一种室内筛选花生耐寒种质的方法技术

本发明专利技术公开了一种室内筛选花生耐寒种质的方法，包括以下步骤：（1）种子精选上；（2）沙子处理：选择河沙，经粗筛处理后，进行高压灭菌，蒸馏水完全浇透后置于2℃培养箱中进行预冷处理；（3）萌发处理：25℃下用蒸馏水浸种12h，水份充分浸没种子；（4）耐寒处理：浸种后的种子播种在饱含水份的沙子中，单粒播种，种子间距离大于3cm，种子覆盖沙子0.5cm~1cm 左右，2℃培养箱中培养2d~4d；（5）耐寒鉴定：转入25℃培养箱中正常发芽至7d，以发芽率和芽长/种长的比值作为耐寒性标准。本发明专利技术利用沙培法结合低温胁迫花生发芽，模拟花生萌发期受到的低温胁迫，对花生种质进行耐寒资源筛选，该方法接近田间生产。

A Method of Indoor Screening for Cold-tolerant Planting of Peanut

The invention discloses an indoor method for screening cold-tolerant peanut cultivation, which comprises the following steps: (1) seed selection; (2) sand treatment: selecting River sand, after rough screening treatment, high-pressure sterilization, complete watering of distilled water, and pre-cooling treatment in a incubator at 2 ~C; (3) germination treatment: soaking the seeds with distilled water at 25 ~C for 12 hours, and fully immersing the seeds with water; (4) tolerance. Cold treatment: After soaking, seeds are sown in saturated sand. The distance between seeds is more than 3 cm. The distance between seeds is 0.5 cm~1 cm. The seeds are covered with sand. The seeds are cultured in incubator at 2 C for 2 to 4 days. (5) Cold tolerance identification: the seeds are transferred to incubator at 25 C for normal germination to 7 days, and the ratio of germination rate and germination length to seed length is used as the criterion of cold tolerance. The invention utilizes the sand culture method combined with low temperature stress to simulate the low temperature stress during peanut germination, and screens the cold-tolerant resources of peanut germplasm. The method is close to field production.

