高亲和力B7-H6抗体和抗体片段制造技术

在一些实施方案中，本文提供了特异性结合B7同源物6的抗体、抗原结合抗体片段、嵌合抗原受体(CAR)和双特异性T细胞衔接物(BiTE)。本文还提供了使用其的方法和包含其的细胞。

High affinity B7-H6 antibody and antibody fragments

In some implementations, antibodies specifically binding to B7 homolog 6, antigen-binding antibody fragments, chimeric antigen receptors (CAR) and bispecific T-cell conjugates (BiTE) are provided. The method of using it and the cells containing it are also provided.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】高亲和力B7-H6抗体和抗体片段相关申请本申请依照35U.S.C.§119(e)要求2016年4月15日申请的美国临时申请号62/323,039的权益，所述申请以其整体通过引用并入本文。联邦资助的研究本专利技术在美国国立卫生研究院授予的P30GM103415下的政府支持进行。政府在本专利技术中具有某些权利。背景B7配体在许多不同细胞类型(包括抗原呈递细胞(APC))的细胞表面上表达。B7配体与T细胞上的受体分子的相互作用提供调节T细胞活化和耐受的活化信号或抑制性信号。一些抑制性B7配体也在肿瘤细胞上表达，导致免疫应答的抑制。刺激或减弱B7配体及其受体的相互作用对于自身免疫性疾病和癌症具有治疗潜能。B7同源物6(B7-H6)是NK细胞-活化受体NKp30的特异性配体。B7-H6在各种类型的原发性人类肿瘤(包括白血病、淋巴瘤和胃肠道间质瘤)上表达，但其不在正常组织上组成型表达。概述本文提供了特异性结合B7同源物6(B7-H6)的抗体和抗原结合抗体片段，并且在一些实施方案中，相对于先前可得的特异性结合B7-H6的抗体和抗原结合抗体片段具有更高的亲和力。此外，本公开的抗体和抗原结合抗体片段结合B7-H6的表位，其不同于先前可得的特异性结合B7-H6的抗体结合的表位。应当理解，除非另有说明，术语“抗体”涵盖结合抗原抗体片段。因此，如果一个实施方案涵盖具有特定特性的抗体，应当理解，相同的实施方案还涵盖具有相同特定特性的抗原结合抗体片段。特异性结合B7-H6的scFv分子的实例提供于图2和表2中。scFvg2.5-9的特征在于SEQIDNO:1-9，其中SEQIDNO:1是完整scFvg2.5-9氨基酸序列(包括重链和轻链)，SEQIDNO:2是完整scFvg2.5-9重链序列，SEQIDNO:3是完整scFvg2.5-9轻链序列，SEQIDNO:4是scFvg2.5-9重链的CDR1序列，SEQIDNO:5是scFvg2.5-9重链的CDR2序列，SEQIDNO:6是scFvg2.5-9重链的CDR3序列，SEQIDNO:7是scFvg2.5-9轻链的CDR1序列，SEQIDNO:8是scFvg2.5-9轻链的CDR2序列，且SEQIDNO:9是scFvg2.5-9轻链的CDR3序列。scFvg2.5-6的特征在于SEQIDNO:10-18，其中SEQIDNO:10是完整scFvg2.5-6氨基酸序列(包括重链和轻链)，SEQIDNO:11是完整scFvg2.5-6重链序列，SEQIDNO:12是完整scFvg2.5-6轻链序列，SEQIDNO:13是scFvg2.5-6重链的CDR1序列，SEQIDNO:14是scFvg2.5-6重链的CDR2序列，SEQIDNO:15是scFvg2.5-6重链的CDR3序列，SEQIDNO:16是scFvg2.5-6轻链的CDR1序列，SEQIDNO:17是scFvg2.5-6轻链的CDR2序列，且SEQIDNO:18是scFvg2.5-6轻链的CDR3序列。scFvg2.5-3的特征在于SEQIDNO:19-27，其中SEQIDNO:19是完整scFvg2.5-3氨基酸序列(包括重链和轻链)，SEQIDNO:20是完整scFvg2.5-3重链序列，SEQIDNO:21是完整scFvg2.5-3轻链序列，SEQIDNO:22是scFvg2.5-3重链的CDR1序列，SEQIDNO:23是scFvg2.5-3重链的CDR2序列，SEQIDNO:24是scFvg2.5-3重链的CDR3序列，SEQIDNO:25是scFvg2.5-3轻链的CDR1序列，SEQIDNO:26是scFvg2.5-3轻链的CDR2序列，且SEQIDNO:27是scFvg2.5-3轻链的CDR3序列。scFvg2.5-1的特征在于SEQIDNO:28-36，其中SEQIDNO:28是完整scFvg2.5-1氨基酸序列(包括重链和轻链)，SEQIDNO:29是完整scFvg2.5-1重链序列，SEQIDNO:30是完整scFvg2.5-1轻链序列，SEQIDNO:31是scFvg2.5-1重链的CDR1序列，SEQIDNO:32是scFvg2.5-1重链的CDR2序列，SEQIDNO:33是scFvg2.5-1重链的CDR3序列，SEQIDNO:34是scFvg2.5-1轻链的CDR1序列，SEQIDNO:35是scFvg2.5-1轻链的CDR2序列，且SEQIDNO:36是scFvg2.5-1轻链的CDR3序列。