一种泥鳅多糖的制备方法技术

本公开内容涉及制备泥鳅多糖的方法，包括以下步骤：(i)用高温水处理泥鳅，收集泥鳅表层黏液；(ii)加入酶，得到酶解液；(iii)使酶解液静置沉淀；(iv)去除沉淀物并浓缩，得到浓缩液；(v)向浓缩液加入醇，得到沉淀物；(vi)对沉淀物进行干燥，得到泥鳅多糖。

【技术实现步骤摘要】
一种泥鳅多糖的制备方法
本专利技术涉及天然物质的提取
，更具体而言，涉及一种泥鳅多糖的制备方法。
技术介绍
泥鳅中含有大量对人体有益的生物活性物质，如蛋白质、抗菌肽、糖蛋白、泥鳅多糖(Misgurnusanguillicaudatuspolysaccharides,MAP)、不饱和多烯脂肪酸、牛磺酸和赖氨酸等必需氨基酸以及锌、硒等微量营养元素。泥鳅分泌多糖属于黏多糖，是动物体内蛋白多糖分子中的糖链部分。泥鳅多糖中含氨基糖和硫酸基，其含量分别为11.19%±0.03%，19.11%±0.41%(x±s,n=3)；泥鳅多糖中未发现糖醛酸。钦传光等(钦传光.泥鳅多糖的分离、纯化、表征及生物活性研究，博士学位论文，华中科技大学，2001；周军.泥鳅不同提取物的生物活性研究，硕士学位论文,华中科技大学，2003)从泥鳅表皮黏液中提取中性黏多糖，经高效液相分离发现该多糖由一个高聚糖(MAP，19.1%)和一个寡糖(MAO，80.9%)组成。研究证实泥鳅多糖能够有效地清除O2-、H2O2等活性氧，对DNA链有一定的保护作用；发现泥鳅多糖可抑制白细胞游走，具有显著的抗炎效果；泥鳅多糖能增强小鼠脾细胞中T细胞、细胞毒T淋巴细胞和天然杀伤细胞的活性；泥鳅多糖可明显降低糖尿病模型小鼠的高血糖及高血脂症，还证明通过模型小鼠动物试验，证实泥鳅多糖可阻断肝损伤小鼠的肝细胞损伤，具有保肝护肝功效；另外泥鳅多糖能抑制人胃癌SGC-7901细胞、白血病HL-60细胞和肝癌细胞的生长。提取泥鳅多糖的现有技术方法，例如钦传光等(钦传光，黄开勋，徐辉碧，泥鳅多糖的免疫作用研究，中国药学杂志，2002年8月第37卷第8期)需要将鲜活泥鳅用蒸馏水浸养3天，该过程不仅耗时长，并且能耗高，因为饲养水浓缩需消耗大量能源。因此，需要适于工业生产且耗时短、易操作、成本低的泥鳅多糖提取方法。
技术实现思路
预料不到地，本申请专利技术人发现，与现有技术的方法相比，仅通过高温水处理这一步骤就可获取泥鳅表面的全部黏液，这使得本专利技术的方法耗时短、用水量少、能耗小，且产量高。在一方面，提供了制备泥鳅多糖的方法，包括以下步骤：(i)用高温水处理泥鳅，收集泥鳅表层黏液；(ii)加入酶，得到酶解液；(iii)使酶解液静置沉淀；(iv)去除沉淀物并浓缩，得到浓缩液；(v)向浓缩液加入醇，得到沉淀物；(vi)对沉淀物进行干燥，得到泥鳅多糖。在一个实施方案中，所述高温水的温度是50℃-100℃，优选70℃-90℃。在一个实施方案中，所述步骤(i)中高温水与泥鳅的重量比是0.5-4:1。在一个实施方案中，所述步骤(i)中高温水与泥鳅的重量比优选是1:1。在一个实施方案中，所述步骤(ii)中的酶选自木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶或它们的混合物。在一个实施方案中，在所述步骤(ii)中还包括在高温下使酶灭活及去除蛋白的步骤。在一个实施方案中，在所述步骤(iv)中通过过滤或离心去除沉淀物。在一个实施方案中，在所述步骤(iv)中用滤液膜设备或在真空下进行浓缩。在一个实施方案中，所述膜设备选自纳滤膜设备、超滤膜设备或反渗透膜设备。在一个实施方案中，所述步骤(v)中的醇是乙醇，优选高浓度乙醇。在一个实施方案中，所述步骤(vi)中的干燥选自冷冻干燥、鼓风干燥、真空干燥或喷雾干燥。在一个具体方面，提供了一种制备泥鳅多糖的方法，包括以下步骤：(i)用50℃-100℃的高温水处理泥鳅，收集泥鳅表层黏液；(ii)加入酶，得到酶解液；(iii)使酶解液静置沉淀；(iv)去除沉淀物并浓缩，得到浓缩液；(v)向浓缩液加入醇，得到沉淀物；(vi)对沉淀物进行干燥，得到泥鳅多糖。在另一个具体方面，提供了一种制备泥鳅多糖的方法，包括以下步骤：(i)用70℃-90℃的高温水处理泥鳅，收集泥鳅表层黏液；(ii)加入酶，得到酶解液；(iii)使酶解液静置沉淀；(iv)去除沉淀物并浓缩，得到浓缩液；(v)向浓缩液加入醇，得到沉淀物；(vi)对沉淀物进行干燥，得到泥鳅多糖。在另一个方面，提供了通过任何前述方法获得的泥鳅多糖。本专利技术采用高温水处理泥鳅，然后酶解蛋白，再进一步通过醇沉淀而纯化的步骤组合来制备泥鳅多糖。本专利技术的工艺简单、易操作、能耗低、成本低，适于工业生产。本专利技术方法提取的泥鳅多糖，在抗癌、提高免疫力等方面发挥作用，可广泛应用于食品、医药、保健品等领域，市场前景广阔。