一种口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放研究方法技术

本发明专利技术涉及一种口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放的研究方法，属于口用型无烟气烟草制品分析技术领域。该方法包括口用型无烟气烟草制品的筛选、模拟溶出参数的确定、体内实验烟碱口腔释放情况的测定、体外试验模拟等步骤。本发明专利技术利用体内实验进行体外研究参数确定，体外采用全仿真模拟咀嚼机对样品进行测试，所用装置能完全模拟人体口腔吸食无烟气烟草制品的状态，在咀嚼力度、咀嚼频率、唾液流量、口腔温度均可调控，且可控性强稳定性高，操作简单。本发明专利技术研究方法可以很好的避免传统人工品尝带来的主观和客观因素的影响，避免了大量人群实验的伦理道德制约，同时节约实验费用的同时还减少了因人体实验对健康带来的危害，适用于样品的批量研究。

【技术实现步骤摘要】
一种口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放研究方法
本专利技术属于口用型无烟气烟草制品分析
，具体涉及一种口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放研究方法，通过该方法可以研究分析口用型无烟气烟草制品烟碱溶出情况。
技术介绍
无烟气烟草制品（SmokelessTobaccoproducts,简称STPs）是指不经燃烧，直接通过口腔或鼻腔吸食的烟草制品，与传统卷烟相比其有害成分少，危害性较小；同时它不产生二手烟气，能在一定程度上缓解公共场所禁烟和吸烟的矛盾，并在一定程度上满足烟民的生理需要。无烟气烟草制品有袋装口含烟、鼻烟和嚼烟等多种多样的形式，其中消费主体是口用型无烟气烟草制品，主要包括袋装口含烟、胶基型嚼烟和含化烟。袋装口含烟是具有一定颗粒度的烟草粉末混合适量的香味物质、矫味剂、水、保润剂和酸碱调节剂经热处理加工制成的，用无纺布小袋包装，置于唇齿之间消费。胶基型无烟气烟草制品(Tobaccochewinggum)由瑞典火柴公司(SwedishMatch)于2003年首先研发成功并试投放市场。它又称为新型嚼烟、胶基型无烟气烟草、烟草口香糖、胶基烟，是一种烟草和/或烟草提取物为效用组分，以可食用胶基为载体，通过咀嚼方式向人体递送烟碱的新型烟草制品。2016年，全球STPs销售额为120亿美元，其中袋装口含烟销售额增加40%以上，嚼烟增加10%左右。STPs覆盖全球70个国家，占总人口的73%。通过STPs形式进行消费时，烟草不经燃烧，不会产生卷烟烟气中特有的一些有害成分，更重要的是不会产生令人讨厌的“二手烟”，是禁烟环境下烟草消费的重要补充形式。受到当前世界控烟运动的影响，这一类的烟草制品正成为国际烟草领域的重要发展趋势。烟草中生物碱约有50种，其中，烟碱是其重要的组成部分，约占其95%以上。同时也是STPs中重要成分之一，主要通过口腔或鼻腔粘膜吸收，作用于人体神经系统使吸食者产生满足感。烟碱的释放量是STPs制品质量安全的重要指标，其在人体中的吸收主要受含量、时间、和溶出等因素的影响。为了提供口用型无烟气烟草制品持续的生理满足感，烟碱在口腔中溶出率是关键因素，为了对该类产品的烟碱进行体外溶出量规律研究及质量评价，通常采用的方法是进行人群实验采集体内溶出唾液。但人群实验受到伦理、社会等诸多因素的限制，且主体因素影响较大，较难推广。STPs模拟口腔溶出国内也有一些学者进行过相关方面的研究。但都是以固定的唾液流速来探究不同影响因素的影响，而没有探究压力因素（袋装口含烟的使用方式一般是放入牙龈与嘴唇间）和唾液流速（口腔受到刺激时不同时间唾液释放速率不同）对烟碱释放的影响。没有真实有效地模拟人体口腔吸食无烟气烟草制品时的状态。因此如何克服现有技术的不足是目前口用型无烟气烟草制品分析