因此，在一些实施方案中，抗体或抗原结合抗体片段特异性结合B7-H6且包含(a)重链可变区，其包含(i)SEQIDNO:4的CDR1、(ii)SEQIDNO:5的CDR2和(iii)SEQIDNO:6的CDR3，和(b)轻链可变区，其包含(i)SEQIDNO:7的CDR1、(ii)SEQIDNO:8的CDR2和(iii)SEQIDNO:9的CDR3。在一些实施方案中，抗体包含SEQIDNO:2的重链可变结构域。在一些实施方案中，抗体包含SEQIDNO:3的轻链可变结构域。在一些实施方案中，抗体或抗原结合抗体片段特异性结合B7-H6且包含(a)重链可变区，其包含(i)SEQIDNO:13的CDR1、(ii)SEQIDNO:14的CDR2和(iii)SEQIDNO:15的CDR3，和(b)轻链可变区，其包含(i)SEQIDNO:16的CDR1、(ii)SEQIDNO:17的CDR2和(iii)SEQIDNO:18的CDR3。在一些实施方案中，抗体包含SEQIDNO:11的重链可变结构域。在一些实施方案中，抗体包含SEQIDNO:12的轻链可变结构域。在一些实施方案中，抗体或抗原结合抗体片段特异性结合B7-H6且包含(a)重链可变区，其包含(i)SEQIDNO:22的CDR1、(ii)SEQIDNO:23的CDR2和(iii)SEQIDNO:24的CDR3，和(b)轻链可变区，其包含(i)SEQIDNO:25的CDR1、(ii)SEQIDNO:26的CDR2和(iii)SEQIDNO:27的CDR3。在一些实施方案中，抗体包含SEQIDNO:20的重链可变结构域。在一些实施方案中，抗体包含SEQIDNO:21的轻链可变结构域。在一些实施方案中，抗体或抗原结合抗体片段特异性结合B7-H6且包含(a)重链可变区，其包含(i)SEQIDNO:31的CDR1、(ii)SEQIDNO:32的CDR2和(iii)SEQIDNO:33的CDR3，和(b)轻链可变区，其包含(i)SEQIDNO:34的CDR1、(ii)SEQIDNO:35的CDR2和(iii)SEQIDNO:36的CDR3。在一些实施方案中，抗体包含SEQIDNO:29的重链可变结构域。在一些实施方案中，抗体包含SEQIDNO:30的轻链可变结构域。在一些实施方案中，抗体或抗原结合抗体片段具有重链可变区，其包括与SEQIDNO:2、11、20或29同一(相同)的氨基酸序列。在其它实施方案中，抗体或抗原结合抗体片段具有重链可变区，其包括与SEQIDNO:2、11、20或29具有至少90％同一性的氨基酸序列。例如，与SEQIDNO:2、11、20或2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗体或抗原结合抗体片段，其特异性结合B7同源物6(B7‑H6)且包含(a)重链可变区，其包含，(i)SEQ ID NO:4的CDR1，(ii)SEQ ID NO:5的CDR2，和(iii)SEQ ID NO:6的CDR3；以及(b)轻链可变区，其包含，(i)SEQ ID NO:7的CDR1，(ii)SEQ ID NO:8的CDR2，和(iii)SEQ ID NO:9的CDR3。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.04.15 US 62/323,0391.抗体或抗原结合抗体片段，其特异性结合B7同源物6(B7-H6)且包含(a)重链可变区，其包含，(i)SEQIDNO:4的CDR1，(ii)SEQIDNO:5的CDR2，和(iii)SEQIDNO:6的CDR3；以及(b)轻链可变区，其包含，(i)SEQIDNO:7的CDR1，(ii)SEQIDNO:8的CDR2，和(iii)SEQIDNO:9的CDR3。2.权利要求1的抗体或抗原结合抗体片段，其中所述抗体包含SEQIDNO:2的重链可变结构域。3.权利要求1或2的抗体或抗原结合抗体片段，其中所述抗体包含SEQIDNO:3的轻链可变结构域。4.抗体或抗原结合抗体片段，其特异性结合B7同源物6(B7-H6)且包含(a)重链可变区，其包含，(i)SEQIDNO:13的CDR1，(ii)SEQIDNO:14的CDR2，和(iii)SEQIDNO:15的CDR3；以及(b)轻链可变区，其包含，(i)SEQIDNO:16的CDR1，(ii)SEQIDNO:17的CDR2，和(iii)SEQIDNO:18的CDR3。5.权利要求4的抗体或抗原结合抗体片段，其中所述抗体包含SEQIDNO:11的重链可变结构域。6.权利要求4或5的抗体或抗原结合抗体片段，其中所述抗体包含SEQIDNO:12的轻链可变结构域。7.抗体或抗原结合抗体片段，其特异性结合B7同源物6(B7-H6)且包含(a)重链可变区，其包含，(i)SEQIDNO:22的CDR1，(ii)SEQIDNO:23的CDR2，和(iii)SEQIDNO:24的CDR3；以及(b)轻链可变区，其包含，(i)SEQIDNO:25的CDR1，(ii)SEQIDNO:26的CDR2，和(iii)SEQIDNO:27的CDR3。8.