附图说明图1图示根据本专利技术的方法制备泥鳅多糖的一般流程图。具体实施方式除非另外定义，本文所用的所有技术和科学术语具有本领域技术人员通常理解的相同含义。在冲突的情况下，以本申请说明书为准。下面描述优选的方法和材料，但是与本文所述那些类似或等同的方法和材料可用于实施或测试本专利技术。本文公开的材料、方法和实例仅是说明性的，而非旨在限制。预料不到地，本申请专利技术人发现，与现有技术的方法相比，仅通过高温水处理这一步骤就可获取泥鳅表面的全部黏液，这使得本专利技术的方法耗时短、用水量少、能耗小，且产量高。在一方面，提供了制备泥鳅多糖的方法，包括以下步骤：(i)对泥鳅进行处理，收集泥鳅表层黏液；(ii)加入酶使黏液中的蛋白酶解，然后使酶灭活，得到酶解液；(iii)使酶解液静置沉淀；(iv)过滤或离心去除沉淀物并用膜设备浓缩，得到浓缩液；(v)通过向浓缩液加入醇而沉淀，过滤得到沉淀物；(vi)对沉淀物进行干燥，得到泥鳅多糖。在一个实施方案中，所述处理可以用高温水进行。在一个实施方案中，所述高温水的温度可以是50℃-100℃，例如50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃、66℃、67℃、68℃、69℃、70℃、71℃、72℃、73℃、74℃、75℃、76℃、77℃、78℃、79℃、80℃、81℃、82℃、83℃、84℃、85℃、86℃、87℃、88℃、89℃、90℃、91℃、92℃、93℃、94℃、95℃、96℃、97℃、98℃、99℃或100℃。在一个实施方案中，高温水的温度优选是70℃-90℃，例如70℃-80℃或80℃-90℃。在一个实施方案中，所述步骤(i)中高温水与泥鳅的重量比可以是0.5-4:1，例如0.5:1、0.75:1、1:1、1.25:1、1.5:1、1.75:1、2:1、2.25:1、2.5:1、2.75:1、3:1、3.25:1、3.5:1、3.75:1或4:1。在一个实施方案中，所述步骤(i)中高温水与泥鳅的重量比优选是1:1。在一个实施方案中，所述步骤(ii)中的酶可以选自木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶或它们的混合物。在一个实施方案中，在所述步骤(ii)中还包括在高温下使酶灭活的步骤。在一个实施方案中，在所述步骤(iv)中通过过滤或离心去除沉淀物。在一个实施方案中，在所述步骤(iv)中用滤液膜设备或在真空下进行浓缩。在一个实施方案中，所述滤液膜设备可以选自纳滤膜设备、超滤膜设备或反渗透膜设备。在一个实施方案中，所述步骤(v)中的醇可以是乙醇，优选高浓度乙醇。在一个实施方案中，所述步骤(vi)中的干燥可以选自冷冻干燥、鼓风干燥、真空干燥或喷雾干燥。在一个具体方面，提供了一种制备泥鳅多糖的方法，包括以下步骤：(i)用50℃-100℃的高温水处理泥鳅，收集泥本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备泥鳅多糖的方法，包括以下步骤：(i)用高温水处理泥鳅，收集泥鳅表层黏液；(ii)加入酶，得到酶解液；(iii)使酶解液静置沉淀；(iv)去除沉淀物并浓缩，得到浓缩液；(v)向浓缩液加入醇，得到沉淀物；(vi)对沉淀物进行干燥，得到泥鳅多糖。

【技术特征摘要】
1.一种制备泥鳅多糖的方法，包括以下步骤：(i)用高温水处理泥鳅，收集泥鳅表层黏液；(ii)加入酶，得到酶解液；(iii)使酶解液静置沉淀；(iv)去除沉淀物并浓缩，得到浓缩液；(v)向浓缩液加入醇，得到沉淀物；(vi)对沉淀物进行干燥，得到泥鳅多糖。2.根据权利要求1所述的方法，其中高温水的温度是50℃-100℃，优选70℃-90℃。3.根据权利要求1所述的方法，其中高温水与泥鳅的重量比是0.5-4:1，优选1:1。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述步骤(ii)中的酶选自木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶或它们的混合物。5.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中在所述步骤(ii)中...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘牧龙，左小峰，蔡青青，
申请(专利权)人：深圳市生命谷生命科技研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44