一种缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法及应用，包括如下步骤:(1)将平菇的一级摇甁液体菌种接种至发酵容器的培养液中，然后进行培养，直至液体菌种的生物量达到正常接种前24h的状态，得到Ⅰ期平菇液体菌种；(2)向步骤(1)所得的Ⅰ期平菇液体菌种中添加纤维素酶诱导物，继续培养24h，得到Ⅱ期平菇液体菌种；(3)将步骤(2)所得的Ⅱ期平菇液体菌种接种到灭菌菌包，得到平菇菌包，然后将所得平菇菌包发菌。本发明专利技术的方法可用于生产平菇菌包。该方法工艺简单、能够有效缩短工厂化生产平菇菌包的发菌期，减少发菌车间的占用时间，提高发菌车间的周转率，从而明显增加企业的经济效益。

Method and application for shortening the period of inoculation of liquid bacteria of Pleurotus ostreatus inoculated with bacteria

The invention discloses a method for shortening the encapsulation period of liquid strain inoculation of Pleurotus ostreatus and its application, including the following steps: (1) inoculating the first-order liquid strain of Pleurotus ostreatus into the culture liquid of fermentation container, and then culturing until the biomass of liquid strain reaches the state of 24 hours before normal inoculation, and obtaining the first-stage liquid of Pleurotus ostreatus. (2) Adding cellulase inducer to the liquid strain of Phase I of Pleurotus ostreatus obtained by step (1) and continuing to culture for 24 hours to obtain Phase II of Pleurotus ostreatus liquid strain; (3) Inoculating the liquid strain of Phase II of Pleurotus ostreatus obtained by step (2) into sterilization package, the liquid strain of Pleurotus ostreatus was obtained, and then the obtained Pleurotus ostreatus was encapsulated. The method of the invention can be used for producing mushroom Pleurotus ostreatus. The method is simple in technology, can effectively shorten the germination period of industrial production of Pleurotus ostreatus bags, reduce the occupancy time of germination workshop, improve the turnover rate of germination workshop, thereby significantly increasing the economic benefits of enterprises.

【技术实现步骤摘要】
一种缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法及应用
本专利技术涉及食用菌菌包发菌期的管理控制方法，尤其涉及一种缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法及应用。
技术介绍
