一种生物活性多肽DKLAQ及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及蛋白领域，具体涉及一种生物活性多肽DKLAQ及其制备方法和应用，生物活性多肽DKLAQ其氨基酸序列为Asp‑Lys‑Leu‑Ala‑Gln。经过体外抗氧化实验、体内抗衰老实验，验证了多肽DKLAQ具有较好的抗氧化生物学活性和抗衰老活性，一方面，本发明专利技术的生物活性多肽DKLAQ具有较好的抗氧化活性，能够清除机体内的自由基，提高生命的质量；另一方面，能够提高体内抗过氧化酶系的活力，增强机体抵抗外源性刺激的功能，从而降低机体老化、衰老和生病的机率，对开发具有抗氧化功能、抗衰老功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。

A Bioactive Peptide DKLAQ and Its Preparation and Application

The invention relates to the field of protein, in particular to a biologically active polypeptide DKLAQ and its preparation method and application. The amino acid sequence of the biologically active polypeptide DKLAQ is Asp Lys Leu Ala Gln. Through in vitro and in vivo anti-aging experiments, the polypeptide DKLAQ has good antioxidant biological activity and anti-aging activity. On the one hand, the biologically active polypeptide DKLAQ of the invention has good antioxidant activity, can scavenge free radicals in the body and improve the quality of life; on the other hand, it can improve the activity of the anti-peroxidase system in the body and enhance the body. The function of resisting exogenous stimulation can reduce the probability of aging, senility and disease. It is of great significance to develop food, health products and medicines with antioxidant and anti-aging functions.

【技术实现步骤摘要】
一种生物活性多肽DKLAQ及其制备方法和应用
本专利技术涉及蛋白领域，尤其是涉及一种生物活性多肽DKLAQ及其制备方法和应用。
技术介绍
在牛乳经乳酸菌发酵的过程中，牛乳中的一部分蛋白质被乳酸菌代谢利用，并发生了一系列生理生化反应，使蛋白质变为多肽或者游离的氨基酸，被人体消化吸收或通过小肠上皮细胞的吸收转运直接进入人体的血液循环。乳酸菌菌体也存在一些自身合成的蛋白质多肽片段，供细菌生长利用。在这些多肽中，有一部分具有特殊的生理功能，被称为“生物活性肽”。在天然食物来源中寻找安全的生物活性肽尤为重要。近些年来，人们发现一些食物来源的多肽类物质具有良好的生物活性，如玉米短肽、大豆肽、牛乳多肽等。这些多肽可以通过微生物发酵、消化酶解等多种途径得到，并且大多具有生物活性的多肽是由2～20个氨基酸残基组成，分子量小于6000Da，含有一定量的疏水氨基酸、芳香族氨基酸。氧化反应和氧化代谢对于食物和人体来说都是至关重要的，自由基和活性氧引起了一系列的氧化反应。当过量的自由基形成，它们会超过保护性酶如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的保护作用，从而导致脂质氧化、细胞凋亡等一系列的副作用产生。这一类的氧化反应，不仅影响含脂食物的保质期，也对人体的健康造成了一定的危害，如风湿性关节炎、糖尿病、动脉硬化等。此外，Collins等人2005年研究发现癌症的发生也与DNA的氧化损伤有关。早期一些人工合成的抗氧化剂如丁基羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)被运用到食品中，作为脂质的抗氧化剂，但这些人工合成的添加剂对于人体都有潜在的风险。在天然抗氧化剂的研究过程中，来源于食物蛋白的抗氧化肽成为了热门研究之一。其不仅安全性高，比蛋白质等大分子营养物质更容易被吸收利用，能促进如钙、铁等微量营养素的吸收，还具有较好的抗氧化活性，应用前景广阔。衰老是一个自然现象，且过程常伴有抗氧化水平、器官组织、免疫因子的变化，其中细胞因子发生着复杂的变化，如促炎细胞因子IL-6、IL-4、TNF-α等呈现增长的趋势，IL-6与TNF-a均被认为在老年性疾病的发生过程中扮演重要角色。随着遗传学和分子生物学的发展，生物衰老机理的研究取得了可喜的进展。研究人员通过利用一些模式生物，如小鼠、果蝇和秀丽线虫等的单一基因突变实验，发现有些基因能够显著增加这些生物体的寿命达6倍之多。抗衰老肽作为一种新兴的抗衰老剂，在生理功能方面具有氨基酸所不能比拟的优势，其能对生物体内的酶产生促进或抑制作用，改善对矿物质及其他营养元素的吸收和利用，清除体内自由基，增强机体自身的抗氧化力，以延缓衰老。因此，生物活性肽的营养保健作用已成为国内外学者课题研究的重点。邱隽等人经实验研究发现，乳源性生物活性小肽能有效延长果蝇寿命，延缓其衰老，并且还具有较好的抗氧化作用，推测可能是其中富含琉基肽类。周之辉等发现牛初乳提取物能显著性提高老年人体内血清中SOD活力，减少其脂质过氧化物和增强机体抗氧化力，具有一定的抗衰老功能。目前关于生物活性多肽的研究有很多，比如中国专利CN105254738A公布了一种来源于β-酪蛋白的乳源性生物活性多肽DELQDKIH，中国专利CN105254739A公布了一种来源于αs1-酪蛋白的乳源性生物活性多肽GTQYTD，中国专利CN105254740A公布了一种来源于αs2-酪蛋白的乳源性生物活性多肽NQFYQKF。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种生物活性多肽DKLAQ及其制备方法和应用。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：本专利技术第一方面，提供一种生物活性多肽DKLAQ，其氨基酸序列为Asp-Lys-Leu-Ala-Gln，如SEQIDNO：1所示。较优的，所述生物活性多肽来源于瑞士乳杆菌菌体蛋白。具体来源于LBH_0445|m.412LBH_0445|g.412ORFLBH_0445|g.412LBH_0445|m.412type:5prime_partiallen:383(+)LBH_0445:1-1149(+)蛋白，并且为此蛋白第311～315位的氨基酸残基。LBH_0445|m.412LBH_0445|g.412ORFLBH_0445|g.412LBH_0445|m.412type:5prime_partiallen:383(+)LBH_0445:1-1149(+)蛋白氨基酸序列如SEQIDNO：3所示。LBH_0445|m.412LBH_0445|g.412ORFLBH_0445|g.412LBH_0445|m.412type:5prime_partiallen:383(+)LBH_0445:1-1149(+)蛋白的氨基酸序列以及对应的核苷酸序列为既有技术，编码此蛋白第311～315位氨基酸残基的核苷酸片段能编码成熟的生物活性多肽DKLAQ。较优的，所述生物活性多肽具有抗氧化功能和抗衰老功能。本专利技术第二方面，提供了编码所述生物活性多肽DKLAQ的核苷酸片段，其序列为：5’-acaagcttgctcaag-3’，如SEQIDNO：2所示。本专利技术第三方面，提供了所述生物活性多肽DKLAQ的制备方法，可以通过基因工程的方法人工合成，可以从瑞士乳杆菌菌体通过细胞破碎分离纯化的方法直接获得，可以直接通过化学合成制备。本专利技术第四方面，提供了所述生物活性多肽DKLAQ在制备具有抗氧化功能的食品、保健品、药物或化妆品中的应用。本专利技术第五方面，提供了所述生物活性多肽DKLAQ在制备具有抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用。本专利技术第六方面，提供了所述生物活性多肽DKLAQ在制备同时具有抗氧化功能和抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用。具体而言，本专利技术的生物活性多肽DKLAQ可以用于制备减少自由基对皮肤伤害的化妆品、制备具有抗氧化和/或抗衰老的药物；并且由于本专利技术的生物活性多肽DKLAQ通过胃肠道降解后的产物仍旧具有生物活性，因此还可以用于制备酸奶等食品、抗氧化的保健品，以及口服的用于制备具有抗氧化和/或抗衰老的药物。本专利技术第七方面，提供了一种抗氧化产品，包括所述生物活性多肽DKLAQ或所述生物活性多肽DKLAQ的衍生物；所述的抗氧化产品包括抗氧化食品、抗氧化保健品、抗氧化药物或抗氧化化妆品；所述生物活性多肽DKLAQ的衍生物，是指在生物活性多肽DKLAQ的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、酯化或糖基化等修饰，得到的多肽衍生物。本专利技术第八方面，提供了一种抗衰老产品，包括所述生物活性多肽DKLAQ或所述生物活性多肽DKLAQ的衍生物；所述的抗衰老产品包括抗衰老食品、抗衰老保健品或抗衰老药物；所述生物活性多肽DKLAQ的衍生物，是指在生物活性多肽DKLAQ的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、酯化或糖基化等修饰，得到的多肽衍生物。本专利技术第九方面，提供了一种同时具有抗氧化功能和抗衰老功能的产品，包括所述生物活性多肽DKLAQ或所述生物活性多肽DKLAQ的衍生物；具有抗氧化功能和抗衰老功能的产品包括食品、保健品或药物；所述生物活性多肽DKLAQ的衍生物，是指在生物活性多肽DKLAQ的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物活性多肽DKLAQ，其特征在于，其氨基酸序列为Asp‑Lys‑Leu‑Ala‑Gln。

