergyClin.Immunol.,71:77-86,1983非专利文献5：SakaguchiM,etal.,Allergy,45:309-312,1990非专利文献6：FujimuraT,etal.,Allergy,62:547-553,2007非专利文献7：YasuedaH,etal.,Allergol.Int.,46:135-140,1997非专利文献8：FujimuraT,etal.,IntArchAllergyImmunol.,133:125-135,2004
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术提供一种新型的杉树花粉蛋白以及使用其的以杉树花粉为原因的过敏性疾病的诊断药、预防药和治疗药等。用于解决课题的技术方案本专利技术的专利技术人为了解决上述的课题，进行了研究，从杉树花粉粗抗原中发现了与来自杉树花粉症患者的淋巴球和血清中IgE显示高的反应性的新的蛋白质，并且发现其作为以杉树花粉为原因的过敏性疾病的诊断药、预防药或治疗药是有效的。即，本专利技术涉及以下的1)～13)。1)一种选自以下的(a)～(c)的杉树花粉蛋白。(a)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)包含在序列号2所示的氨基酸序列中1个或多个氨基酸被取代、缺失或添加而成的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质；(c)包含与序列号2所示的氨基酸序列具有90％以上的同一性的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质。2)一种编码选自以下的(a)～(c)的杉树花粉蛋白的多核苷酸。(a)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)包含在序列号2所示的氨基酸序列中1个或多个氨基酸被取代、缺失或添加而成的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质；(c)包含与序列号2所示的氨基酸序列具有90％以上的同一性的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质。3)一种选自以下的(d)～(f)的多核苷酸。(d)包含序列号1所示的碱基序列的多核苷酸；(e)与包含与序列号1所示的碱基序列互补的碱基序列的多核苷酸在严格的条件下杂交且编码具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质的多核苷酸；(f)包含与序列号1所示的碱基序列具有90％以上的同一性的碱基序列且编码具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质的多核苷酸。4)一种以上述1)的杉树花粉蛋白为有效成分的以杉树花粉为原因的过敏性疾病的预防或治疗剂。5)一种以上述1)的杉树花粉蛋白为有效成分的以杉树花粉为原因的过敏性疾病的诊断药。6)一种上述1)的杉树花粉蛋白的抗体。7)如上述6)的杉树花粉蛋白的抗体，其为单克隆抗体。8)上述1)的杉树花粉蛋白在制造以杉树花粉为原因的过敏性疾病的预防或治疗剂中的用途。9)上述1)的杉树花粉蛋白在制造以杉树花粉为原因的过敏性疾病的诊断药中的用途。10)如上述1)的杉树花粉蛋白，其用于预防或治疗以杉树花粉为原因的过敏性疾病。11)如上述1)的杉树花粉蛋白，其用于诊断以杉树花粉为原因的过敏性疾病。12)一种以杉树花粉为原因的过敏性疾病的预防或治疗方法，其特征在于，向患者投予上述1)的杉树花粉蛋白。13)一种以杉树花粉为原因的过敏性疾病的诊断方法，其特征在于，向患者投予上述1)的杉树花粉蛋白。专利技术效果本专利技术的杉树花粉蛋白能够应用于以杉树花粉为原因的过敏性疾病的诊断药、预防药和治疗药等。该杉树花粉蛋白包含与Cryj1、Cryj2、其他已知杉树花粉蛋白没有相同性的氨基酸一次序列，因此，通过与它们组合，能够进行更有效的减敏治疗。附图说明图1是利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对精制后的重组杉树花粉蛋白进行分析而得到的图。图2是表示使用4名杉树花粉症患者(ImmunoCAPScore≥2)的末梢血单核细胞对因添加精制重组蛋白而发生的增殖反应进行测定而得到的结果的图。图3是表示流式细胞仪的结果的图，该结果显示了13名杉树花粉症患者(ImmunoCAPScore≥2)的末梢血中的嗜碱性粒细胞被精制重组蛋白活化而增强了CD203c的表达，另一方面显示了在2名健康者(ImmunoCAPScore＜2)的末梢血中的嗜碱性粒细胞中CD203c的表达没有发生变化。具体实施方式杉树花粉蛋白本专利技术的杉树花粉蛋白是选自以下的(a)～(c)的蛋白质。(a)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)包含在序列号2所示的氨基酸序列中1个或多个氨基酸被取代、缺失或添加而成的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质；(c)包含与序列号2所示的氨基酸序列具有90％以上的同一性的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质。本专利技术的杉树花粉蛋白只要具有杉树花粉过敏原活性，则包括包含在该序列号2所示的氨基酸序列中1个或多个氨基酸被取代、缺失或添加而成的氨基酸序本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种选自以下的(a)～(c)的杉树花粉蛋白：(a)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)包含在序列号2所示的氨基酸序列中1个或多个氨基酸被取代、缺失或添加而成的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质；(c)包含与序列号2所示的氨基酸序列具有90％以上的同一性的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.21 JP 2016-1223181.一种选自以下的(a)～(c)的杉树花粉蛋白：(a)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)包含在序列号2所示的氨基酸序列中1个或多个氨基酸被取代、缺失或添加而成的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质；(c)包含与序列号2所示的氨基酸序列具有90％以上的同一性的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质。2.一种编码选自以下的(a)～(c)的杉树花粉蛋白的多核苷酸：(a)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)包含在序列号2所示的氨基酸序列中1个或多个氨基酸被取代、缺失或添加而成的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质；(c)包含与序列号2所示的氨基酸序列具有90％以上的同一性的氨基酸序列且具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质。3.一种选自以下的(d)～(f)的多核苷酸：(d)包含序列号1所示的碱基序列的多核苷酸；(e)与包含与序列号1所示的碱基序列互补的碱基序列的多核苷酸在严格的条件下杂交且编码具有杉树花粉过敏原活性的蛋白质的多核苷酸；(f)包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：长田年弘，田中悠喜，
申请(专利权)人：大鹏药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP