一种处理酵母核糖核酸母液的方法技术

本发明专利技术涉及一种处理酵母核糖核酸母液的方法，将核糖核酸沉降分离后的酵母核糖核酸母液通过加入生石灰调节pH值至中性附近，固液分离后得到的清液经纳滤膜浓缩，使核糖核酸富集达到沉降浓度进行二次沉降，提高核糖核酸产品总收率。该方法不仅回收了PO4

【技术实现步骤摘要】
一种处理酵母核糖核酸母液的方法
本专利技术属于生物分离
，涉及一种处理酵母核糖核酸母液的方法。
技术介绍
RNA是生命存在的重要物质基础。RNA及其核酸酶分解产物腺苷酸、鸟苷酸、尿苷酸、胞苷酸等，在医药、食品、化妆品以及农业等行业中具有重要的用途。RNA还具有维持机体免疫功能(万文军，罗众球，酵母发酵法制备核糖核酸研究进展[J]，生物技术通讯，2008，19(4)：638-640)、抗氧化、提高机体蛋白质和铁的生物利用率、降低胆固醇和抗衰老等多种生理功能。因此，RNA的开发研究越来越受到重视。但由于目前RNA产品的质量和价格因素，限制了它的使用。采用现有的酵母发酵提取RNA的工艺，是生产RNA及相应核苷酸的有效途径。从微生物中提取RNA是工业上最实际和最有效的方法。酵母中RNA不仅含量高，而且适合于工业化生产(朱俊东，黄国荣，啤酒酵母中提取核糖核酸的研究[J]，食品科学，2006，(27)2：160-162)。酵母RNA提取主要分3步进行：1)破壁，采用高浓度盐水高温蒸煮的方式使RNA从细胞中溶出；2)离心，使RNA与酵母体分离，得到RNA清液；3)沉降，用H3PO4调pH至RNA等电点，使RNA沉淀，经纯化、干燥得到成品。但是RNA在沉降过程中不能完成沉下来，沉降母液中还含有少量RNA。如果直接丢弃，会造成浪费。直接二次沉降，又因为浓度低而沉不下来。另外沉降母液中还含有大量PO43-和NaC1，如果不处理直接排放会造成环境污染和成本浪费。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种操作简单、减少浪费、节约成本、保护环境，并且适合大规模生产核糖核酸的方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种处理酵母核糖核酸母液的方法，将核糖核酸沉降分离后的酵母核糖核酸母液通过加入生石灰调节pH值至中性附近，沉淀PO43-，固液分离后得到的清液经纳滤膜浓缩，使核糖核酸富集达到沉降浓度进行二次沉降，提高核糖核酸产品总收率。其中，加入生石灰调节pH值至7.0±0.1。其中，所述的固液分离，采用的设备为卧螺离心机、碟片分离机、三足离心机、板框过滤机中的任意一种或几种，优选三足离心机。其中，所述的固液分离，得到的固体物质回收磷酸盐。其中，所述的纳滤膜浓缩，浓缩倍数为3-10倍，优选6倍。其中，核糖核酸富集后的浓度为9-40g/L，优选14-17g/L。其中，所述的纳滤膜为聚砜纳滤膜，膜截留分子量为300-1000道尔顿，优选300-600道尔顿。其中，所述的纳滤膜为中空纤维式膜、板框式膜、卷式膜或管式膜，优选中空纤维式膜。其中，纳滤透过液中含有的NaCl回用到酵母破壁环节。有益效果：本专利技术方法通过简单的操作，回收PO43-制成副产品磷酸钙盐，减少RNA的损失，提高产品得率，重复利用盐水以降低生产成本，达到保护环境的目的。该方法操作简单、节约成本，并且适合大规模生产。具体实施方式根据下述实施例，可以更好地理解本专利技术。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本专利技术，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本专利技术。实施例1RNA含量为15g/L的10L溶液，加入H3PO4将pH调节至2.01，析出的RNA用酒精洗涤、过滤、烘干。沉降母液中含有3.2g/LRNA、21.3g/LPO43-、98g/LNaCl。加入生石灰将母液pH调至7.01，实验室离心机6000rpm，5min离心，离心固相烘干制成磷酸钙盐，离心清相通过截留分子量为300道的聚砜中空纤维纳滤膜纳滤浓缩4倍，RNA浓度提高到11.3g/L，再经过二次沉降得到RNA。RNA一次沉降收率为78.7％，RNA总收率为93.3％。纳滤透过液回收用于酵母破壁过程。实施例2RNA含量为13.5g/L的100L溶液，加入H3PO4将pH调节至2.03，析出的RNA用酒精洗涤、过滤、烘干。沉降母液中含有2.8g/LRNA、19.6g/LPO43-、102g/LNaCl。加入生石灰将母液pH调至6.98，三足离心机离心，离心固相烘干制成磷酸钙盐，离心清相通过截留分子量为600道的聚砜中空纤维纳滤膜纳滤浓缩6倍，RNA浓度提高到14.8g/L，再经过二次沉降得到RNA。RNA一次沉降收率为79.3％，RNA总收率为93.7％。纳滤透过液回收用于酵母破壁过程。实施例3RNA含量为14.6g/L的5m3溶液，加入H3PO4将pH调节至2.05，析出的RNA用酒精洗涤、过滤、烘干。沉降母液中含有3.1g/LRNA、19.3g/LPＯ43-、96g/LNaCl。加入生石灰将母液pH调至7.03，卧螺离心机离心，离心固相烘干制成磷酸钙盐，离心清相通过截留分子量为1000道的聚砜中空纤维纳滤膜纳滤浓缩10倍，RNA浓度提高到27.1g/L，再经过二次沉降得到RNA。RNA一次沉降收率为78.8％，RNA总收率为92.6％。纳滤透过液回收用于酵母破壁过程。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种处理酵母核糖核酸母液的方法，其特征在于，将核糖核酸沉降分离后的酵母核糖核酸母液通过加入生石灰调节pH值至中性附近，固液分离后得到的清液经纳滤膜浓缩，使核糖核酸富集达到沉降浓度进行二次沉降，提高核糖核酸产品总收率。

【技术特征摘要】
1.一种处理酵母核糖核酸母液的方法，其特征在于，将核糖核酸沉降分离后的酵母核糖核酸母液通过加入生石灰调节pH值至中性附近，固液分离后得到的清液经纳滤膜浓缩，使核糖核酸富集达到沉降浓度进行二次沉降，提高核糖核酸产品总收率。2.根据权利要求1所述的处理酵母核糖核酸母液的方法，其特征在于，加入生石灰调节pH值至7.0±0.1。3.根据权利要求1所述的处理酵母核糖核酸母液的方法，其特征在于，所述的固液分离，采用的设备为卧螺离心机、碟片分离机、三足离心机、板框过滤机中的任意一种或几种。4.根据权利要求1所述的处理酵母核糖核酸母液的方法，其特征在于，所述的固液分离，得到的固体物质回收磷...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄小权，陈文军，陈长保，付天松，徐宁，
申请(专利权)人：南阳同凯生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41