多粘类芽孢杆菌及其芽孢悬浮液、微生物育苗基质及其制备方法技术

技术编号:19925943 阅读:29 留言:0更新日期:2018-12-29 01:57
本发明专利技术提供了一种多粘类芽孢杆菌,它为多粘类芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa Pp‑HG15‑7,保藏号为CGMCC No.14470。本发明专利技术提供了一种多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,它包括无菌硫酸镁溶液和均匀分散在该无菌硫酸镁溶液中的上述多粘类芽孢杆菌的芽孢。本发明专利技术还提供一种含有上述多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液的微生物育苗基质及其制备方法。上述多粘类芽孢杆菌及其芽孢悬浮液可以防止疫霉菌,并防止病原菌侵入,因此,上述微生物育苗基质可以提高蔬菜的免疫能力、防治疫病的发生,促进植株生长,并显著提高根系活力,有利于提高产量。

【技术实现步骤摘要】
多粘类芽孢杆菌及其芽孢悬浮液、微生物育苗基质及其制备方法
本专利技术属于微生物领域,具体涉及一种多粘类芽孢杆菌及其芽孢悬浮液、微生物育苗基质及其制备方法。
技术介绍
植物根际促生细菌(PlantGrowthPromotingRhizobacteria,简称PGPR)是指存在于植物根际环境中,通过产生植物激素、溶解无机磷等直接作用和竞争生态位、诱导植物系统抗性等间接作用促进植物生长的一类有益细菌。近年来大量研究表明,PGPR菌株能在植物根系及根际土壤有效定殖,具有显著的促生、防病和增产效果、同时调节植物根际土壤微生态环境、缓解生态污染等特性,成为有机生态农业可持续发展的有效途径之一,应用前景十分广阔。疫病是由假菌界卵菌门疫霉属菌物引起的危害严重的土传病害。辣椒疫病是由Phytophthoracapsici引起的一种毁灭性土传病害。该病自1918年首次在美国发现以来,现已在世界各辣椒种植区普遍发生。目前每年因辣椒疫病造成损失20%~30%,严重时高达70%~80%,甚至全田绝收,是辣椒生产上严重的病害之一。因其病原菌在土壤中存活时间长,并且随着作物连作病菌数逐年增加,危害越来越严重。目前在生产上尚缺乏有效的辣椒疫病抗病品种,辣椒疫病的防治主要依赖于化学防治,但病原菌对绝大多数化学农药已产生抗药性,因而目前生产上还缺乏有效的防治措施。有鉴于此,近年来利用拮抗微生物来防治辣椒疫病的研究比较活跃。利用有益PGPR菌株防治植物疫病,提高产量和品质,提高植物免疫能力,并调节土壤微生态是农业可持续发展的新途径。育苗基质具有省时、省工、缓苗快等优点被广泛应用于蔬菜作物栽培。由于育苗基质会在移栽时随植株一起移栽至大田,因此在育苗基质中添加具有促生防病效果的微生物可以使微生物提早定殖在植物根际,并发挥促生防病的功效。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术确有必要提供一种多粘类芽孢杆菌及其芽孢悬浮液、微生物育苗基质及其制备方法,以克服上述问题。为此,本专利技术提供一种多粘类芽孢杆菌,它为多粘类芽孢杆菌PaenibacilluspolymyxaPp-HG15-7,已于2017年07月27日,保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏号为CGMCCNo.14470。菌株的分类命名为多粘类芽孢杆菌PaenibacilluspolymyxaPp-HG15-7。其中,该多粘类芽孢杆菌Pp-HG15-7菌株是从小麦根际分离、筛选出来的,并且可以采用TSA培养基进行培养。本专利技术提供一种多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,它包括无菌硫酸镁溶液和均匀分散在该无菌硫酸镁溶液中的上述的多粘类芽孢杆菌的芽孢。基于上述,在所述的多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液中,所述多粘类芽孢杆菌的芽孢的浓度为(1~2)×108CFU/mL。基于上述,所述多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液主要是通过以下步骤制得:将多粘类芽孢杆菌菌种接种到发酵培养基上,并在28℃~32℃发酵培养78~90h,得到多粘类芽孢杆菌发酵液;对所述多粘类芽孢杆菌发酵液进行离心处理,得到多粘类芽孢杆菌的芽孢;采用0.05~0.1mol/L的无菌硫酸镁溶液稀释所述多粘类芽孢杆菌的芽孢,获得所述多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液。基于上述,所述多粘类芽孢杆菌菌种是由从小麦根际分离、筛选出来的多粘类芽孢杆菌菌株经过TSA培养基培养得到的。基于上述,所述发酵培养基的配方包括:豆渣22~28g、NaCl0.4~0.6g、0.25mol/LKCl8~12mL、2mol/LMgCl24~6mL、1mol/L葡萄糖18~22mL和蒸馏水1000mL,且所述发酵培养基的pH值为6.8~7.2。本专利技术还提供一种微生物育苗基质,它包括均匀混合的蔬菜育苗基质和上述的多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,所述蔬菜育苗基质和所述多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液的质量比为(8~12):1。基于上述,所述蔬菜育苗基质包括以下质量份的组分:草炭土1~3份、蛭石0.5~1.5份、珍珠岩0.5~1.5份和营养液0.5~1.5份。该蔬菜育苗基质中包含营养液,且该营养液的组分与所述发酵培养基的组分基本相同,不仅可以为后续培育的蔬菜苗提供养分,还为该蔬菜育苗基质中的多粘类芽孢杆菌的芽孢的存活和繁殖提供条件。基于上述,所述营养液包括以下组分:豆渣22~28g、NaCl0.4~0.6g、0.25mol/LKCl8~12mL、2mol/LMgCl24~6mL和水1000mL。本专利技术还提供一种上述微生物育苗基质的制备方法,其包括以下步骤:从小麦根际分离、筛选出来的多粘类芽孢杆菌菌株经过TSA培养基培养得到的多粘类芽孢杆菌菌种;将所述多粘类芽孢杆菌菌种接种到发酵培养基上,并在28℃~32℃发酵培养78~90h,得到多粘类芽孢杆菌发酵液;对所述多粘类芽孢杆菌发酵液进行离心处理,得到多粘类芽孢杆菌的芽孢;采用0.05~0.1mol/L的无菌硫酸镁溶液稀释所述多粘类芽孢杆菌的芽孢,获得所述多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,其中,所述发酵培养基的配方包括:豆渣22~28g、NaCl0.4~0.6g、0.25mol/LKCl8~12mL、2mol/LMgCl24~6mL、1mol/L葡萄糖18~22mL和蒸馏水1000mL,且所述发酵培养基的pH值为6.8~7.2;将所述多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液与所述蔬菜育苗基质按照为1:(8~10)的质量比均匀混合,制得所述微生物育苗基质。本专利技术提供的多粘类芽孢杆菌Pp-HG15-7能强烈抑制疫霉菌的菌丝生长,抑制游动孢子囊和游动孢子的形成,抑制游动孢子囊和休止孢子的萌发;在辣椒、黄瓜、番茄等蔬菜生长过程中在植物根际具有良好的定殖能力,抑制根际土壤中的疫霉菌的浓度并防止病原菌侵入,因此,本专利技术提供的多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液具有良好的抑制蔬菜根际土壤中的疫霉菌的浓度并防止病原菌侵入的作用,从而使得本专利技术提供的含有该多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液的微生物育苗基质进行蔬菜育苗可以提高蔬菜的免疫能力、防治蔬菜疫病的发生,调节试验田中蔬菜根际土壤微生态以促进植株生长,并显著提高根系活力,有利于提高产量。另外,上述多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液在制备过程中,所述多粘类芽孢杆菌Pp-HG15-7的菌种采用所述发酵培养基中在28℃~32℃发酵培养78~90h,即可获得大量的多粘类芽孢杆菌Pp-HG15-7的芽孢,所以,含有多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液的蔬菜育苗基质的制备方法简单,易于操作。附图说明图1是本专利技术实施例1提供的多粘类芽孢杆菌Pp-HG15-7菌体的形态图。图2是根据16SrDNA测序结果构建的系统发育树,分支上的数字代表置信度。图3是在试验条件(1)的辣椒苗培育过程中,育苗基质对辣椒苗的影响对比照片图。图4是在试验条件(1)的辣椒苗培育过程中,育苗基质对辣椒苗期根系发育的对比照片图。图5是在试验条件(1)的辣椒苗培育过程中,育苗基质对辣椒疫病的防治效果对比照片图。图6是在试验条件(2)的栽培管理过程中,试验田在辣椒生育期的辣椒根际土壤中脲酶活性的对比图。图7是在试验条件(2)的栽培管理过程中,试验田在辣椒生育期的辣椒根际土壤中磷酸酶活性的对比图。图8是在试验条件(2)的栽培管理过程中,试验田在辣椒生育期的辣椒根际土壤中蔗糖酶活性的对比图。图9是在试验条件(本文档来自技高网
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【技术保护点】
1. 一种多粘类芽孢杆菌,其特征在于,它为多粘类芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa Pp‑HG15‑7,已于2017年07月27日,保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏号为CGMCC No.14470。

