The invention belongs to the field of biotechnology, in particular to a breast cancer typing detection library kit based on Illumina platform, which comprises two box bodies and a flip-over cover connected with the box body, the two box bodies are A box body and B box body respectively; the first paper bracket is placed in the A box body, and the first paper bracket is provided with 20 reagent hole grooves and/or centrifugal tube for placing sample adding grooves; A second paper holder is placed inside, and six reagent hole grooves are arranged on the second paper holder. The kit has the characteristics of high accuracy, high sensitivity and strong stability, which can not only classify breast cancer expression profiles of fresh tissues, but also FFPE samples of breast cancer. It not only meets the requirements of detection sensitivity, but also saves a lot of capital, and has the characteristics of simple operation, which can not only bring considerable economic benefits, but also bring about considerable economic benefits. Achieve rapid detection.
【技术实现步骤摘要】
一种基于illumina平台的乳腺癌分型检测建库试剂盒
本专利技术属于生物
,具体涉及一种基于illumina平台的乳腺癌分型检测建库试剂盒。
技术介绍
目前乳腺癌在临床仍以患者年龄、原发瘤大小、临床分期、组织学分级、腋窝淋巴结转移和激素受体状态等指标,预测乳腺癌预后和指导选择治疗方案。但乳腺癌个体差异性较显著,上述标准无法进一步精确地预测预后,难以满足乳腺癌治疗方案“个体化”。比较分析乳腺正常组织和肿瘤的基因表达谱,可以明确mRNA水平的基因表达差异,从而根据基因表达情况预测患者的临床转归,采取相应诊疗措施。基于基因表达谱的各种乳腺癌标签表现出更加客观、准确的预后预测能力,具有良好的发展前景。自20世纪90年代中期基因芯片的出现,便被广泛用于癌症相关的基因表达谱分析,并用于预测人类癌症中复杂多样的生物学特征和临床特征。虽然基因表达谱分析被广泛应用于人类癌症的研究中,但在患者的临床治疗方面的应用却受到很大的局限。这是由于目前所获得的大部分临床病例肿瘤样本都是通过甲醛固定或石蜡包埋的方式储存,而很少通过低温冻存的方式保存。为了尝试利用这些丰富的肿瘤样本,研究者尝试通过RT-PCR或DASL等方式进行表达量的分析,但这些方法并不能够进行精确的定量,且只能对少数的已知转录本进行定量。近些年,随着二代测序的出现以及测序成本的不断下降,可以通过二代测序的方式分析FFPE样本中mRNA的表达水平,从而克服微阵列技术对于FFPE样本检测的限制,并对功能基因组学产生革命性的影响。传统的mRNA测序技术是通过oligodT反转录引物将mRNA反转录成cDNA,然后打断 ...
【技术保护点】
1.一种基于illumina平台的乳腺癌分型检测建库试剂盒,其特征在于:包括两个盒体以及与所述盒体相连的翻盖式盒盖,两个盒体分别为A盒体和B盒体;所述的A盒体内放置第一纸托,所述第一纸托上设置20个试剂孔槽和/或离心管放置加样槽,所述20个试剂孔槽和/或离心管放置加样槽内分别放入1管Bio‑B‑TVN引物、1管dNTP mix、1管5xFirst‑strand buffer、1管0.1M DTT、1管RNase inhibitor、1管SuperscriptⅢ逆转录酶、1管10x TaqDNA polymerase Buffer、1管TaqDNA polymerase、1管RNase H、1管Terminal transferase buffer、1管ddNTP、1管500mM EDTA溶液、1管100μM Primer‑A‑Random引物溶液、2管EB、3管Phusion Master Mix、1管Primer‑A引物、1管Primer‑B引物;B盒体内放置第二纸托,所述第二纸托上设置有6个试剂孔槽,分别放入1瓶无核酸酶水、1瓶Ampure XP磁珠、1瓶DyanabeadsMyo ...
【技术特征摘要】
1.一种基于illumina平台的乳腺癌分型检测建库试剂盒,其特征在于:包括两个盒体以及与所述盒体相连的翻盖式盒盖,两个盒体分别为A盒体和B盒体;所述的A盒体内放置第一纸托,所述第一纸托上设置20个试剂孔槽和/或离心管放置加样槽,所述20个试剂孔槽和/或离心管放置加样槽内分别放入1管Bio-B-TVN引物、1管dNTPmix、1管5xFirst-strandbuffer、1管0.1MDTT、1管RNaseinhibitor、1管SuperscriptⅢ逆转录酶、1管10xTaqDNApolymeraseBuffer、1管TaqDNApolymerase、1管RNaseH、1管Terminaltransferasebuffer、1管ddNTP、1管500mMEDTA溶液、1管100μMPrimer-A-Random引物溶液、2管EB、3管PhusionMasterMix、1管Primer-A引物、1管Primer-B引物;B盒体内放置第二纸托,所述第二纸托上设置有6个试剂孔槽,分别放入1瓶无核酸酶水、1瓶AmpureXP磁珠、1瓶DyanabeadsMyoneStreptavidinC1磁珠、1瓶0.1MNaOH、2瓶WashBuffer。2.根据权利要求1所述的一种基于illumina平台的乳腺癌分型检测建库试剂盒,其特征在于:所述Bio-B-TVN引物为含有19个oligoT的锚定引物及测序接头的逆转录引物序列。3.根据权利要求1所述的一种基于illumina平台的乳腺癌分型检测建库试剂盒,其特征在于:Primer-A的3...
【专利技术属性】
技术研发人员:张吉保,张明航,岳伟,
申请(专利权)人:江苏苏博生物医学科技南京有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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