一种红金银花茎段快速成苗方法技术

本发明专利技术属于农业栽培技术领域，特别涉及一种红金银花茎段快速成苗方法，包括采集带节间红金银花幼嫩枝条，洗衣粉浸洗后无菌水冲洗，再经乙醇、氯化汞浸泡后无菌水冲洗；分别在MS培养基中添加NAA、KT、6‑BA调制成诱导培养基、生长培养基、增殖培养基；将无菌处理后的枝条截成茎段依次接种于三种培养基中，得红金银花苗。本发明专利技术选用带腋芽红金银花茎段作为繁育材料，依次接种于添加了不同浓度的NAA、KT、6‑BA的培养基中，培育出无病毒感染、生长良好、成活快成活率高的红金银花苗。

A method for rapid seedling formation of stem of red honeysuckle

The invention belongs to the field of agricultural cultivation technology, in particular relates to a rapid seedling formation method for safflower stem segments, which includes collecting young branches of safflower with internodes, washing with sterile water after washing powder, then washing with sterile water after soaking with ethanol and mercury chloride, and adding NAA, KT and 6_BA to MS medium respectively to form induction culture. The seedlings of honeysuckle were obtained by inoculating the sterile treated branches into stem segments in three media in turn. The stem segments of honeysuckle with axillary buds are selected as breeding materials, and then inoculated in different concentrations of NAA, KT and 6 1089

