一种索拉菲尼固体脂质纳米粒及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了索拉菲尼脂质纳米粒及其制备方法，所述的外壳为磷脂薄膜，所述的核为索拉菲尼和吲哚箐绿，其中所述脂溶性索拉菲尼封装在所述磷脂双分子层疏水区域中，所述亲水性吲哚箐绿位于所述磷脂双分子层形成的脂质体囊泡中；所述制备方法包括：称取索拉菲尼与磷脂，加入有机溶剂溶解，得到有机相后去除有机溶剂，得到内含索拉菲尼的磷脂薄膜；称取吲哚箐绿，溶解于去离子水中得到水相；将所得的水相加入到所得的磷脂薄膜中，搅拌混匀后经挤压过滤即得。该索拉菲尼脂质纳米粒将索拉菲尼和吲哚箐绿共同装载到一个磷脂膜纳米载体中，这样既可以改善索拉菲尼的毒性和溶解性，又能够增强吲哚箐绿的耐光性和肿瘤聚集的性能。

【技术实现步骤摘要】
一种索拉菲尼固体脂质纳米粒及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及一种索拉菲尼脂质纳米粒及其制备方法与应用。
技术介绍
截止到2017年以前，索拉菲尼是临床上唯一一种通过美国食品药品管理局认证的用来延长晚期细胞性肝癌患者寿命的药物，索拉菲尼作为一种联芳结构的多蛋白激酶抑制剂，一方面可以靶向作用于Ras的下游Raf/serine(丝氨酸)/threonine(苏氨酸)激酶中的Raf家族中Raf1和BRaf两种亚型，Ras是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase)信号通路上调控Raf/Mek/Erk通路活性的关键分子，这些激酶磷酸化后最终可以通过上调一系列与细胞增殖相关的基因促进细胞增殖，索拉菲尼可以通过靶向Raf家族中的两种亚型来抑制肿瘤细胞的增殖；另一个方面索拉菲尼还可以作用于血管内皮生长因子受体2(VascularEndothelialGrowthFactorReceptor2,VEGFR-2)、血管内皮生长因子受体3(VascularEndothelialGrowthFactorReceptor3,VEGFR-3)和血小板源性生长因子受体β(platelet-derivedgrowthfactor,PDGFR-β)抑制肿瘤新生血管的生成。索拉菲尼作为晚期细胞性肝癌患者们的首要选择，患者们在接受索拉菲尼治疗的同时不得不同时面对索拉菲尼自身的缺陷，第一，索拉菲尼的溶解性极差，在水中的溶解度不超过10μg/mL，这极大的影响了患者服用索拉菲尼的用药效率。第二，索拉菲尼的细胞毒性很大，接受索拉菲尼治疗的患者都要忍受包括腹泻、痢疾、体重减少、高血压、厌食、变声、恶心呕吐等副作用对患者身体的伤害。第三，索拉菲尼作为一种小分子靶向药物，肿瘤细胞极易对其产生强烈的耐药性，这也就导致了患者接受索拉菲尼治疗后肿瘤的体积并不会显著减少，并且只能将患者的平均寿命对比安慰剂治疗延长三个月。索拉菲尼尽管存在如此多的缺点，可是到目前为止，在临床上仍然找不到一种可以替代索拉菲尼的药物用来系统的治疗和延长晚期肝细胞癌症患者的寿命，与此同时，临床上也没有提出任何一种如何改善索拉菲尼缺点的办法。