【技术实现步骤摘要】
一种室内筛选花生耐寒种植的方法
本专利技术涉及一种花生选育方法，尤其是涉及一种室内筛选花生耐寒种质的方法。
技术介绍
花生是我国重要的油料作物和经济作物，并且花生在我国种植范围较广，北方已种植到黑龙江省第一积温带，然而在我国东北花生产区，5月播种遇寒流，低温天气易使花生发生大面积低温冷害而烂种，生理表现为代谢弱，生长缓慢，根系吸水减少，蒸腾作用减弱，导致补种或毁种，导致严重减产。所以为了减少花生播种后由于低温造成的损失，有必要通过品种筛选，找到具有播种后抵御极端天气的种质资源，为耐寒花生新品种选育提供依据。花生耐寒资源筛选最贴近生产的方法是在春季以早播试验进行，这样筛选出来的资源与生产实际相符合，但是受季节影响，每年只能在东北的春季方能开展，如果外界温度变化不稳定，试验结果也不同。因此，许多科研工作者采用室内水培方法进行耐寒资源筛选，该方法是采用低温培养箱、层析柜等仪器进行，然而，本课题组多年进行室内耐寒花生水培筛选，发现该方法重复性较差，获得的试验数据不稳定，并且与田间早播试验结果也存在较大差异。所以，急需寻找一种适合室内进行筛选花生耐寒种质的方法，加快耐寒花生新品种选育。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种室内筛选花生耐寒种质的方法，该方法利用沙培法结合低温胁迫花生发芽，模拟花生萌发期受到的低温胁迫，对花生种质进行耐寒资源筛选，该方法接近田间生产。为了解决现有技术存在的问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种室内筛选花生耐寒种质的方法，包括以下步骤：（1）种子精选：选择整齐一致、饱满度好，无损伤、无裂纹、无大小粒，色泽鲜艳的花生种仁作种子，种仁出芽率达95%以上；（2）沙子处理：选择河沙，经粗筛处理后，进行高压灭菌，蒸馏水完全浇透后置于2℃培养箱中进行预冷处理；（3）萌发处理：25℃下用蒸馏水浸种12h，水份充分浸没种子；（4）耐寒处理：浸种后的种子播种在饱含水份的沙子中，单粒播种，种子间距离大于3cm，种子覆盖沙子0.5cm~1cm左右，2℃培养箱中培养2d~4d；（5）耐寒鉴定：转入25℃培养箱中正常发芽至7d，以发芽率和芽长/种长的比值作为耐寒性标准。所述耐寒性标准为：发芽率在86%~100%时耐寒性最强，发芽率在61%~85%时耐寒性强，发芽率在46%~60%时耐寒性中等，发芽率在31%~45%时耐寒性弱，30%以下时发芽率耐寒性最弱；芽长/种长≥1.0耐寒性最强，1.0>芽长/种长≥0.5耐寒性强，0.5>芽长/种长≥0.1耐寒性弱，芽长/种长≤0.1耐寒性最弱。本专利技术所具有的优点与有益效果是：本专利技术一种室内筛选花生耐寒种质的方法，是由25℃下用蒸馏水浸种12h，而后转入2℃预冷的饱含水份的沙子容器中，2℃低温处理2d~4d，而后转入25℃培养箱中正常发芽至7d，以发芽率和芽长/种长的比值作为抗寒性标准，对花生萌发期的耐寒性进行鉴定。本专利技术由于是利用沙培法结合低温胁迫花生发芽，模拟花生萌发期受到的低温胁迫，对花生种质进行耐寒资源筛选，该方法接近田间生产。本专利技术通过两年早播试验结果，获得耐寒与不耐寒花生种质，采用水培法、沙培法和土培法进行对比试验，最终确定以沙培法进行室内筛选与早播试验结果接近，该方法最符合生产实际。具体实施方式为了进一步说明本专利技术，下面结合实施例对本专利技术进行详细地描述，但不能将它们理解为对本专利技术保护范围的限定。本专利技术一种室内筛选花生耐寒种质的方法，包括以下步骤：（1）种子精选：选择整齐一致、饱满度好，无损伤、无裂纹、无大小粒，色泽鲜艳的花生种仁作种子，种仁出芽率达95%以上；（2）沙子处理：选择河沙，经粗筛处理后，进行高压灭菌，蒸馏水完全浇透后置于2℃培养箱中进行预冷处理；（3）萌发处理：25℃下用蒸馏水浸种12h，水份充分浸没种子；（4）耐寒处理：浸种后的种子播种在饱含水份的沙子中，单粒播种，种子间距离大于3cm，种子覆盖沙子0.5cm~1cm左右，2℃培养箱中培养2d~6d；（5）耐寒鉴定：转入25℃培养箱中正常发芽至7d，以发芽率和芽长/种长的比值作为耐寒性标准。结合田间早播试验，明确花生耐寒标准。发芽率标准为：发芽率在86%~100%时耐寒性最强，发芽率在61%~85%时耐寒性强，发芽率在46%~60%时耐寒性中等，发芽率在31%~45%时耐寒性弱，30%以下时发芽率耐寒性最弱。芽长/种长标准为：芽长/种长≥1.0耐寒性最强，1.0>芽长/种长≥0.5耐寒性强，0.5>芽长/种长≥0.1耐寒性弱，芽长/种长≤0.1耐寒性最弱。