亟需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术针对目前已有的烟碱体外模拟溶出方法的不足，提供了一种口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放研究方法，该方法是一种更为接近人体口腔条件的试验方法，利用该方法可以更加准确的研究口用型无烟气烟草制品在人体口腔的释放情况，为该类产品的加工制作及质量控制提供技术支撑和理论依据。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放的研究方法，包括如下步骤：步骤（1），口用型无烟气烟草制品的筛选：对待研究的某种口用型无烟气烟草制品选取多颗进行重量检测，计算该制品单颗重量平均值和方差；之后，选择重量范围在平均值±（1-3）倍方差范围内的制品作为试样进行后续测定；步骤（2），模拟溶出参数的确定：选择多位身体健康的自愿者在自然状态下吸食步骤（1）筛选出的试样，并在事先确定的时间点收集残留样品和各自愿者唾液，每个时间点使用一颗样品；步骤（3），体内实验烟碱口腔释放情况的测定：利用反相超高效液相色谱分别对待研究口用型无烟气烟草制品、残留样品和自愿者唾液进行测试，以确定各时间段自愿者吸食样品的烟碱溶出量；步骤（4），体外试验模拟：采用全仿真模拟咀嚼机模拟吸食该待研究口用型无烟气烟草制品，并根据步骤（3）得到的自愿者吸食样品的烟碱溶出量和唾液量，设置全仿真模拟咀嚼机的压合力、唾液流速、唾液量和口腔温度参数；步骤（5），反相超高效液相色谱分析：利用反相超高效液相色谱分别对待研究口用型无烟气烟草制品、残留样品和全仿真模拟咀嚼机中的人工唾液进行测试，用此测试结果来表征待研究口用型无烟气烟草制品的烟碱口腔释放情况；步骤（6），烟碱口腔释放规律研究：采用上述全仿真模拟咀嚼机及设定的参数对同种口用型无烟气烟草制品整个咀嚼过程中的不同时间点进行测试，绘制烟碱释放曲线，进行烟碱口腔释放规律研究。进一步，优选的是，步骤（1）中，选择至少50颗待研究的某种口用型无烟气烟草制品进行重量检测。进一步，优选的是，步骤（1）中，所述的口用型无烟气烟草制品的种类包括口含烟、嚼烟、含化烟、膏状含烟、牙粉和可溶解烟草，其中，所述的口含烟的种类包括袋装口含烟、烟草口香糖、含片和硬质糖。进一步，优选的是，步骤（2）中，所述自愿者为年龄为18-55周岁。进一步，优选的是，步骤（2）中，所述残留样品和自愿者唾液的收集时间点为实验开始后0-60min内任意一点。进一步，优选的是，体外试验模拟时，所采用的人工唾液为无机盐类人工唾液或蛋白酶类人工唾液。进一步，优选的是，设置全仿真模拟咀嚼机的唾液量和唾液流速的具体参数如下：测试0.5min烟碱口腔释放情况时，唾液加入量1ml，唾液流速2ml/min；测试1min烟碱口腔释放情况时，唾液加入量1.4ml，唾液流速1.4ml/min；测试2min烟碱口腔释放情况时，唾液加入量2ml，唾液流速1ml/min；测试5min烟碱口腔释放情况时，唾液加入量5ml，唾液流速1ml/min；测试10min烟碱口腔释放情况时，唾液加入量11ml，唾液流速1.1ml/min；测试15min烟碱口腔释放情况时，唾液加入量14ml，唾液流速0.93ml/min；测试20min烟碱口腔释放情况时，唾液加入量18ml，唾液流速0.9ml/min。进一步，优选的是，所述制品或残留样品中的烟碱含量分析方法为：测试时取1颗制品或残留样品，去包装剪碎后放入容器中，加入20mL磷酸盐缓冲液和2mL0.25mol/mL盐酸水溶液，先超声20~60分钟，然后再在震荡器上振荡30~60min，静置，过滤萃取液，最后使用0.45μm的滤膜过滤，之后使用反相超高效液相色谱定量分析。本专利技术对于剪碎后的大小没有特殊限制。进一步，优选的是，所述反相超高效液相色谱参数为：色谱柱：150mm×4.6mm×5μm的AgilentEclipsePlusC18色谱柱；流动相：甲醇和10mmol/L、pH=6.80的磷酸盐缓冲溶液，体积为65:35；流速：0.6mL/min；进样量：5µL；柱温：35℃；检测器：UV；检测波长：259nm。目前，人工唾液大体分为两类，一类为无机盐类人工唾液，另一类为蛋白酶类人工唾液；蛋白酶类人工唾液处理包括无机盐外，还包括蛋白、酶。无机盐类人工唾液可如表1和表2所示，但不限于此。蛋白酶类人工唾液可如表3所示，但不限于此。