【技术实现步骤摘要】
一种红金银花茎段快速成苗方法
本专利技术属于农业栽培
，特别涉及一种红金银花茎段快速成苗方法。
技术介绍
红金银花(Lonicerajaponicavar.chinensis)为忍冬科、忍冬属的半常绿灌木，是金银花(LonicerajaponicaThund.)的变种之一。红金银花花蕾颜色富于变化，开放前由紫红色变为大红色，花开时先为粉红色，后变为红、黄、白相间，赏心悦目，非常美观，而且嫩枝和叶均为紫红色，蔓条下垂，具有优雅别致的姿态，拥有非常高的观赏价值；花香四溢，比普通金银花的香味更加浓厚，并且其花、叶、茎均可入药，是金银花中一个独特的品种。植物组织培养技术指的是在无菌的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，在人工环境里培养成完整的植株。目前，植物组织培养应用最多、最有效的方面是植物脱毒和离体快繁技术。运用组织培养法繁殖可以不受气候、地域等其他自然环境因素的影响，比常规方法更能扩大繁殖，有效地提供大量的优质种苗，快速地进行工厂化生产。目前，对金银花的组织培养植株已经进行了较多的研究，但是对红金银花的组织培养快繁技术的研究报道却是比较少的。而且，现有红金银花主要以扦插的方式繁殖，但存在植株携带病毒、杂菌、生长发育不良，植株成活率不高的问题。为此，本申请应用植物组织培养技术设计一种红金银花茎段快速成苗方法。
技术实现思路
本专利技术选用带腋芽红金银花茎段作为繁育材料，依次接种于添加了不同浓度的NAA、KT、6-BA的培养基中，培育出无病毒感染、生长良好、成活快成活率高的红金银花苗。本专利技术提供了一种红金银花茎段快速成苗方法，包括以下步骤：S1，采集带节间红金银花幼嫩枝条，除去叶片，用洗衣粉溶液浸泡10-13min，再用自来水冲洗并浸泡，再用无菌水反复冲洗3-5次，然后于无菌环境中用乙醇浸泡15-20s，然后无菌水冲洗，再放入氯化汞溶液中，搅拌3min，捞出后用无菌水冲洗5-6次，最后用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条；S2，在MS培养基中添加蔗糖和琼脂，得基础培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA、KT，使6-BA终浓度为1.0-1.5mg/L，NAA终浓度为0.1-0.2mg/L，KT终浓度为0.5-1.5mg/L，pH值调整为6.0，得诱导培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA、KT，使6-BA终浓度为1.0-1.5mg/L，NAA终浓度为0.1-0.2mg/L，KT终浓度为0.5-1.5mg/L，pH值调整为6.0，得生长培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA，使6-BA终浓度为1.5mg/L，NAA终浓度为0-0.8mg/L，pH值调整为6.0，得增殖培养基；S3，将S1中无菌枝条截成1cm长带节间茎段，接种于S2中诱导培养基中，20-23d后得愈伤茎段，选择长势良好的愈伤茎段转接进S2中生长培养基中，30-33d后得生长茎段，选择长势良好的生长茎段除去顶芽，再切割成1-2cm的腋芽茎段并接种于S2中增殖培养基中，培养7-10d，得红金银花苗。优选的，S1中洗衣粉溶液的质量浓度为2％；自来水冲洗时间为1h，浸泡时间为30-35min；乙醇的体积浓度为75％；氯化汞溶液的质量浓度为0.2％。优选的，S2中诱导培养基中6-BA终浓度为1.5mg/L，NAA终浓度为0.1mg/L，KT终浓度为0.5mg/L；生长培养基中6-BA终浓度为1.5mg/L，NAA终浓度为0.2mg/L，KT终浓度为1.0mg/L；增殖培养基中6-BA终浓度为1.5mg/L，NAA终浓度为0.2mg/L。优选的，S2中蔗糖、琼脂和MS培养基的用量比为20g：7g：1L。优选的，S3中腋芽茎段至少含一对腋芽。优选的，S3中腋芽茎段在增殖培养基中的培养条件为：25-27℃、光照强度为2000lx、光照时间为12h/d。与现有技术相比，本专利技术的有益效果：本专利技术选用带腋芽红金银花茎段作为繁育材料，以添加了蔗糖和琼脂的MS培养基为基础，根据不同生产阶段添加了不同浓度的6-BA、NAA、KT配制相应的培养基，培育出无病毒感染、生长良好、成活快成活率高的红金银花苗，为红金银花的离体快速成苗和工厂化生产奠定基础，有利于研究红金银花离体培养的条件筛选和利用。附图说明图1为本专利技术在增殖培养基中长势良好的茎段。具体实施方式下面对本专利技术的几个具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。实施例1一种红金银花茎段快速成苗方法，包括以下步骤：S1，采集2年生带节间红金银花幼嫩枝条，除去叶片，用质量浓度为2％洗衣粉溶液浸泡10min去除表面污垢，再用自来水冲洗1h并浸泡30min，再用无菌水反复冲洗3-5次，无菌环境中用体积浓度为75％的乙醇浸泡15s，然后无菌水冲洗，再放入质量浓度为0.2％的氯化汞溶液中，搅拌3min，捞出后用无菌水冲洗5-6次，最后用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条；S2，在MS培养基中添加蔗糖和琼脂，高温高压灭菌后得基础培养基；在基础培养基中依次加入6-BA(6-苄氨基嘌呤)、NAA(萘乙酸)、KT(激动素)，使6-BA终浓度为1.5mg/L，NAA终浓度为0.1mg/L，KT终浓度为0.5mg/L，pH值调整为6.0，得诱导培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA、KT，使6-BA终浓度为1.5mg/L，NAA终浓度为0.2mg/L，KT终浓度为1.0mg/L，pH值调整为6.0，得生长培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA，6-BA终浓度为1.5mg/L，使NAA终浓度为0.2mg/L，pH值调整为6.0，得增殖培养基；其中，其中，蔗糖、琼脂和MS培养基的用量比为20g：7g：1L；S3，将S1中无菌枝条截成1cm长带节间茎段，接种于S2中诱导培养基中，20d后得愈伤茎段，选择长势良好的愈伤茎段转接进S2中生长培养基中，30d后得生长茎段，选择长势良好的生长茎段除去顶芽，再切割成1-2cm的腋芽茎段并接种于S2中增殖培养基中，腋芽茎段至少含一对腋芽，25℃、光照强度为2000lx、光照时间为12h/d条件下培养7d，得红金银花苗。实施例2一种红金银花茎段快速成苗方法，包括以下步骤：S1，采集2年生带节间红金银花幼嫩枝条，除去叶片，用质量浓度为2％洗衣粉溶液浸泡13min去除表面污垢，再用自来水冲洗1h并浸泡35min，再用无菌水反复冲洗3-5次，无菌环境中用体积浓度为75％的乙醇浸泡20s，然后无菌水冲洗，再放入质量浓度为0.2％的氯化汞溶液中，搅拌3min，捞出后用无菌水冲洗5-6次，最后用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条；S2，在MS培养基中添加蔗糖和琼脂，高温高压灭菌后得基础培养基；在基础培养基中依次加入6-BA(6-苄氨基嘌呤)、NAA(萘乙酸)、KT(激动素)，使6-BA终浓度为1.0mg/L，NAA终浓度为0.2mg/L，KT终浓度为1.5mg/L，pH值调整为6.0，得诱导培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA、KT，使6-BA终浓度为1.0mg/L，NAA终浓度为0.1mg/L，KT终浓度为1.5mg/L，pH值调整为6.0，得生长培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA，6-BA终浓度为1.5m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种红金银花茎段快速成苗方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，采集带节间红金银花幼嫩枝条，除去叶片，用洗衣粉溶液浸泡10‑13min，再用自来水冲洗并浸泡，再用无菌水反复冲洗3‑5次，然后于无菌环境中用乙醇浸泡15‑20s，然后无菌水冲洗，再放入氯化汞溶液中，搅拌3min，捞出后用无菌水冲洗5‑6次，最后用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条；S2，在MS培养基中添加蔗糖和琼脂，得基础培养基；在基础培养基中依次加入6‑BA、NAA、KT，使6‑BA终浓度为1.0‑1.5mg/L，NAA终浓度为0.1‑0.2mg/L，KT终浓度为0.5‑1.5mg/L，pH值调整为6.0，得诱导培养基；在基础培养基中依次加入6‑BA、NAA、KT，使6‑BA终浓度为1.0‑1.5mg/L，NAA终浓度为0.1‑0.2mg/L，KT终浓度为0.5‑1.5mg/L，pH值调整为6.0，得生长培养基；在基础培养基中依次加入6‑BA、NAA，使6‑BA终浓度为1.5mg/L，NAA终浓度为0‑0.8mg/L，pH值调整为6.0，得增殖培养基；S3，将S1中无菌枝条截成1cm长带节间茎段，接种于S2中诱导培养基中，20‑23d后得愈伤茎段，选择长势良好的愈伤茎段转接进S2中生长培养基中，30‑33d后得生长茎段，选择长势良好的生长茎段除去顶芽，再切割成1‑2cm的腋芽茎段并接种于S2中增殖培养基中，培养7‑10d，得红金银花苗。...

