一种植物通用型增殖培养基及组织培养方法技术

本发明专利技术提供了一种植物通用型增殖培养基及主要基于该通用型增殖培养基的植物组织培养方法，属于林木繁殖技术领域。本发明专利技术所述植物通用型增殖培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/L，6‑BA 1.0～1.5mg/L和NAA 0.015mg/L，所述植物通用型增殖培养基的pH 5.8～6.0。利用该植物通用型增殖培养基，在7～10d内完成一次增殖，且增殖系数为6～8，显著缩短了增殖培养时间，提高了增殖培养效率。

【技术实现步骤摘要】
一种植物通用型增殖培养基及组织培养方法
本专利技术属于林木繁殖
，具体涉及一种植物通用型增殖培养基及组织培养方法。
技术介绍
植物的组织培养是根据植物细胞全能性理论，近几十年来发展较快的一项无性快繁新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。但是在进行增殖时，往往以20～30d甚至更长的时间为一个增殖周期，增殖系数也较低。目前并没有一种可以通用型增殖培养基既可以缩短增殖周期，还可以提高增殖系数。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种植物通用型增殖培养基以及基于该培养基的植物组织培养方法，缩短增殖培养时间到7～10天，增殖系数达6～8，且增殖不定芽生长发育正常。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种植物通用型增殖培养基，所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/L，6-BA1.0～1.5mg/L和NAA0.015mg/L，所述植物通用型增殖培养基的pH值为5.8～6.0。本专利技术提供了一种基于上述植物通用型增殖培养基的植物组织培养方法，包括以下步骤：1)选植物幼嫩组织为外植体，消毒后得消毒外植体；2)将步骤1)得到的所述消毒外植体接种到分化初始培养基上进行分化培养，得分化不定芽；所述分化培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/L，6-BA0.5mg/L和NAA0.1mg/L；3)将步骤2)得到的所述分化不定芽接种到上述技术方案所述增殖培养基上进行增殖培养，得增殖不定芽；4)将步骤3)得到的所述增殖不定芽接种到生根培养基上进行生根培养；所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.03～0.08g/L，IBA0.3～0.7mg/L和NAA0.1mg/L。优选的，步骤1)所述植物包括构属、鹅掌楸属和杨属黑杨派。优选的，步骤1)所述幼嫩组织包括幼嫩顶芽或侧芽。优选的，步骤2)所述分化培养的培养温度为25±2℃，光照强度为1000～1500lx，光照时间为7～13h/d，空气湿度为75～80％。优选的，所述分化培养的培养时间为25～35d。优选的，步骤3)所述增殖培养的培养温度为25±2℃，光照强度为1000～1500lx，光照时间为7～13h/d，空气湿度为75～80％。优选的，所述增殖培养的时间为5～9d。优选的，步骤4)所述生根培养的培养温度为25±2℃，光照强度为1000～1500lx，光照时间为7～13h/d，空气湿度为75～80％。优选的，所述生根培养的时间为36～45d。本专利技术提供了一种植物通用型增殖培养基，在本专利技术实施例中，利用所述增殖培养基进行构属、鹅掌楸属和杨属黑杨派的增殖培养时，可以把增殖培养时间缩短到7～10天，增殖系数达6～8，显著提高了增殖系数，缩短增殖培养时间。附图说明图1为利用本专利技术所述增殖培养基增殖构树组培苗结果图；图2为利用常规增殖培养基增殖构树组培苗结构图。具体实施方式本专利技术提供了一种植物通用型增殖培养基，所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/L，6-BA1.0～1.5mg/L和NAA0.015mg/L，所述植物通用型增殖培养基的pH值为5.8～6.0。在本专利技术所述植物通用型增殖培养基中包含卡拉胶，所述卡拉胶在所述增殖培养基中的浓度优选为6.5～9.4g/L，更优选为7.2～8.5g/L，最优选为8g/L。本专利技术所述卡拉胶可使培养基凝固并且提高培养基透明度。本专利技术对所述卡拉胶的来源并没有特殊限定，利用本领域的常规组织培养用卡拉胶即可。