权利要求7的抗体或抗原结合抗体片段，其中所述抗体包含SEQIDNO:20的重链可变结构域。9.权利要求7或8的抗体或抗原结合抗体片段，其中所述抗体包含SEQIDNO:21的轻链可变结构域。10.抗体或抗原结合抗体片段，其特异性结合B7同源物6(B7-H6)且包含(a)重链可变区，其包含，(i)SEQIDNO:31的CDR1，(ii)SEQIDNO:32的CDR2，和(iii)SEQIDNO:33的CDR3；以及(b)轻链可变区，其包含，(i)SEQIDNO:34的CDR1，(ii)SEQIDNO:35的CDR2，和(iii)SEQIDNO:36的CDR3。11.权利要求10的抗体或抗原结合抗体片段，其中所述抗体包含SEQIDNO:29的重链可变结构域。12.权利要求10或11的抗体或抗原结合抗体片段，其中所述抗体包含SEQIDNO:30的轻链可变结构域。13.抗体或抗原结合抗体片段，其特异性结合B7同源物6(B7-H6)且包含(a)包含氨基酸序列的重链可变区，所述氨基酸序列(i)与SEQIDNO:2、11、20或29相同，或(ii)与SEQIDNO:2、11、20或29具有至少90％同一性且由分别SEQIDNO:2、11、20或29中至少一个框架区中的至少一个突变组成；和(b)包含氨基酸序列的轻链可变区，所述氨基酸序列(i)与SEQIDNO:3、12、21或30相同，或(ii)与SEQIDNO:33、12、21或30具有至少90％同一性且由分别SEQIDNO:3、12、21或30中至少一个框架区中的至少一个突变组成。14.权利要求13的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含与SEQIDNO:2、11、20或29具有至少95％同一性的氨基酸序列；且(b)所述轻链可变区包含与SEQIDNO:3、12、21或30具有至少95％同一性的氨基酸序列。15.权利要求13的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含氨基酸序列，所述氨基酸序列(i)与SEQIDNO:2相同，或(ii)与SEQIDNO:2具有至少90％同一性且由SEQIDNO:2中至少一个框架区中的至少一个突变组成；且(b)所述轻链可变区包含氨基酸序列，所述氨基酸序列(i)与SEQIDNO:3相同，或(ii)与SEQIDNO:3具有至少90％同一性且由SEQIDNO:3中至少一个框架区中的至少一个突变组成。16.权利要求15的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含与SEQIDNO:2相同的氨基酸序列；且(b)所述轻链可变区包含与SEQIDNO:3相同的氨基酸序列。17.权利要求15的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含与SEQIDNO:2具有至少95％同一性的氨基酸序列；且(b)所述轻链可变区包含与SEQIDNO:3具有至少95％同一性的氨基酸序列。18.权利要求13的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含氨基酸序列，所述氨基酸序列(i)与SEQIDNO:11相同，或(ii)与SEQIDNO:11具有至少90％同一性且由SEQIDNO:11中至少一个框架区中的至少一个突变组成；且(b)所述轻链可变区包含氨基酸序列，所述氨基酸序列(i)与SEQIDNO:12相同，或(ii)与SEQIDNO:12具有至少90％同一性且由SEQIDNO:12中至少一个框架区中的至少一个突变组成。19.权利要求18的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含与SEQIDNO:11相同的氨基酸序列；且(b)所述轻链可变区包含与SEQIDNO:12相同的氨基酸序列。20.权利要求18的抗体或抗原结合抗体片段，(a)所述重链可变区包含与SEQIDNO:11具有至少95％同一性的氨基酸序列；且(b)所述轻链可变区包含与SEQIDNO:12具有至少95％同一性的氨基酸序列。21.权利要求13的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含氨基酸序列，所述氨基酸序列(i)与SEQIDNO:20相同，或(ii)与SEQIDNO:20具有至少90％同一性且由SEQIDNO:20中至少一个框架区中的至少一个突变组成；且(b)所述轻链可变区包含氨基酸序列，所述氨基酸序列(i)与SEQIDNO:21相同，或(ii)与SEQIDNO:21具有至少90％同一性且由SEQIDNO:21中至少一个框架区中的至少一个突变组成。22.权利要求21的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含与SEQIDNO:20相同的氨基酸序列；且(b)所述轻链可变区包含与SEQIDNO:21相同的氨基酸序列。23.权利要求21的抗体或抗原结合抗体片段，其中：(a)所述重链可变区包含与SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·阿克曼，C·华，C·森特曼，
申请(专利权)人：达特茅斯大学理事会，
类型：发明
国别省市：美国,US