一株解钾假单胞菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，具体涉及一株解钾假单胞菌及其应用。采取的技术方案为：提供了一株解钾假单胞菌，在CGMCC的保藏号为CGMCC No.15914。本发明专利技术提供的一株解钾假单胞菌，该菌株能分解利用土壤中的难溶性钾矿物，增加钾细菌筛选培养基中的可溶性钾含量，具备分泌胞外酶强化植株抗性的功能，还能提高修复的作物生物量，可用于制备土壤生物改良菌剂。

A Pseudomonas Potassium-lysing Strain and Its Application

The invention relates to the field of microbial technology, in particular to a strain of Pseudomonas potassium-solubilizing bacteria and its application. The technical scheme adopted is that a strain of Pseudomonas potassium-solubilizing bacteria is provided, and the preservation number of CGMCC is CGMCC No. 15914. A strain of Pseudomonas potassium-solubilizing bacteria provided by the invention can decompose and utilize insoluble potassium minerals in soil, increase soluble potassium content in potassium bacteria screening medium, have the function of secreting extracellular enzymes to strengthen plant resistance, and can also improve the biomass of restored crops, and can be used to prepare soil biological improvers.

【技术实现步骤摘要】
一株解钾假单胞菌及其应用
本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株解钾假单胞菌及其应用。
技术介绍
钾在植物体内以离子状态存在，是60多种酶的活化剂，是构成细胞渗透势的重要成分，能促进植株茎秆健壮，改善果实品质，增强植株抗寒能力，提高果实的糖分和维生素C的含量。钾素供应不足时，碳水化合物代谢受到干扰，光合作用受抑制，而呼吸作用加强，同时造成植株抗逆能力减弱，易受病害侵袭，作物品质呈下降趋势。使用钾肥可提高作物含钾量，但大量化学钾肥的施用，不仅投入较大，且容易破坏土壤结构，造成土壤板结，土壤微生物多样性下降，不利于土地生产力的可持续发展。解钾微生物是一种能将含钾矿物如长石、云母和硅酸盐等不能被作物吸收利用的矿物态钾分解产生水溶性钾的微生物，目前认为其解钾机理是破坏难溶矿物的晶格结构释放有效钾元素，此过程还能加速土壤形成。解钾菌能作为微生物肥料，其制备的生物钾肥具有提高土壤肥力作用，同时减少化肥过度施用造成的环境污染和资源浪费，产生良好的经济、社会效益，符合“绿色环保，持续发展”的时代需求。中国约有60％的耕地缺钾，耕地速效钾含量正以每年2×10-6～3×10-6的速度下降，且由此造成的土壤矿质营养元素比例失调导致的作物减产也十分严重。此外，研究表明植物发生缺素症的土壤条件，常伴随逆生环境的存在，因此在土壤解钾菌株筛选时应同样重视其提高植株抗性的复合功能。目前研究者们在解钾微生物的选育和生物钾肥的制备方面取得了一定的研究进展，但《硅酸盐细菌的研究进展》指出大多数菌株的解钾量是从相对层面进行分析的，其表现为解钾作用非常明显，但就绝对值而言，则十分有限。而且还存在菌种在土壤中的定殖能力差、解钾效果不明显、增产效果不稳定的问题。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株解钾假单胞菌及其应用，解决了现有技术中菌种在土壤中的定殖能力差、解钾效果不明显、增产效果不稳定的问题。本专利技术的目的是提供一株解钾假单胞菌及其应用。本专利技术提供的一株解钾假单胞菌应理解为一株具有解钾能力的假单胞菌。为实现上述专利技术目的，本专利技术所采用的技术方案是：本专利技术提供了一株假单胞菌，所述假单胞菌为假单胞菌KSX1-2，Pseudomonassp.，于2018年06月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.15914。本专利技术提供了一株假单胞菌，其16SrDNA测序结果如SEQIDNO：1所示。本专利技术还提供了所述的假单胞菌在促进植物生长中的应用。优选的，所述的假单胞菌在制备土壤解钾生物制剂中的应用。优选的，所述应用的条件为：pH值为5.0～10.0，温度为4～37℃。优选的，所述生物制剂由假单胞菌KSX1-2发酵液、生物炭和粪便发酵产物制备。优选的，所述假单胞菌KSX1-2发酵液、生物炭和粪便发酵产物的质量比为1：5：20。优选的，所述假单胞菌KSX1-2发酵液的制备过程为：将所述假单胞菌KSX1-2种子液接入到牛肉膏蛋白胨液体培养基中发酵20～24h制备。