因此，怎样改善以索拉菲尼的毒性，增强索拉菲尼的溶解性和治疗效果仍然是当前迫在眉睫需要解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中的不足，提供了一种索拉菲尼脂质纳米粒及其制备方法，该索拉菲尼脂质纳米粒将索拉菲尼和吲哚箐绿共同装载到一个磷脂膜纳米载体中，这样既可以改善索拉菲尼的毒性和溶解性，又能够增强吲哚箐绿的耐光性和肿瘤聚集的性能。基于脂质体独特的磷脂双分子层囊泡结构，它可以同时将水溶性吲哚箐绿和脂溶性索拉菲尼分别的封装在双分子层内部和脂质双分子层中间，脂质体可以在将水溶性的ICG装载入脂质体囊泡中的同时将疏水性小分子药物索拉菲尼装入到磷脂双分子层疏水区域中。本专利技术是这样实现的：本专利技术的目的之一在于提供一种索拉菲尼脂质纳米粒，由核和外壳构成，所述的外壳为磷脂薄膜，所述的核为索拉菲尼和吲哚箐绿，其中所述脂溶性索拉菲尼封装在所述磷脂双分子层中间，所述亲水性吲哚箐绿位于所述磷脂双分子层形成的脂质体囊泡中。本专利技术的目的之二在于提供一种索拉菲尼脂质纳米粒的制备方法，具体包括如下步骤：步骤1、称取索拉菲尼与磷脂，加入有机溶剂溶解，得到有机相后去除有机溶剂，得到内含索拉菲尼的磷脂薄膜；步骤2、称取吲哚箐绿，溶解于去离子水中得到水相；步骤3、将步骤2所得的水相加入到步骤1所得的磷脂薄膜中，搅拌混匀后经过滤，即得该索拉菲尼脂质纳米粒。本专利技术的目的之三在于提供所述索拉菲尼脂质纳米粒在制备治疗肝癌药物中的应用。利用脂质体将索拉菲尼同吲哚箐绿共同装载进去进行晚期细胞性肝癌的治疗：本专利技术的索拉菲尼-吲哚箐绿-脂质体可以显著的减小索拉菲尼的细胞毒性。且与索拉菲尼单独疗法比，可以显著减少肝癌肿瘤体积大小。本专利技术具有的有益效果是：1、本专利技术提供的一种索拉菲尼脂质纳米粒，脂质体独特的磷脂双分子层囊泡结构，它可以同时将水溶性的ICG装载入脂质体囊泡中的同时将疏水性小分子药物索拉菲尼装入到磷脂双分子层疏水区域中，本专利技术索拉菲尼和吲哚箐绿共同装载在一个磷脂纳米载体中，这样既可以改善索拉菲尼的毒性和溶解性，又能够增强吲哚箐绿的耐光性和肿瘤聚集的性能，具体地：(1)光热治疗，是一种将光能通过特殊的染料分子转换成热能的新型肿瘤治疗手段，可以协同索拉菲尼一起对晚期细胞性肝癌进行治疗减少肿瘤体积，吲哚箐绿(ICG)是唯一通过欧洲药品管理局和美国食品药品监督局的两亲性荧光染料。当受到近红外激光照射时，ICG分子吸收荧光能量到达高振动能级的激发态，然后通过钝化作用将能量以热量的形式释放出去，产生局部高温杀死肿瘤细胞。鉴于索拉菲尼在治疗晚期细胞性肝癌过程中，无法有效地减小肿瘤体积的大小，本专利技术选用光热治疗这种无痛无副作用的新兴治疗手段协同索拉菲尼一同治疗晚期细胞性肝癌，光热治疗与传统的手术、化疗或放疗治疗手段相比，具有副作用低，针对性强等许多优点。(2)鉴于索拉菲尼的溶解性差，细胞毒性高，吲哚箐绿的学习循环性差等等一系列缺点，我们有必要选择一种药物递送系统同时转载水溶性的吲哚箐绿和脂溶性的索拉菲尼，使之同时聚集在肿瘤细胞，我们选择脂质体递送系统的优点在于：①脂质体是已经通过FDA的药物递送系统，我们不需要考虑其毒性与代谢的性质，可以马上用于临床治疗；②脂质体可以同时装载脂溶性的水溶性的药物，通过控制合成的脂质体粒径可以通过EPR效应使脂质体被动靶向到肿瘤区域。2、本专利技术提供的一种索拉菲尼脂质纳米粒的制备方法，先将脂溶性的索拉非尼与磷脂，在有机溶剂溶解作用下得到内含索拉菲尼的磷脂薄膜，再将亲水性的吲哚箐绿加入到磷脂双分子层形成的脂质体囊泡中从而完美解决现有技术的缺陷。