一种活性黄酮类化合物及其制备方法与应用技术

技术编号:19627011 阅读:59 留言:0更新日期:2018-12-01 10:04
本发明专利技术公开了一种活性黄酮类化合物及其制备方法与应用,所述活性黄酮类化合物的结构式为:

【技术实现步骤摘要】
一种活性黄酮类化合物及其制备方法与应用
本专利技术涉及药物提取
,具体涉及到一种活性黄酮类化合物及其制备方法与应用。
技术介绍
多花黄精,来源于百合科黄精属多花黄精植物的干燥根茎,又名姜形黄精。主产于我国南方地区,湖南省栽培多花黄精历史悠久,是其道地产地之一。《本草纲目》言其“得坤土之精,为补养中宫之胜品”,具有补肾益精,滋阴润燥的功效,长期用于治疗肾虚亏损,脾胃虚弱,肺虚燥咳,体倦乏力之症,同时也是数十种复方滋补药剂的重要组分。目前,尚未有从多花黄精中提取得到具有抗宫颈癌、胃癌及具有良好的抗氧化性的黄酮类化合物的报道。文献CN104069348A公开了一种黄精提取物及其制备方法与应用,该专利技术将黄精通过乙醇热提后,再用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到的化合物主要用于抗糖尿病及其并发症上,并没有抗宫颈癌和胃癌的功效。文献CN201410274076.3公开了一种黄精多糖在制备具有辅助抑制结肠癌功效的功能食品中的应用,但该专利技术从黄精中提取的物质主要应用于结肠癌,且制备方法与本专利技术完全不同。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种活性黄酮类化合物及其制备方法与应用,具有抗宫颈癌、胃癌及抗氧化的功效。本专利技术的内容包括活性黄酮类化合物的结构式如式Ⅰ所示:本专利技术的活性黄酮类化合物Ⅰ为(3R)-5,7-二羟基-8-甲基-3-(2'-羟基-4'-甲氧苄基)-4-高异黄酮,相关文献中鲜有其报道,也并无其在抗宫颈癌、胃癌和抗氧化方面的应用。其他文献也有从黄精中提取出抗癌化合物的方法,但一是方法上与本专利技术有非常大的区别,二是提取出的化合物结构完全不同,三是提取的抗癌化合物主要应用于结肠癌、H22实体瘤和S180腹水瘤,与本专利技术化合物的应用范围并不相同。化合物Ⅰ的制备包括以下步骤:(1)取多花黄精根部原料,干燥后经粉碎处理,过筛后得到黄精粉末,用体积浓度为95%的乙醇提取,所述黄精粉末和乙醇的重量比为1:5-8,提取使用仪器为DTQ-200型多功能提取罐,提取2次后,得到提取液;(2)将提取液用乙酸乙酯进行萃取,取乙酸乙酯层,浓缩得到浸膏;(3)将浸膏上样于硅胶柱,用体积比为100:1-2:1的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱,得到12个极性由小到大的馏分A-L;(4)将极性较高的馏分K用体积比为3-5:1的正己烷-丙酮恒度洗脱,再将所得产物上样于葡聚糖凝胶柱,并用体积比为1-2:1-2的氯仿-甲醇洗脱,进一步纯化得到化合物Ⅰ。所述活性黄酮类化合物用于制备抗宫颈癌、胃癌及抗氧化的药品和保健品。本专利技术化合物洗脱时除特殊说明外,采用的固定相均为硅胶柱。本专利技术的有益效果是,本专利技术化合物能有效抗宫颈癌和胃癌,具有良好的抗氧化性,并能用于制备药品和保健品。附图说明图1为本专利技术的化合物Ⅰ的合成示意图。图2为本专利技术的化合物Ⅰ的13C-NMR谱。图3为本专利技术的化合物Ⅰ的1H-NMR谱。图4为本专利技术的化合物Ⅰ的DEPT谱。图5为本专利技术的化合物Ⅰ的HSQC谱。图6为本专利技术的化合物Ⅰ的HMBC谱。图7为本专利技术的化合物Ⅰ的1H-1HCOSY谱。图8为本专利技术的化合物Ⅰ的抗氧化活性示意图;其中(a)表示全血酵母聚糖受浓度的影响,(b)表示中性粒细胞受浓度的影响,CPS表示每秒计数率。具体实施方式实施例1(1)取500g多花黄精根部原料,干燥后经粉碎处理,过筛后得到黄精粉末,用2500ml体积浓度为95%的乙醇提取,提取使用仪器为DTQ-200型多功能提取罐,提取2次后,得到提取液;(2)将提取液用2500ml乙酸乙酯进行萃取,取乙酸乙酯层,浓缩得到浸膏;(3)将浸膏上样于硅胶柱,用1600ml体积比为100:1的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱,得到12个极性由小到大的馏分A-L;(4)将极性较高的馏分K用3000ml体积比为4:1的正己烷-丙酮恒度洗脱,再将所得产物上样于葡聚糖凝胶柱,并用体积比为1:1的氯仿-甲醇洗脱,进一步纯化得到化合物Ⅰ,化合物Ⅰ的纯度大于98%。经鉴定,该化合物Ⅰ为(3R)-5,7-二羟基-8-甲基-3-(2'-羟基-4'-甲氧苄基)-4-高异黄酮,其核磁共振谱图如表1所示。