【技术特征摘要】
1.一种生物活性多肽DKLAQ，其特征在于，其氨基酸序列为Asp-Lys-Leu-Ala-Gln。2.根据权利要求1所述的一种生物活性多肽DKLAQ，其特征在于，所述生物活性多肽来源于瑞士乳杆菌菌体蛋白。3.编码权利要求1所述生物活性多肽DKLAQ的核苷酸片段，其特征在于，所述核苷酸片段的序列如SEQIDNO：2所示。4.如权利要求1所述生物活性多肽DKLAQ的制备方法，其特征在于，通过基因工程的方法人工合成，或瑞士乳杆菌菌体通过细胞破碎分离纯化的方法直接获得，或直接通过化学合成制备。5.如权利要求1所述生物活性多肽DKLAQ的应用，其特征在于，所述生物活性多肽DKLAQ在制备具有抗氧化功能的食品、保健品、药物或化妆品中的应用。6.如权利要求1所述生物活性多肽DKLAQ的应用，其特征在于，所述生物活性多肽DKLAQ在制备具有抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用。7.如权利要求1所述生物活性多肽DKLAQ的应用，其特征在于，所述生物活性多肽DKLAQ在制备具有抗氧化功能和抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用。8.一种抗氧化产品，其特征在于，包括如权利要求1所述生物活性多肽DKLAQ或所述生物活性多...

【专利技术属性】
技术研发人员：张少辉，李阜烁，占文静，陈静，李婉如，汪超，范梦珠，张伯宇，
申请(专利权)人：上海交通大学，浙江辉肽生命健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31