3、本专利技术提供的索拉菲尼脂质纳米粒可以显著的减小索拉菲尼的细胞毒性。且与索拉菲尼单独疗法相比，可以显著减少肝癌肿瘤体积大小；索拉菲尼脂质纳米粒不仅可以改善ICG在周围环境中的稳定性，而且可以防止ICG与血浆蛋白结合，从而改善血液循环时间。附图说明图1为本专利技术实验例1提供的索拉菲尼脂质纳米粒的透射电镜(TEM)图；图2为本专利技术实验例1提供的索拉菲尼脂质纳米粒的直径和多分散指数(PDI)图；图3为本专利技术实验例1提供的索拉菲尼脂质纳米粒的特征性光谱图；图4为本专利技术实验例1提供的索拉菲尼脂质纳米粒吸光度和荧光强度图，其中4(A)图为吸光度图；4(B)图为荧光强度图；图5为本专利技术实施例提供的不同浓度条件下索拉菲尼的包封率示意图；图6为本专利技术实验例2提供的近红外(808nm，2W/cm2)辐照下游离SF、游离ICG和SILS的温升特性；图7为本专利技术实验例2提供的热像图；图8中(A)为5次激光照射下游离ICG和SF-ICG-liposomes的温度变化图；(B)为SF-ICG-liposomes经激光照射(808nm，2W/cm2，5min)以及不经过激光照射时的SF释放谱；图9中(A)为不同剂量SF和ICG与Hep3B孵育后(pbs组，吲哚箐绿组，索拉菲尼组和本专利技术的索拉菲尼-吲哚箐绿-脂质体组)细胞活力的测定；(B)为激光照射前后细胞活力的测定图；图10为本专利技术探究小鼠本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种索拉菲尼脂质纳米粒，由核和外壳构成，其特征在于，所述的外壳为磷脂薄膜，所述的核为索拉菲尼和吲哚箐绿，其中所述脂溶性索拉菲尼封装在所述磷脂双分子层疏水区域中，所述亲水性吲哚箐绿位于所述磷脂双分子层形成的脂质体囊泡中。

【技术特征摘要】
1.一种索拉菲尼脂质纳米粒，由核和外壳构成，其特征在于，所述的外壳为磷脂薄膜，所述的核为索拉菲尼和吲哚箐绿，其中所述脂溶性索拉菲尼封装在所述磷脂双分子层疏水区域中，所述亲水性吲哚箐绿位于所述磷脂双分子层形成的脂质体囊泡中。2.如权利要求1所述的索拉菲尼脂质纳米粒，其特征在于，各组分的重量比为，索拉菲尼：吲哚箐绿：磷脂＝1:1-8：20。3.如权利要求1所述的索拉菲尼脂质纳米粒，其特征在于，所述磷脂薄膜的原料组分包括二棕榈酸磷脂酰胆碱DPPC、胆固醇和DSPE-PEG2000。4.如权利要求3所述的索拉菲尼脂质纳米粒，其特征在于，所述各组分的重量比为，胆固醇：二棕榈酸磷脂酰胆碱DPPC＝1:1-8；DSPE-PEG2000：二棕榈酸磷脂酰胆碱DPPC＝1:10。5.一种权利要求1-4任一所述索拉菲尼脂质纳米粒的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：步骤1、称取索拉菲尼与磷脂，加入有机溶剂溶解，得到有机相后去除有机溶剂，得到内含索拉菲尼的磷脂薄膜；步...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐祖顺，贺乾元，杨盛力，
申请(专利权)人：湖北大学，华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：湖北,42