动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置制造方法及图纸

发明专利技术涉及动物生理学技术领域，公开了一种能高效制作邮寄样本的动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置。它包括点滴筒、封口膜、置管筒、管胶托、支管筒、样品管、吸样管、输样管、点样管、抽气管头、抽气胶管、抽气囊；所述点滴筒下底开口，所述开口边缘与封口膜固定连接；点样管下部位于点滴筒内部，上端穿过点滴筒顶壁并通过连接胶管与输样管一端连接，输样管另一端通过连接胶管与吸样管一端连接，吸样管另一端穿过置管筒的顶壁后伸入样品管内，样品管设于支管筒内，支管筒下端与管胶托上端连接，管胶托与置管筒下端开口连接；抽气管头一端从点滴筒顶壁伸入点滴筒腔，另一端与抽气胶管一端连通，抽气胶管另一端通过抽气囊头与抽气囊连通。

A Manual Device for Making Plasmid DNA Samples for Animal Physiological Experiments

The invention relates to the technical field of animal physiology, and discloses a device for manually producing plasmid DNA samples for animal physiology experiments, which can efficiently produce mailed samples. The utility model comprises a drop tube, a sealing film, a tube placement tube, a tube rubber bracket, a branch tube, a sample tube, a sampling tube, a sampling tube, a sampling tube, a sampling tube, a sampling tube, a suction pipe, an air suction rubber tube and an air suction bag; the lower opening edge of the drop tube is fixedly connected with the sealing film; the lower part of the sample tube is inside the drop tube, and the upper end passes through the top of the drop tube. The wall is connected with one end of the sample transporting tube by connecting the rubber pipe. The other end of the sample transporting tube is connected with one end of the sample transporting tube by connecting the rubber pipe. The other end of the sample transporting tube passes through the top wall of the tube and extends into the sample tube. The sample tube is arranged in the tube, and the lower end of the tube is connected with the upper end of the rubber bracket. The rubber bracket of the tube is connected with the opening of the lower end of the tube. One end of the trachea head extends from the top wall of the drip drum into the drip drum chamber, the other end is connected with one end of the aerosol tube, and the other end of the aerosol tube is connected with the air bag through the head of the air bag.

【技术实现步骤摘要】
动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置
本专利技术涉及一种动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置，属于动物生理学