纤维素酶是指一类能水解纤维素中β-1,4-葡萄糖苷键的多组分酶系的总称，主要由外切葡聚糖苷酶、内切葡聚糖苷酶、β-葡萄糖苷酶组成。纤维素酶是木质-纤维素原料资源化利用过程中的关键酶。真菌所产生的纤维素酶大部分都是诱导酶，通过添加诱导物及对纤维素酶合成途径进行调控是提高纤维素酶活性的有效方法。研究发现木霉属、曲霉属等丝状真菌中纤维素酶诱导物主要有微晶纤维素、纤维二糖及其衍生物、槐糖、龙胆二糖、乳糖、山梨糖，D-半乳糖、L-山梨糖。其中槐糖和龙胆二糖的诱导效果虽好，但是价格昂贵。对于香菇菌丝体，微晶纤维素和木质素磺酸钠作为碳源基质均能诱导香菇纤维素酶基因的表达，且木质素磺酸钠可能具有协同诱导作用。平菇是侧耳属糙皮侧耳等食用菌的俗称，是在世界范围内广泛栽培的一类木腐性食用菌。其栽培基料主要是富含木质纤维素的阔叶树杂木屑、棉籽壳和麸皮等。近年来，工厂化规模生产平菇时使用液体菌种作为原种制作平菇菌包逐渐成为一种趋势。使用液体菌种原种具有接种方便，容易实现接种过程的完全自动化，同时有效地减少人为污染风险的优势。然而，不同于固体原种(谷物种或锯末屑种)，液体菌种作为原种的弊端是接种到固体基质中后出现延滞期较长，常常超过3天。菌丝体在接种初期生长缓慢，吃料速度慢，致使菌包发菌期较长。目前，为缩短液体菌种的接种后菌丝生长周期，筛选适宜液体菌种栽培的最佳培养料配方(即菌包的配方)是常用的有效方法之一。这种方法是从优化液体菌种接种后的生长环境着手，使接种物容易适应环境而缩短发菌进程。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种工艺简单、且能缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：一种缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法，包括如下步骤：(1)将平菇的一级摇甁液体菌种接种至发酵容器的培养液中，然后进行培养，直至液体菌种的生物量达到正常接种前24h的状态，得到Ⅰ期平菇液体菌种；(2)向步骤(1)所得的Ⅰ期平菇液体菌种中添加纤维素酶诱导物，继续培养24h，得到Ⅱ期平菇液体菌种；(3)将步骤(2)所得的Ⅱ期平菇液体菌种接种到灭菌菌包，得到平菇菌包，然后将所得平菇菌包发菌。上述技术方案中，接种量根据实际需要量确定，发菌可以在恒温发菌设施设备中(如恒温培养箱、温室、发菌车间)，进行常规的发菌管理。上述的缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法中，优选地，所述步骤(2)中，所述向步骤(1)所得的Ⅰ期平菇液体菌种中添加纤维素酶诱导物的方式为：将所述Ⅰ期平菇液体菌种从所述发酵容器中转移至无菌容器中，然后在所述无菌容器内的Ⅰ期平菇液体菌种中添加灭菌的纤维素酶诱导物；或，在所述发酵容器内的Ⅰ期平菇液体菌种中添加灭菌的纤维素酶诱导物。上述的缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法中，优选地，所述步骤(2)中，所述纤维素酶诱导物是微晶纤维素、纤维二糖、羧甲基纤维素钠、木质素磺酸钠中的任一种。上述的缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法中，优选地，所述步骤(2)中，待纤维素酶诱导物添加完成后，所述Ⅰ期平菇液体菌种中纤维素酶诱导物的浓度为：(a)所述纤维素酶诱导物为微晶纤维素，所述微晶纤维素的浓度为1g/L～5g/L；或，(b)所述纤维素酶诱导物为纤维二糖，所述纤维二糖的浓度是1g/L～5g/L；或，(c)所述纤维素酶诱导物为羧甲基纤维素钠，所述羧甲基纤维素钠的浓度是0.2g/L～1g/L；或，(d)所述纤维素酶诱导物为木质素磺酸钠，所述木质素磺酸钠的浓度是1g/L～2.5g/L。作为一个总的专利技术构思，本专利技术还提供一种上述的缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法在生产平菇菌包中的应用。本专利技术通过先培养平菇液体菌种达到一定的生物量，在菌丝体能正常接种前24h时，向培养物中添加一种纤维素酶诱导物，继续培养24h，使菌丝体受到适宜浓度的纤维素酶诱导物的诱导刺激，以期激活菌丝体细胞中纤维素酶系的相关基因表达或诱导菌丝体分泌出纤维素酶，再用诱导处理的液体菌种接种到灭菌菌包，菌丝体接种物则能迅速利用菌包中的木质纤维素等基质生长，达到缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的效果。