米蛋白肽-钙螯合物的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种米蛋白肽‑钙螯合物的制备方法，是以米蛋白为原料，经碱性蛋白酶水解后获得米蛋白肽水解液，米蛋白肽水解液中的多肽冷冻干燥后，与钙螯合反应得到米蛋白肽‑钙螯合物。本发明专利技术以大米蛋白为原料，使米蛋白肽与钙离子螯合，利用了大米蛋白肽利于人体吸收，能够促进小肠对钙的吸收并在体内蓄积，从而提高钙的吸收利用率，避免钙离子在碱性的肠道环境产生沉淀而损失，本发明专利技术的米蛋白肽钙螯合物的消化吸收率及保留率均高于有机钙及碳酸钙。

【技术实现步骤摘要】
米蛋白肽-钙螯合物的制备方法
本专利技术属于食品加工领域，涉及一种米蛋白肽-钙螯合物的制备方法。
技术介绍
米蛋白是一种营养价值极高的谷类蛋白，其氨基酸组成较为完整且不含胆固醇，吸收率极高。其生物价为77，趋谷物蛋白首位，可与鱼，鱼、虾、牛肉(生物价分别为76，77，73)等动物蛋白相媲美，同时大米蛋白具有低致敏性，大米是唯一可免于过敏试验的谷物。米蛋白肽是从大米蛋白中得到的，米蛋白肽继承了大米蛋白的优点，同时也具有它独特的功能优势。其价值主要体现在消化吸收好；具有降胆固醇、降血压作用、预防慢性疾病、增强体能和抗疲劳等功能。钙被称为人体中最丰富的无机元素，占人总体重的1.5％至2.2％，其在生长、怀孕、哺乳及晚年抵抗骨质疏松症方面都起到非常重要的作用。由于我国居民传统膳食以植物性食物为主，植酸、草酸和磷酸等含量较高，这些物质易在肠道中与钙形成不溶性钙盐沉淀而造成钙的吸收率低。因而，除了寻求良好的钙补充制剂外，提高现有膳食中钙的吸收利用率亦是解决缺钙问题的良好途径。有研究表明经蛋白水解后得到的小肽能促进小肠对钙的吸收并在体内蓄积，从而提高钙的吸收利用率且安全无毒，因此，以大米蛋白为原料，使米蛋白肽与钙离子螯合，借助小肽吸收理论，提高多肽和钙离子的吸收利用率具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，克服现有钙补制剂吸收率低的缺点，促进人体对钙的吸收。本专利技术通过以下技术方案来实现：一种米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，是以米蛋白为原料，经碱性蛋白酶水解后获得米蛋白肽水解液，米蛋白肽水解液中的多肽冷冻干燥后，与钙螯合反应得到米蛋白肽-钙螯合物。进一步的，还包括对米蛋白肽水解液进行超滤分级，筛选出3-5ku肽段进行后续螯合反应。进一步的，所述的螯合反应的条件为多肽与钙质量比6:1～8:1、pH5～7、温度40～60℃、反应时间60～120min。进一步的，所述的螯合反应的条件为多肽与钙质量比5.61：1、pH8.09、温度43.40℃、反应时间93.26min。具体的，该方法包括以下步骤：取5g米蛋白溶于112ml的去离子水中，先与90℃水浴锅中预处理10分钟，待温度降至63.94℃后用1mol/L氢氧化钠调pH至8.52，加入0.37ml碱性蛋白酶后，用1mol/L的氢氧化钠维持pH为8.52，水解4个小时后沸水浴灭酶，冷却至室温，用1mol/LHCL调pH值7后于5000r/min离心10min，取上清液，将米蛋白肽水解液在0.25MPa压力下超滤，依次用透过分子质量为5，3ku的超滤膜超滤，得到分子质量为3～5ku的米蛋白肽滤出液；将分级后的肽段透过液冻干后备用，将5.61g米蛋白肽溶于112.2ml去离子水中配成底物浓度为5％的肽液，加入1gCaCl2,，涡旋混匀，调至pH8.09，后进行螯合反应，反应温度为43.4℃，反应时间为93.26min，取出后冷却至室温，用三倍无水乙醇沉淀，待沉淀析出，10000g离心15分钟，收集沉淀，用无水乙醇洗涤至上清液加入钙指示剂不变色；烘箱先调温度到100℃烘1h，然后降到30℃烘螯合物至干，得到螯合率高的米蛋白肽-钙螯合物。进一步的，所述的米蛋白肽-钙螯合物在促进钙吸收中的应用。采用上述技术方案的积极效果：本专利技术以大米蛋白为原料，使米蛋白肽与钙离子螯合，利用了大米蛋白肽利于人体吸收，能够促进小肠对钙的吸收并在体内蓄积，从而提高钙的吸收利用率，避免钙离子在碱性的肠道环境产生沉淀而损失，本专利技术的米蛋白肽钙螯合物的消化吸收率及保留率均高于有机钙及碳酸钙；同时对水解工艺、螯合工艺进行优化，进一步提高螯合物的制备效率。附图说明图1是四种酶解产物的金属螯合力；图2是未分级及超滤后各级分米蛋白肽的螯合力的比较；图3是肽钙比对3-5ku米蛋白肽段螯合能力的影响；图4是pH对3-5ku米蛋白肽段螯合能力的影响；图5是温度对3-5ku米蛋白肽段螯合能力的影响；图6是时间对3-5ku米蛋白肽段米蛋白肽钙螯合能力的影响；图7是各因素交互作用对米蛋白肽钙螯合能力的等高线和响应面图；图8是3-5ku米蛋白肽及其钙螯合物的紫外光谱；图9是3-5ku米蛋白肽(A)及其钙螯合物(B)的红外光谱；图10是模拟肠道中钙制剂浓度与钙溶解度和透过率的关系示意图。