田间试验：1、试验材料的田间重复性鉴定：供试材料38份（表1），试验地点在辽宁省风沙地改良利用研究所旱作农业基地（121°70′E，42°06′N）进行。设置不同播期，分别于2016年设置3次播期：4月15日、4月26日、5月5日，和2017年设置5次播期：4月24日、5月1日、5月8日、5月15日、5月19日，进行重复性验证。每份材料选30粒种子，单粒播种，穴距12cm，播种10d后分别进行调查，记录出苗数。结合两年早播试验结果，以5月1日至5月5日时间段为标准，此时-5cm地温，最低温度平均为9℃。2016年5月3日，-5cm地温最低温度为5℃；2017年5月5日，-5cm地温最低温度为4℃，以最后一次调查的出苗率为准，候选出处于不同耐寒指标的种质作为试验材料。表1早播供试的花生材料2、试验材料的室内不同方法筛选：选择田间候选的6份材料，采用水培、沙培和土培方法进行室内低温方法筛选。（1）试验品种挑选整齐一致、饱满度好，无损伤、无裂纹、无大小粒，色泽鲜艳的花生种仁作种子，籽仁出芽率达95%以上，每个品种选择30粒种子，3次重复，25℃培养箱下用蒸馏水浸种12h，以水没过种子为宜。（2）预处理：设置低温培养箱温度为2℃，放入充足的蒸馏水备用，同时用于水培法。沙子处理：选择河沙，经粗筛处理后，进行高压灭菌，置于塑料盒中，蒸馏水完全浇透后，置于2℃培养箱中进行预冷。土壤处理：选择耕层土，经粗筛处理后，进行高压灭菌，置于塑料盒中，处理方法同沙子，置于2℃培养箱中进行预冷。（3）不同处理下播种方法：水培法——将浸种后的种子放入铺一层滤纸的培养皿中，倒入预冷的蒸馏水，不超过种子的1/2位置，盖好培养皿。沙培法——将浸种后的种子放入预处理的沙子中，单粒播种，种子间距离大于3cm，种子覆盖沙子0.5cm~1cm左右，盖好塑料盖。土培法——将浸种后的种子放入预处理的土壤中，单粒播种，种子间距离大于2cm，种子覆盖沙子1cm左右，盖好塑料盖。（4）胁迫处理方法：将以上不同处理的花生置于2℃培养箱中，分别低温胁迫2d、4d和6d，最后转入25℃中正常发芽7d，分别测定发芽数、芽长和种长。（5）不同处理方法发芽率结果比较：25℃中正常发芽7d后，对低温胁迫2d和4d的发芽数、芽长和种长进行测量，整理3次重复，统计结果见表2和表3，需要说明的是低温胁迫6d处理后，多数花生出现烂种现象，所以这里不做统计。表2不同试验方法下低温胁迫2d和4d下发芽率表2结果表明，与田间出苗率为标准，从水培、沙培和土培三种方法变化趋势来看，水培芽率一直较高，难以区分不耐寒资源；土培芽率来看，发芽率普遍较低，难以区分耐寒资源，以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种室内筛选花生耐寒种质的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）种子精选：选择整齐一致、饱满度好，无损伤、无裂纹、无大小粒，色泽鲜艳的花生种仁作种子，种仁出芽率达95%以上；（2）沙子处理：选择河沙，经粗筛处理后，进行高压灭菌，蒸馏水完全浇透后置于2℃培养箱中进行预冷处理；（3）萌发处理：25℃下用蒸馏水浸种12h，水份充分浸没种子；（4）耐寒处理：浸种后的种子播种在饱含水份的沙子中，单粒播种，种子间距离大于3cm，种子覆盖沙子0.5cm~1cm 左右，2℃培养箱中培养2d~4d；（5）耐寒鉴定：转入25℃培养箱中正常发芽至7d，以发芽率和芽长/种长的比值作为耐寒性标准。

【技术特征摘要】
1.一种室内筛选花生耐寒种质的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）种子精选：选择整齐一致、饱满度好，无损伤、无裂纹、无大小粒，色泽鲜艳的花生种仁作种子，种仁出芽率达95%以上；（2）沙子处理：选择河沙，经粗筛处理后，进行高压灭菌，蒸馏水完全浇透后置于2℃培养箱中进行预冷处理；（3）萌发处理：25℃下用蒸馏水浸种12h，水份充分浸没种子；（4）耐寒处理：浸种后的种子播种在饱含水份的沙子中，单粒播种，种子间距离大于3cm，种子覆盖沙子0.5cm~1cm左右，2℃培养箱中培养2d~4d；（5）耐寒鉴...

【专利技术属性】
技术研发人员：于树涛，孙泓希，于国庆，史普想，王虹，任亮，尤淑丽，崔雪艳，赵立仁，王海新，于洪波，
申请(专利权)人：辽宁省风沙地改良利用研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁,21