表1化合物Ⅰ的核磁谱图实施例2(1)取500g多花黄精根部原料,干燥后经粉碎处理,过筛后得到黄精粉末,用4000ml体积浓度为95%的乙醇提取,提取使用仪器为DTQ-200型多功能提取罐,提取3次后,得到提取液;(2)将提取液用2000ml乙酸乙酯进行萃取,取乙酸乙酯层,浓缩得到浸膏;(3)将浸膏上样于硅胶柱,用2000ml体积比为2:1的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱,得到12个极性由小到大的馏分A-L;(4)将极性较高的馏分K用3000ml体积比为5:1的正己烷-丙酮恒度洗脱,再将所得产物上样于葡聚糖凝胶柱,并用体积比为2:1的氯仿-甲醇洗脱,进一步纯化得到化合物Ⅰ,化合物Ⅰ的纯度大于98%。经检测发现,实施例2的最终生成物与实施例1的最终生成物结构一致,本专利技术化合物Ⅰ的合成方法并不仅限于实施例中所阐述的方法。实施例3(1)取500g多花黄精根部原料,干燥后经粉碎处理,过筛后得到黄精粉末,用3000ml体积浓度为95%的乙醇提取,提取使用仪器为DTQ-200型多功能提取罐,提取4次后,得到提取液;(2)将提取液用3000ml乙酸乙酯进行萃取,取乙酸乙酯层,浓缩得到浸膏;(3)将浸膏上样于硅胶柱,用3000ml体积比为50:1的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱,得到12个极性由小到大的馏分A-L;(4)将极性较高的馏分K用3000ml体积比为3:1的正己烷-丙酮恒度洗脱,再将所得产物上样于葡聚糖凝胶柱,并用体积比为1:2的氯仿-甲醇洗脱,进一步纯化得到化合物Ⅰ,化合物Ⅰ的纯度大于98%。经检测发现,实施例3的最终生成物与实施例1的最终生成物结构一致,本专利技术化合物Ⅰ的合成方法并不仅限于实施例中所阐述的方法。实施例4(1)取500g多花黄精根部原料,干燥后经粉碎处理,过筛后得到黄精粉末,用2500ml体积浓度为95%的乙醇提取,提取使用仪器为DTQ-200型多功能提取罐,提取2次后,得到提取液;(2)将提取液用2500ml乙酸乙酯进行萃取,取乙酸乙酯层,浓缩得到浸膏;(3)将浸膏上样于硅胶柱,用1600ml体积比为100:1的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱,得到12个极性由小到大的馏分A-L;(4)将极性较高的馏分K用3000ml体积比为4:1的正己烷-丙酮恒度洗脱,再将所得产物上样于葡聚糖凝胶柱,并用体积比为1:1的氯仿-甲醇洗脱,进一步纯化得到化合物Ⅰ,化合物Ⅰ的纯度大于98%;为检测化合物Ⅰ对不同肿瘤细胞增殖的影响,现做以下抗肿瘤实验。抗肿瘤实验的实验原理为:活细胞的线粒体内膜上存在琥珀酸脱氢酶,该酶可将黄绿色的噻唑蓝(简称为MTT,为一种接受氢离子的染料)降解成蓝紫色的甲臜,活细胞越多,生成的蓝紫色的甲臜就越多,而死细胞因其线粒体内膜上的琥珀酸脱氢酶活性消失,无此功能;使用二甲基亚砜溶解蓝紫色的甲臜,并用酶标仪在490nm波长处测定吸光度值,可以定量反应出活细胞数量。(5)在胎牛血清中培养不同种类的癌细胞,其中不同癌细胞与编号的对应关系如表2所示;表2不同癌细胞和与之对应编号的关系(6)将实验分为实验组(化合物Ⅰ)和对照组,其中对照组为紫杉醇,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种活性黄酮类化合物,其特征在于,其结构式如式Ⅰ所示:

【技术特征摘要】
1.一种活性黄酮类化合物,其特征在于,其结构式如式Ⅰ所示:2.一种如权利要求1所述的活性黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取多花黄精原料,用乙醇提取,得到提取液;(2)将提取液用乙酸乙酯萃取,取乙酸乙酯层,浓缩得到浸膏;(3)将浸膏上样于柱色谱Ⅰ,用洗脱剂Ⅰ进行处理,得到若干馏分,取高极性馏分;(4)将高极性馏分用洗脱剂Ⅱ处理后,上样于柱色谱Ⅱ,再用洗脱剂Ⅲ处理,纯化得到活性黄酮类化合物。3.如权利要求2所述的活性黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的黄精原料经过干燥和粉碎处理。4.如权利要求2或3所述的活性黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中至少使用乙醇提取2次。5.如权利要求2或3所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:王炜何述金曾婷彭彩云袁汉文龚力民石继连何承东
申请(专利权)人:湖南新汇制药股份有限公司怀化林泉药业有限公司
类型:发明
国别省市:湖南,43

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