提取分离青钱柳黄酮的方法技术

本发明专利技术公开了一种提取分离青钱柳黄酮的方法，包括下列步骤：a.将青钱柳用清水洗涤，40‑50℃烘干干燥，样品经粉碎机粉碎，过40目筛；b.酸解；c.微生物发酵降解；d.复合酶解:e.丙酮萃取；f.粗黄酮纯化：用活性炭纯化黄酮。本发明专利技术在青钱柳黄酮的提取过程中，首先采用初步微生物发酵的方法，将青钱柳的细胞壁降解掉，同时利用微生物的作用除去一部分杂质等，比如多糖等等。然后再用酶解，将黄酮充分释放出来。本发明专利技术的整个工艺过程中无污染物排放，适合于大规模生产，有益于青钱柳资源的开发利用。具有该步骤简单，成本低，可操作性强，产量高的优点，易于工业化生产。

Extraction and Separation of Flavonoids from Cyclocarya paliurus

The invention discloses a method for extracting and separating flavonoids from Cyclocarya paliurus, which comprises the following steps: A. washing Cyclocarya paliurus with clean water, drying at 40 50 C, crushing the sample by a crusher and passing through 40 mesh sieve; B. acidolysis; C. microbial fermentation degradation; D. complex enzymatic hydrolysis: E. acetone extraction; F. purification of crude flavonoids: purification of flavonoids with activated carbon. In the extraction process of Flavonoids from Cyclocarya paliurus, the cell wall of Cyclocarya paliurus is degraded by preliminary microbial fermentation, and some impurities, such as polysaccharides, are removed by microbial action. Then the flavonoids were fully released by enzymatic hydrolysis. The invention has no pollutant discharge in the whole process, is suitable for large-scale production, and is beneficial to the development and utilization of Cyclocarya paliurus resources. It has the advantages of simple steps, low cost, strong operability and high output, and is easy to industrialize production.