【技术特征摘要】
1.一种红金银花茎段快速成苗方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，采集带节间红金银花幼嫩枝条，除去叶片，用洗衣粉溶液浸泡10-13min，再用自来水冲洗并浸泡，再用无菌水反复冲洗3-5次，然后于无菌环境中用乙醇浸泡15-20s，然后无菌水冲洗，再放入氯化汞溶液中，搅拌3min，捞出后用无菌水冲洗5-6次，最后用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条；S2，在MS培养基中添加蔗糖和琼脂，得基础培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA、KT，使6-BA终浓度为1.0-1.5mg/L，NAA终浓度为0.1-0.2mg/L，KT终浓度为0.5-1.5mg/L，pH值调整为6.0，得诱导培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA、KT，使6-BA终浓度为1.0-1.5mg/L，NAA终浓度为0.1-0.2mg/L，KT终浓度为0.5-1.5mg/L，pH值调整为6.0，得生长培养基；在基础培养基中依次加入6-BA、NAA，使6-BA终浓度为1.5mg/L，NAA终浓度为0-0.8mg/L，pH值调整为6.0，得增殖培养基；S3，将S1中无菌枝条截成1cm长带节间茎段，接种于S2中诱导培养基中，20-23d后得愈伤茎段，选择长势良好的愈伤茎段转接进S2中生...

【专利技术属性】
技术研发人员：马丽，郭学良，韩霜，李亚静，肖志勇，
申请(专利权)人：商丘师范学院，
类型：发明
国别省市：河南,41