具体实施方式下面结合实施例和试验例对本专利技术的技术方案做进一步的说明，但不应理解为对本专利技术的限制：实施例1本实施例说明米蛋白肽-钙螯合物的制备工艺。取5g米蛋白溶于112ml的去离子水中，先与90℃水浴锅中预处理10分钟，待温度降至63.94℃后用1mol/L氢氧化钠调pH至8.52，加入0.37ml碱性蛋白酶后，用1mol/L的氢氧化钠维持pH为8.52，水解4个小时后沸水浴灭酶，冷却至室温，用1mol/LHCL调pH值7后于5000r/min离心10min，取上清液，将米蛋白肽水解液在0.25MPa压力下超滤，依次用透过分子质量为5，3ku的超滤膜超滤，得到分子质量为3～5ku的米蛋白肽滤出液；将分级后的肽段透过液冻干后备用，将5.61g米蛋白肽溶于112.2ml去离子水中配成底物浓度为5％的肽液，加入1gCaCl2,，涡旋混匀，调至pH8.09，后进行螯合反应，反应温度为43.4℃，反应时间为93.26min，取出后冷却至室温，用三倍无水乙醇沉淀，待沉淀析出，10000g离心15分钟，收集沉淀，用无水乙醇洗涤至上清液加入钙指示剂不变色；烘箱先调温度到100℃烘1h，然后降到30℃烘螯合物至干，得到螯合率高的米蛋白肽-钙螯合物。实施例2本实施例说明米蛋白肽-钙螯合物的制备工艺。取5g米蛋白溶于112ml的去离子水中，先与90℃水浴锅中预处理10分钟，待温度降至63.94℃后用1mol/L氢氧化钠调pH至8.52，加入0.37ml碱性蛋白酶后，用1mol/L的氢氧化钠维持pH为8.52，水解4个小时后沸水浴灭酶，冷却至室温，用1mol/LHCL调pH值7后于5000r/min离心10min，取上清液，将米蛋白肽水解液在0.25MPa压力下超滤，依次用透过分子质量为5，3ku的超滤膜超滤，得到分子质量为3～5ku的米蛋白肽滤出液；将分级后的肽段透过液冻干后备用，将5g米蛋白肽溶于112.2ml去离子水中配成底物浓度为5％的肽液，加入1gCaCl2,，涡旋混匀，调至pH5，后进行螯合反应，反应温度为40℃，反应时间为60min，取出后冷却至室温，用三倍无水乙醇沉淀，待沉淀析出，10000g离心15分钟，收集沉淀，用无水乙醇洗涤至上清液加入钙指示剂不变色；烘箱先调温度到100℃烘1h，然后降到30℃烘螯合物至干，得到螯合率高的米蛋白肽-钙螯合物。实施例3本实施例说明米蛋白肽-钙螯合物的制备工艺。取5g米蛋白溶于112ml的去离子水中，先与90℃水浴锅中预处理10分钟，待温度降至63.94℃后用1mol/L氢氧化钠调pH至8.52，加入0.37ml碱性蛋白酶后，用1mol/L的氢氧化钠维持pH为8.52，水解4个小时后沸水浴灭酶，冷却至室温，用1mol/LHCL调pH值7后于5000r/min离心10min，取上清液，将米蛋白肽水解液在0.25MPa压力下超滤，依次用透过分子质量为5，3ku的超滤膜超滤，得到分子本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种米蛋白肽‑钙螯合物的制备方法，其特征在于：是以米蛋白为原料，经碱性蛋白酶水解后获得米蛋白肽水解液，米蛋白肽水解液中的多肽冷冻干燥后，与钙螯合反应得到米蛋白肽‑钙螯合物。

【技术特征摘要】
1.一种米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：是以米蛋白为原料，经碱性蛋白酶水解后获得米蛋白肽水解液，米蛋白肽水解液中的多肽冷冻干燥后，与钙螯合反应得到米蛋白肽-钙螯合物。2.根据权利要求1所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：还包括对米蛋白肽水解液进行超滤分级，筛选出3-5ku肽段进行后续螯合反应。3.根据权利要求2所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：所述的螯合反应的条件为多肽与钙质量比6:1～8:1、pH7～9、温度40～60℃、反应时间60～120min。4.根据权利要求3所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：所述的螯合反应的条件为多肽与钙质量比5.61：1、pH8.09、温度43.40℃、反应时间93.26min。5.根据权利要求4所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：取5g米蛋白溶于112ml的去离子水中，先与90℃水浴锅中预处理10分钟，待温度降至63.94℃后用1mol/L氢氧化钠调pH至8...

【专利技术属性】
技术研发人员：王长远，李超楠，鹿保鑫，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23