表1人工唾液配方一表2人工唾液配方二组成用量组成用量KCl0.400g尿素1.000gNaCl0.400gNa2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放的研究方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1），口用型无烟气烟草制品的筛选：对待研究的某种口用型无烟气烟草制品选取多颗进行重量检测，计算该制品单颗重量平均值和方差；之后，选择重量范围在平均值±（1‑3）倍方差范围内的制品作为试样进行后续测定；步骤（2），模拟溶出参数的确定：选择多位身体健康的自愿者在自然状态下吸食步骤（1）筛选出的试样，并在事先确定的时间点收集残留样品和各自愿者唾液，每个时间点使用一颗样品；步骤（3），体内实验烟碱口腔释放情况的测定：利用反相超高效液相色谱分别对待研究口用型无烟气烟草制品、残留样品和自愿者唾液进行测试，以确定各时间段自愿者吸食样品的烟碱溶出量；步骤（4），体外试验模拟：采用全仿真模拟咀嚼机模拟吸食该待研究口用型无烟气烟草制品，并根据步骤（3）得到的自愿者吸食样品的烟碱溶出量和唾液量，设置全仿真模拟咀嚼机的压合力、唾液流速、唾液量和口腔温度参数；步骤（5），反相超高效液相色谱分析：利用反相超高效液相色谱分别对待研究口用型无烟气烟草制品、残留样品和全仿真模拟咀嚼机中的人工唾液进行测试，用此测试结果来表征待研究口用型无烟气烟草制品的烟碱口腔释放情况；步骤（6），烟碱口腔释放规律研究：采用上述全仿真模拟咀嚼机及设定的参数对同种口用型无烟气烟草制品整个咀嚼过程中的不同时间点进行测试，绘制烟碱释放曲线，进行烟碱口腔释放规律研究。...

【技术特征摘要】
1.一种口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放的研究方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1），口用型无烟气烟草制品的筛选：对待研究的某种口用型无烟气烟草制品选取多颗进行重量检测，计算该制品单颗重量平均值和方差；之后，选择重量范围在平均值±（1-3）倍方差范围内的制品作为试样进行后续测定；步骤（2），模拟溶出参数的确定：选择多位身体健康的自愿者在自然状态下吸食步骤（1）筛选出的试样，并在事先确定的时间点收集残留样品和各自愿者唾液，每个时间点使用一颗样品；步骤（3），体内实验烟碱口腔释放情况的测定：利用反相超高效液相色谱分别对待研究口用型无烟气烟草制品、残留样品和自愿者唾液进行测试，以确定各时间段自愿者吸食样品的烟碱溶出量；步骤（4），体外试验模拟：采用全仿真模拟咀嚼机模拟吸食该待研究口用型无烟气烟草制品，并根据步骤（3）得到的自愿者吸食样品的烟碱溶出量和唾液量，设置全仿真模拟咀嚼机的压合力、唾液流速、唾液量和口腔温度参数；步骤（5），反相超高效液相色谱分析：利用反相超高效液相色谱分别对待研究口用型无烟气烟草制品、残留样品和全仿真模拟咀嚼机中的人工唾液进行测试，用此测试结果来表征待研究口用型无烟气烟草制品的烟碱口腔释放情况；步骤（6），烟碱口腔释放规律研究：采用上述全仿真模拟咀嚼机及设定的参数对同种口用型无烟气烟草制品整个咀嚼过程中的不同时间点进行测试，绘制烟碱释放曲线，进行烟碱口腔释放规律研究。2.根据权利要求1所述的口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放的研究方法，其特征在于，步骤（1）中，选择至少50颗待研究的某种口用型无烟气烟草制品进行重量检测。3.根据权利要求1所述的口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放的研究方法，其特征在于，步骤（1）中，所述的口用型无烟气烟草制品的种类包括口含烟、嚼烟、含化烟、膏状含烟、牙粉和可溶解烟草，其中，所述的口含烟的种类包括袋装口含烟、烟草口香糖、含片和硬质糖。4.根据权利要求1所述的口用型无烟气烟草制品烟碱口腔释放的研究方法，其特征在于，步骤（2）中，所述自愿者为年龄为18-55周岁。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨继，陈永宽，刘志华，王超，杨柳，段沅杏，赵杨，赵辉，刘春波，申钦鹏，缪明明，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南,53