【技术特征摘要】
1.一种多粘类芽孢杆菌,其特征在于,它为多粘类芽孢杆菌PaenibacilluspolymyxaPp-HG15-7,已于2017年07月27日,保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏号为CGMCCNo.14470。2.一种多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,其特征在于,它包括无菌硫酸镁溶液和均匀分散在该无菌硫酸镁溶液中的权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌的芽孢。3.根据权利要求2所述的多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,其特征在于,所述多粘类芽孢杆菌的芽孢的浓度为(1~2)×108CFU/mL。4.根据权利要求2或3所述的多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,其特征在于,它主要由以下步骤制得:将多粘类芽孢杆菌菌种接种到发酵培养基上,并在28℃~32℃发酵培养78~90h,得到多粘类芽孢杆菌发酵液;对所述多粘类芽孢杆菌发酵液进行离心处理,得到多粘类芽孢杆菌的芽孢;采用0.05~0.1mol/L的无菌硫酸镁溶液稀释所述多粘类芽孢杆菌的芽孢,获得所述多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液。5.根据权利要求4所述的多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,其特征在于,所述多粘类芽孢杆菌菌种是由从小麦根际分离、筛选出来的多粘类芽孢杆菌菌株经过TSA培养基培养得到的。6.根据权利要求4所述的多粘类芽孢杆菌芽孢悬浮液,其特征在于,所述发酵培养基的配方包括:豆渣22~28g、NaCl0.4~0.6g、0.25mol/LKCl8~12mL、2mol/LMgCl24~6mL、1mol/L葡萄糖18~22mL和蒸馏水1000mL,且所述发酵培养基的pH值为6.8~7.2。7.一种微生物育...

【专利技术属性】
技术研发人员:申顺善朴凤植张涛张忠良
申请(专利权)人:河南农业大学
类型:发明
国别省市:河南,41

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