在本专利技术所述植物通用型增殖培养基中包含蔗糖，所述蔗糖在所述增殖培养基中的浓度优选为35～48g/L，更优选为38～42g/L，最优选为40g/L。本专利技术所述蔗糖提供植物生长糖类营养。本专利技术对所述蔗糖的来源并没有特殊限定，利用本领域的常规市售产品即可。在本专利技术所述植物通用型增殖培养基中包含肌醇，所述肌醇在所述增殖培养基中的浓度优选为0.026～0.055g/L，更优选为0.034～0.045g/L，最优选为0.04g/L。本专利技术所述肌醇可以参与植物碳水化合物等生理代谢过程。本专利技术对所述肌醇的来源并没有特殊限定，利用本领域常规市售产品即可。在本专利技术所述植物通用型增殖培养基中包含6-BA植物激素，所述6-BA在所述增殖培养基中的浓度优选为1.1～1.4mg/L，更优选为1.2～1.3mg/L，最优选为1.25mg/L。本专利技术所述6-BA可以提高组培增殖系数。本专利技术对所述6-BA的来源并没有特殊限定，利用本领域常规市售产品即可。在本专利技术所述植物通用型增殖培养基中包含NAA植物激素，所述NAA辅助提高组培增殖系数。本专利技术对所述NAA的来源并没有特殊限定，利用本领域常规市售产品即可。在本专利技术中，较高的6-BA/NAA外源植物激素比例有利于提高增殖系数，该配方综合成分缩短了增殖培养时间。本专利技术提供了一种基于上述植物通用型增殖培养基的植物组织培养方法，包括以下步骤：1)选植物幼嫩组织为外植体，消毒后得消毒外植体；2)将步骤1)得到的所述消毒外植体接种到分化初始培养基上进行分化培养，得分化不定芽；所述分化初始培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/L，6-BA0.5mg/L和NAA0.1mg/L；3)将步骤2)得到的所述分化不定芽接种到上述技术方案所述增殖培养基上进行增殖培养，得增殖不定芽；4)将步骤3)得到的所述增殖不定芽接种到生根培养基上进行生根培养；所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.03～0.08g/L，IBA0.3～0.7mg/L和NAA0.1mg/L。在本专利技术所述植物组织培养方法中，选植物幼嫩组织为外植体，消毒后得消毒外植体。本专利技术所述植物优选包括构属、鹅掌楸属和杨属黑杨派。本专利技术所述幼嫩组织优选包括幼嫩顶芽或侧芽，本专利技术对所述幼嫩组织的来源并没有特殊限定。本专利技术对所述消毒的方法并没有特殊限定，优选用流水冲洗10分钟，洗衣粉液浸泡5分钟，用无菌水清洗3次，在70％酒精中浸泡1分钟，0.1％升汞消毒4分钟，无菌水冲洗3～5次。得消毒外植体后，本专利技术将所述消毒外植体接种到分化初始培养基上进行分化培养，得分化不定芽；所述分化初始培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物通用型增殖培养基，所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/L，6‑BA 1.0～1.5mg/L和NAA 0.015mg/L，所述植物通用型增殖培养基的pH值为5.8～6.0。

【技术特征摘要】
1.一种植物通用型增殖培养基，所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/L，6-BA1.0～1.5mg/L和NAA0.015mg/L，所述植物通用型增殖培养基的pH值为5.8～6.0。2.基于权利要求1所述植物通用型增殖培养基的植物组织培养方法，包括以下步骤：1)选植物幼嫩组织为外植体，消毒后得消毒外植体；2)将步骤1)得到的所述消毒外植体接种到分化初始培养基上进行分化培养，得分化不定芽；所述分化初始培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.02～0.06g/L，6-BA0.5mg/L和NAA0.1mg/L；3)将步骤2)得到的所述分化不定芽接种到权利要求1所述增殖培养基上进行增殖培养，得增殖不定芽；4)将步骤3)得到的所述增殖不定芽接种到生根培养基上进行生根培养；所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，还包括：卡拉胶6.0～10.0g/L，蔗糖32.0～50.0g/L，肌醇0.03～0.08g/L，IBA0.3～0.7mg/L和NAA0....

【专利技术属性】
技术研发人员：李彦强，刘杰，吴照祥，刘立盘，钟永达，刘腾云，余发新，
申请(专利权)人：江西省科学院生物资源研究所，
类型：发明
国别省市：江西,36