技术介绍
质粒（Plasmid是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子即细胞附殖粒、又称胞附殖粒。大部分的质粒虽然都是环状构型，它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，乃至于植物的叶绿体和线粒体等细胞器中。然而，1984年，在天蓝色链霉菌（Streptomycescoelicoler等放线菌以及在赫氏蜱疏螺旋体（Borreliahermsii等原核生物中，又相继发现线形质粒。天然质粒的DNA长度从数千碱基对至数十万碱基对都有。质粒天然存在于这些生物里面，有时候一个细胞里面可以同时有一种乃至于数种的质粒同时存在。质粒的套数（copynumber在细胞里从单一到数千都有可能。有时有些质粒含有某种抗药基因如大肠杆菌中就有含有抗四环素基因的质粒。有一些质粒携带的基因则可以赋予细胞额外的生理代谢能力，乃至于在一些细菌中提高它的致病力。一般来说，质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用。它是基因工程最常见的运载体。质粒根据它们所带有的基因以及赋于宿主细胞的特点可以分为六种不同的类型：1、抗性质粒：它们带有抗性基因，可使宿主菌对某些抗菌素产生抗性，如对氨基苄青霉素，氯霉素等产生抗性。不同的细菌中也可含有相同的抗性质粒，如RP4质粒在假单胞菌属和其它细菌中都存在。R质粒还可以通过感染的形式在不同种的细菌中传播。2、致育因子：可以通过接合在供体和受体间传递遗传物质。F因子约有1/3的DNA构成一个转移DNA的操纵子，约35个基因，负责合成和装配性伞毛。这就是DNA转移区域，受traJ基因产物的正调节。它还具有重组区和复制区。重组区含有多个插入顺序，通过这些插入顺序进行同源重组。在复制区有两个复制起始点：一个是OriV，供给F因子在宿主中自主复制时使用；另一个是OriT，供接合时进行滚环复制的起始点。3、Col质粒：带有编码大肠杆菌素的基因。大肠杆菌素可杀死其它细菌。4、降解质粒：这种质粒编码一种特殊蛋白，可使宿主菌代谢特殊的分子，如甲苯或水杨酸。5、侵入性质粒：这些质粒使宿主菌具有致病的能力。如Ti质粒，此是在根癌农杆菌中发现的，现经过加工用来作植物转基因的一种常用载体。6、隐秘质粒：不显示任何表现类型，主要通过物理方法才能发现。质粒在细胞内的复制一般有两种类型：紧密控制型（Stringentcontrol和松弛控制型（Relaxedcontrol。前者只在细胞周期的一定阶段进行复制，当染色体不复制时，它也不能复制，通常每个细胞内只含有一个或几个质粒分子，如F因子。后者的质粒在整个细胞周期中随时可以复制，在每个细胞中有许多拷贝，一般在20个以上，如ColE1质粒。在使用蛋白质合成抑制剂-氯霉素时，细胞内蛋白质合成、染色体DNA复制和细胞分裂均受到抑制，紧密型质粒复制停止，而松弛型质粒继续复制，质粒拷贝数可由原来20多个扩增至1000-3000个，此时质粒DNA占总DNA的含量可由原来的2%增加至40-50%。利用同一复制系统的不同质粒不能在同一宿主细胞中共同存在，当两种质粒同时导入同一细胞时，它们在复制及随后分配到子细胞的过程中彼此竞争，在一些细胞中，一种质粒占优势，而在另一些细胞中另一种质粒却占上风。当细胞生长几代后，占少数的质粒将会丢失，因而在细胞后代中只有两种质粒的一种，这种现象称质粒的不相容性（Incompatibility。把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体（Vector。细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构。质粒还带有某些遗传信息，所以会赋予宿主细胞一些遗传性状。其自我复制能力及所携带的遗传信息在重组DNA操作，如扩增、筛选过程中都是极为有用的。质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比，质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因如抗生素抗性基因和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量尽可能减少，以便于基因工程操作。大多质粒载体带有一些多用途的辅助序列，这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、产生用于序列测定的单链DNA、体外转录外源DNA序列、鉴定片段的插入方向、外源基因的大量表达等。一个理想的克隆载体大致应有下列一些特性：⑴分子量小、多拷贝、松弛控制型；⑵具有多种常用的限制性内切酶的单切点；⑶能插入较大的外源DNA片段；⑷具有两个以上的遗传标记物，便于鉴定和筛选。⑸对宿主细胞无害。常用的质粒载体大小一般在1kb至10kb之间，如PBR322、PUC系列、PGEM系列、PET系列和pBluescript简称pBS等。利用同一复制系统的不同质粒不能在同一宿主细胞中共同存在，当两种质粒同时导入同一细胞时,它们在复制及随后分配到子细胞的过程中彼此竞争。在一些细胞中，一种质粒占优势，而在另一些细胞中另一种质粒却占上风。质粒通常含有编码某些酶的基因，其表型包括对抗生素的抗性，产生某些抗生素，降解复杂有机物，产生大肠杆菌素和肠毒素及某些限制性内切酶与修饰酶等。从细菌中分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤：培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细胞；分离和纯化质粒DNA。采用强碱液、加热或溶菌酶主要针对革兰氏阳性细菌可以破坏菌体细胞壁，十二烷基磺酸钠SDS和TritonX-100一般很少使用可使细胞膜裂解。经溶菌酶和SDS或TritonX-100处理后，细菌染色体DNA会缠绕附着在细胞碎片上，同时由于细菌染色体DNA比质粒大得多，易受机械力和核酸酶等的作用而被切断成不同大小的线性片段。当用强热或酸、碱处理时，细菌的线性染色体DNA变性，而共价闭合环状DNA(CovalentlyclosedcircularDNA，简称cccDNA的两条链不会相互分开，当外界条件恢复正常时，线状染色体DNA片段难以复性，而是与变性的蛋白质和细胞碎片缠绕在一起，而质粒DNA双链又恢复原状，重新形成天然的超螺旋分子，并以溶解状态存在于液相中。在细菌细胞内，共价闭环质粒以超螺旋形式存在。在提取质粒过程中，除了超螺旋DNA外，还会产生其它形式的质粒DNA。如果质粒DNA两条链中有一条链发生一处或多处断裂，分子就能旋转而消除链的张力，形成松弛型的环状分子，称开环DNA(OpencircularDNA，简称ocDNA；如果质粒DNA的两条链在同一处断裂，则形成线状DNA(LinearDNA。当提取的质粒DNA电泳时，同一质粒DNA其超螺旋形式的泳动速度要比开环和线状分子的泳动速度快。从上面我们可以看出，质粒在动物生理学、分子生物学等多个领域是一种非常有用的工具，很多实验室都在使用。学界有个不成文的规定，一个实验室如果有好的工具，需要与他人有偿或无偿地共享，也就是说质粒经常在不同实验室使用，一个实验室有，其他实验室可以向其索要，这就需要邮寄来完成。因此如何高效制作邮寄样本，将需要给予别人的质粒DNA样品邮寄出去成为急需解决的一大难题。
技术实现思路
本专利技术克服了现有技术中的不足，提供了一种能高效制作邮本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置，其特征在于：它包括点滴筒（1）、封口膜（2）、置管筒（3）、管胶托（4）、支管筒（5）、样品管（6）、吸样管（7）、输样管（9）、点样管（10）、抽气管头（14）、抽气胶管（15）、抽气囊（17）；所述点滴筒（1）下底开口，所述开口边缘与封口膜（2）固定连接；点样管（10）下部位于点滴筒（1）内部，上端穿过点滴筒（1）顶壁并通过连接胶管（8）与输样管（9）一端连接，输样管（9）另一端通过连接胶管（8）与吸样管（7）一端连接，吸样管（7）另一端穿过置管筒（3）的顶壁后伸入样品管（6）内，样品管（6）设于支管筒（5）内，支管筒（5）下端与管胶托（4）上端连接，管胶托（4）与置管筒（3）下端开口连接；抽气管头（14）一端从点滴筒（1）顶壁伸入点滴筒腔（12）后游离，另一端与抽气胶管（15）一端连通，抽气胶管（15）另一端通过抽气囊头（16）与抽气囊（17）连通；抽气囊（17）末端设有放气阀（18）。