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：1、经研究发现，不同于固体菌种中已产生本底浓度较高的木质纤维素水解酶，由于液体菌种中缺乏纤维素酶和漆酶等多种关键酶，将其接种到固体基质中后出现延滞期较长，常常超过3天，若液体菌种接种后菌丝体产生和向基质中分泌的木质纤维素水解酶类的酶量不足，菌丝体也可能会生长缓慢，菌包发菌期较长。本专利技术通过大量的创新性研究，得到一个工艺简单可行的方法：即在将液体菌种培养到一定阶段(即正常接种24h前)，加入纤维素酶诱导物微晶纤维素、纤维二糖、羧甲基纤维素钠或木质素磺酸钠后继续培养24h，能起到非常好的诱导效果，再接种到平菇菌包，与常规未做诱导处理的液体菌种接种的平菇菌包相比，能缩短平菇菌包的发菌期1～4天。2、本专利技术在采用纤维素酶诱导物进行处理及后续培养过程中，可以采用易位操作或原位操作，操作灵活性好，且两种操作方法均简便可行、效果明显。3、本专利技术通过采用微晶纤维素、纤维二糖、羧甲基纤维素钠、木质素磺酸钠作为纤维素酶诱导物，能够达到良好的诱导效果，能够有效缩短平菇菌包的发菌期。4、本专利技术的方法可用于工厂生产平菇菌包，能用于控制缩短工厂化生产平菇菌包的发菌期，可以减少发菌车间的占用时间，提高发菌车间的周转率，从而明显增加企业的经济效益。附图说明图1是接种未做诱导处理得到的Ⅱ期平菇液体菌种的菌包与采用不同浓度的微晶纤维素为诱导物处理得到的Ⅱ期平菇液体菌种所制平菇菌包在发菌期第14天的对比照片。图2是接种未做诱导处理得到的Ⅱ期平菇液体菌种的菌包与采用不同浓度的纤维二糖为诱导物处理得到的Ⅱ期平菇液体菌种所制平菇菌包在发菌期第14天的对比照片。图3是接种未做诱导处理得到的Ⅱ期平菇液体菌种的菌包与采用不同浓度的羧甲基纤维素钠为诱导物处理得到的Ⅱ期平菇液体菌种所制平菇菌包在发菌期第14天的对比照片。图4是接种未做诱导处理得到的Ⅱ期平菇液体菌种的菌包与采用不同浓度的木质素磺酸钠为诱导物处理得到的Ⅱ期平菇液体菌种所制平菇菌包在发菌期第13天的对比照片。具体实施方式以下将结合说明书附图和具体实施例对本专利技术做进一步详细说明。实施例1：一种本专利技术的缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法，包括如下步骤：步骤一，Ⅰ期平菇液体菌种的制备。利用液体菌种专用培养基(大连富森智能科技有限公司提供)按说明书要求配制培养液，盛装到800L液体发酵罐(购于大连富森智能科技有限公司)中，高压蒸汽灭菌后接种400ml平菇(品种名平菇6543)一级摇甁液体菌种，25℃通气培养96h，亦即平时正常放罐接种前24h，得到Ⅰ期平菇液体菌种，通过无菌操作移取发酵罐中的Ⅰ期平菇液体菌种2000ml至无菌容器中(即为易位操作)。步骤二，Ⅰ期平菇液体菌种添加微晶纤维素处理。将步骤一所得的无菌容器中的Ⅰ期平菇液体菌种分装到250ml无菌三角瓶中，装量100ml/瓶。用100ml去离子水溶解5g微晶纤维素，制成浓度为5％(w/v)的微本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法，其特征在于，包括如下步骤:(1)将平菇的一级摇甁液体菌种接种至发酵容器的培养液中，然后进行培养，直至液体菌种的生物量达到正常接种前24h的状态，得到Ⅰ期平菇液体菌种；(2)向步骤(1)所得的Ⅰ期平菇液体菌种中添加纤维素酶诱导物，继续培养24h，得到Ⅱ期平菇液体菌种；(3)将步骤(2)所得的Ⅱ期平菇液体菌种接种到灭菌菌包，得到平菇菌包，然后将所得平菇菌包进行发菌。

【技术特征摘要】
1.一种缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法，其特征在于，包括如下步骤:(1)将平菇的一级摇甁液体菌种接种至发酵容器的培养液中，然后进行培养，直至液体菌种的生物量达到正常接种前24h的状态，得到Ⅰ期平菇液体菌种；(2)向步骤(1)所得的Ⅰ期平菇液体菌种中添加纤维素酶诱导物，继续培养24h，得到Ⅱ期平菇液体菌种；(3)将步骤(2)所得的Ⅱ期平菇液体菌种接种到灭菌菌包，得到平菇菌包，然后将所得平菇菌包进行发菌。2.根据权利要求1所述的缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述向步骤(1)所得的Ⅰ期平菇液体菌种中添加纤维素酶诱导物的方式为：将所述Ⅰ期平菇液体菌种从所述发酵容器中转移至无菌容器中，然后在所述无菌容器中的Ⅰ期平菇液体菌种中添加灭菌的纤维素酶诱导物；或，在所述发酵容器内的Ⅰ期平菇液体菌种中添加灭菌的纤维素酶诱导物。3.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：许爱清，
申请(专利权)人：湖南科技大学，
类型：发明
国别省市：湖南,43