优选的，所述种子液的制备过程为：从假单胞菌KSX1-2保藏斜面刮取一接种环菌体接种到50mL牛肉膏蛋白胨液体培养基，于26～30℃，摇培22～26h制得一级种子液，再将一级种子液逐级扩大培养，直至所需发酵液体积的20％。本专利技术具有以下有益效果：1、本专利技术提供的假单胞菌KSX1-2是一株高效分解含钾矿物的细菌，其土壤解钾效果好，定殖能力强，同时具备一定的促进植物生长和提高作物抗性的作用，解决了普通解钾微生物在逆生环境中解钾能力差、促生效应不稳定，定殖效果欠缺等问题。2、本专利技术将假单胞菌KSX1-2进行了发酵，其发酵液显著增强了作物种子发芽率、生物量和逆境抗性，有利于作物育苗和增产。3、本专利技术将作物种子用假单胞菌KSX1-2制备的浸种菌液处理后，能有效提高种子的萌发率，并显著增加作物营养生长期的生物量。4、本专利技术施用假单胞菌KSX1-2发酵液与生物炭和羊粪发酵产物进行复配得到的土壤解钾生物制剂后，基质速效钾含量增加，作物营养生长期间生物量提高显著，土壤保水性能明显增强，植株细胞分裂素、赤霉素的分泌量和活性均有提高，并产生能够抑制作物病原体/病原菌生长的吩嗪类化合物。附图说明图1为假单胞菌KSX1-2在钾细菌筛选培养基上生长图；图2为假单胞菌KSX1-2在粗砂土培养基中速效钾含量及pH变化折线图；图3为假单胞菌KSX1-2在LB培养基上的菌落图；图4为假单胞菌KSX1-2革兰氏染色图；图5为假单胞菌KSX1-2的扫描电镜图；图6为假单胞菌KSX1-2在牛肉膏蛋白胨中的生长曲线图；图7为假单胞菌KSX1-216SrDNA测序进化树示意图；图8为假单胞菌KSX1-2菌液处理小白菜种子耐盐胁迫萌发图；图9两种土壤解钾生物制剂处理粗砂土后西洋蓍草移栽30d后对比图；图10施用不同土壤解钾生物制剂对西洋蓍草冠径、株高、烘干生物量的影响图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。若未特别指明，实施举例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例1解钾菌株的筛选(1)培养基的准备牛肉膏蛋白胨固体培养基：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂18g，蒸馏水1000mL，pH＝7.0，121℃灭菌20min。牛肉膏蛋白胨液体培养基：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH＝7.0，121℃灭菌20min。解钾细菌筛选固体培养基：蔗糖5g,MgSO4·7H2O0.5g,FeCl30.005g,CaCO30.1g，钾长石2g，琼脂20g，pH＝7.4，去离子水1000mL。解钾细菌筛选液体培养基：蔗糖5g,MgSO4·7H2O0.5g,FeCl30.005g,CaCO30.1g，钾长石2g，pH＝7.4，去离子水1000mL。(2)假单胞菌的筛选选取在侵蚀作用强烈发生养分贫瘠的初育土地区原生植被(这里的侵蚀作用强烈发生的主要外营力为风蚀作用，表土层无保留，母质层保留完整；养分贫瘠是有机质含量<6g/kg，速效氮含量<30mg/kg，有效磷含量<3mg/kg，速效钾含量<30mg/kg；初育土是土壤发育程度微弱，土壤剖面层次分异不明显，母质特征显著，剖面类型多为A-C或A-R型，这里的A为表土层，C为母质层，R为基岩)，小心去掉根周土壤保留根际土，装袋低温保藏带回实验室，于超净工作台用灭菌毛刷辅以无菌水剥离洗涤。洗涤完成后转移到500mL三角瓶中，置于摇床中30℃，180r/min震荡20min，静置10min，得到土壤悬浊液，取0.2mL土壤悬浊液于血球计数板用显微镜观察并推算悬浊液中菌体大概数量，采用灭菌水稀释到100CFU/mL后吸取0.5mL均匀涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基中。将培养皿倒置于30℃恒温培养1～2天，蘸取不同类型的单菌落，经平板划线纯化3次以上后，4℃保存于对应的斜面培养基中待用。第一步初筛：从保存斜面上用接种环均匀刮取一接种环菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株假单胞菌，其特征在于：所述假单胞菌为假单胞菌KSX1‑2，Pseudomonas sp.，于2018年06月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.15914。

【技术特征摘要】
1.一株假单胞菌，其特征在于：所述假单胞菌为假单胞菌KSX1-2，Pseudomonassp.，于2018年06月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.15914。2.一株假单胞菌，其特征在于：其16SrDNA测序结果如SEQIDNO：1所示。3.如权利要求1所述的假单胞菌在促进植物生长中的应用。4.根据权利要求3所述的假单胞菌在促进植物生长中的应用，其特征在于：所述假单胞菌KSX1-2在制备土壤解钾生物制剂中的应用。5.根据权利要求4所述的假单胞菌在促进植物生长中的应用，其特征在于：所述应用的条件为：pH值为5.0～10.0，温度为4～37℃。6.根据权利要求4所述的假单胞菌在促进植物生长中的应用，其特征在于：所述生物制剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘强，
申请(专利权)人：四川大宇中和农业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51