【技术实现步骤摘要】
提取分离青钱柳黄酮的方法
本专利技术涉及一种提取分离青钱柳黄酮的方法。属于海洋微藻养殖领域。
技术介绍
青钱柳，（拉丁文名：Cyclocaryapaliurus.）别名：摇钱树、麻柳，青钱李、山麻柳、山化树。胡桃科、青钱柳属植物，我国南方多省均有发现，多以零星分布。青钱柳乃冰川四纪幸存下来的珍稀树种，仅存于中国。青钱柳被誉为植物界的大熊猫，医学界的第三棵树。人们知道，医学界的第一棵树——柳树，产生了阿司匹林，消炎杀菌、抗血栓，揭开了人类健康史的第一次变革。现代研究证实青钱柳叶具有降血糖、降血压、降血脂作用、增强机体免疫功能等作用。其主要活性成分是黄酮类和多糖类化合物。青钱柳中含有丰富的黄酮类物质，黄铜类化合物具有心血管系统活性、抗菌及抗病毒活性、抗肿瘤活性、抗氧化自由基活性、抗炎镇痛活性、保肝活性等多种生物活性。青钱柳叶含有大量的黄酮类化合物，具有降血糖、降血压、降血脂、增强肌体免疫力、抗氧化、防衰老等功能。目前，青钱柳中黄酮类化合物的提取方法较复杂、工艺成本高，不利于大规模工业化。另外，传统的原料预处理方法多为高温干燥，同时，传统的水体方法也需要采用高温加热，才可以提取出较大量的提取物，不仅会大量破坏青钱柳中的有效成分，同时增加工艺能耗。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种提取分离青钱柳黄酮的方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：本专利技术提供的一种青钱柳提取多糖的方法，包括下列步骤：a.将青钱柳用清水洗涤，40-50℃烘干干燥，样品经粉碎机粉碎，过40目筛。b.酸解：将青钱柳加入蒸馏水打浆，青钱柳和蒸馏水的重量比为1:1-2，加入食品级盐酸（盐酸≥31.0%），加入食品级盐酸的重量为浆料重量的5-10%，30-40℃维持1-5h。c.微生物发酵降解：将酸解后的原料加入升温到37-40℃，调节pH为5-6，加入酵母菌、枯草芽孢杆菌菌种0.05-0.3份，充分拌匀，发酵降解0.5-1天。d.复合酶解:发酵后的待提取物料加入复合酶，复合酶和物料的重量比1:20-40，调节pH7.5-8.0，温度保持30-45℃，同时辅助超声处理，时间1-3h，过滤得滤液。e.丙酮萃取：滤液中加入丙酮萃取，萃取2-3次，收集有机相，蒸馏后得到粗青钱柳黄酮；f.粗黄酮纯化：用活性炭纯化黄酮。活性炭纯化黄酮根据现有技术中的操作方法即可，具体为根据总黄酮在不同温度的水中溶解度的差别，可用热水溶解、冷水结晶。使之不断提高纯度。该工艺相对简单，操作方便。在利用重结晶纯化总黄酮，加入一定量活性炭可提高纯化速度。优选的，复合酶包括纤维素酶和果胶酶，两者的重量比例是0.5：1-2。本专利技术的有益效果：本专利技术在青钱柳黄酮的提取过程中，首先采用初步微生物发酵的方法，将青钱柳的细胞壁降解掉，同时利用微生物的作用除去一部分杂质等，比如多糖等等。然后再用酶解，将黄酮充分释放出来。本专利技术的整个工艺过程中无污染物排放，适合于大规模生产，有益于青钱柳资源的开发利用。具有该步骤简单，成本低，可操作性强，产量高的优点，易于工业化生产。具体实施方式实施例1本实施例提供的一种青钱柳提取多糖的方法，包括下列步骤：a.将青钱柳用清水洗涤，50℃烘干干燥，样品经粉碎机粉碎，过40目筛。b.酸解：将青钱柳加入蒸馏水打浆，青钱柳和蒸馏水的重量比为1:2，加入食品级盐酸（盐酸≥31.0%），加入食品级盐酸的重量为浆料重量的10%，40℃维持2h。c.微生物发酵降解：将酸解后的原料加入升温到40℃，调节pH为6，加入酵母菌、枯草芽孢杆菌菌种0.3份，充分拌匀，发酵降解1天。d.复合酶解:发酵后的待提取物料加入复合酶，复合酶和物料的重量比1:40，调节pH.0，温度保持45℃，同时辅助超声处理，时间3h，过滤得滤液。e.丙酮萃取：滤液中加入丙酮萃取，萃取3次，收集有机相，蒸馏后得到粗青钱柳黄酮；f.粗黄酮纯化：用活性炭纯化黄酮。青钱柳黄酮得率：将1千克的青钱柳黄酮按照本实施例的方法进行制备提取，得纯化黄酮13.4g，将纯化黄酮以芦丁为对照品经UV检测，测到其中黄酮含量为84.6%。实施例2本实施例提供的一种青钱柳提取多糖的方法，包括下列步骤：a.将青钱柳用清水洗涤，40℃烘干干燥，样品经粉碎机粉碎，过40目筛。b.酸解：将青钱柳加入蒸馏水打浆，青钱柳和蒸馏水的重量比为1:1，加入食品级盐酸（盐酸≥31.0%），加入食品级盐酸的重量为浆料重量的5%，30℃维持1h。c.微生物发酵降解：将酸解后的原料加入升温到37℃，调节pH为5，加入酵母菌、枯草芽孢杆菌菌种0.05份，充分拌匀，发酵降解0.5天。d.复合酶解:发酵后的待提取物料加入复合酶，复合酶和物料的重量比1:20，调节pH7.5，温度保持30℃，同时辅助超声处理，时间1h，过滤得滤液。e.丙酮萃取：滤液中加入丙酮萃取，萃取2次，收集有机相，蒸馏后得到粗青钱柳黄酮；f.粗黄酮纯化：用活性炭纯化黄酮。青钱柳黄酮得率：将1千克的青钱柳黄酮按照本实施例的方法进行制备提取，得纯化黄酮11.2g，以芦丁为对照品经UV检测，黄酮含量为86.2%。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取分离青钱柳黄酮的方法，其特征在于，包括下列步骤：a.将青钱柳用清水洗涤，40‑50℃烘干干燥，样品经粉碎机粉碎，过40目筛；b.酸解：将青钱柳加入蒸馏水打浆，青钱柳和蒸馏水的重量比为1:1‑2，加入食品级盐酸（盐酸≥31.0%），加入食品级盐酸的重量为浆料重量的5‑10%，30‑40℃维持1‑5h；c.微生物发酵降解：将酸解后的原料加入升温到37‑40℃，调节pH为5‑6，加入酵母菌、枯草芽孢杆菌菌种0.05‑0.3份，充分拌匀，发酵降解0.5‑1天；d.复合酶解:发酵后的待提取物料加入复合酶，复合酶和物料的重量比1:20‑40，调节pH7.5‑8.0，温度保持30‑45℃，同时辅助超声处理，时间1‑3h，过滤得滤液；e.丙酮萃取：滤液中加入丙酮萃取，萃取2‑3次，收集有机相，蒸馏后得到粗青钱柳黄酮；f.粗黄酮纯化：用活性炭纯化黄酮。

【技术特征摘要】
1.一种提取分离青钱柳黄酮的方法，其特征在于，包括下列步骤：a.将青钱柳用清水洗涤，40-50℃烘干干燥，样品经粉碎机粉碎，过40目筛；b.酸解：将青钱柳加入蒸馏水打浆，青钱柳和蒸馏水的重量比为1:1-2，加入食品级盐酸（盐酸≥31.0%），加入食品级盐酸的重量为浆料重量的5-10%，30-40℃维持1-5h；c.微生物发酵降解：将酸解后的原料加入升温到37-40℃，调节pH为5-6，加入酵母菌、枯草芽孢杆菌菌种0.05-0...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑晓杰，周环，胡霞，何悦，章志诚，
申请(专利权)人：温州科技职业学院，
类型：发明
国别省市：浙江,33