【技术特征摘要】
1.动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置，其特征在于：它包括点滴筒（1）、封口膜（2）、置管筒（3）、管胶托（4）、支管筒（5）、样品管（6）、吸样管（7）、输样管（9）、点样管（10）、抽气管头（14）、抽气胶管（15）、抽气囊（17）；所述点滴筒（1）下底开口，所述开口边缘与封口膜（2）固定连接；点样管（10）下部位于点滴筒（1）内部，上端穿过点滴筒（1）顶壁并通过连接胶管（8）与输样管（9）一端连接，输样管（9）另一端通过连接胶管（8）与吸样管（7）一端连接，吸样管（7）另一端穿过置管筒（3）的顶壁后伸入样品管（6）内，样品管（6）设于支管筒（5）内，支管筒（5）下端与管胶托（4）上端连接，管胶托（4）与置管筒（3）下端开口连接；抽气管头（14）一端从点滴筒（1）顶壁伸入点滴筒腔（12）后游离，另一端与抽气胶管（15）一端连通，抽气胶管（15）另一端通过抽气囊头（16）与抽气囊（17）连通；抽气囊（17）末端设有放气阀（18）。2.根据权利要求1所述的动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置，其特征在于：所述点滴筒（1）为下底开口的圆筒状结构，它包括点滴筒壁（13）、点滴筒腔（12），点滴筒壁（13）包括点滴筒（1）的顶壁和侧壁；点滴筒壁（13）由厚度为5-10毫米的玻璃材料制成；点滴筒腔（12）为直径为3-5厘米，高度为5-10厘米的圆柱状结构。3.根据权利要求1所述的动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置，其特征在于：所述封口膜（2）为硅胶材料制成的圆环状结构，并与点滴筒（1）下端口外缘粘连在一起。4.根据权利要求1所述的动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置，其特征在于：所述置管筒（3）为下底开口的圆筒状结构，它包括置管筒壁、置管筒腔，置管筒壁包括置管筒（3）的顶壁和侧壁；置管筒壁由厚度为3-5毫米的玻璃材料制成；置管筒腔为直径为1-2厘米，高度为3-5厘米的圆柱状结构。5.根据权利要求1所述的动物生理实验用质粒DNA样品手动制作装置，其特征在于：所述管胶托（4）由直径为1.01-2.02厘米，高度为1-2厘米的橡胶材料制成，管胶托（4）上表面与支管筒（5）下底粘连。6.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓振旭，谢桂林，张贵生，朱陶，袁琴琴，孙智勇，杨永斌，韩军旺，
申请(专利权)人：菏泽学院，
类型：发明
国别省市：山东,37