一种制备aromadendrane-4β,10α-diol的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备aromadendrane‑4β,10α‑diol的方法，包括：步骤S1，提取浓缩得到豆荚软珊瑚丙酮浸膏；步骤S2，丙酮浸膏用XDA‑1B大孔树脂富集，先用30％乙醇洗脱，再用65％乙醇洗脱，收集4.5‑5.0BV的65％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物；步骤S3，以乙酸乙酯‑正丁醇‑三氟乙酸‑水为溶剂体系对富集物进行高速逆流分离。本发明专利技术方法不依赖硅胶柱层析和/或凝胶柱层析，应用前景广阔。

A method for the preparation of aromadendrane-4 beta and 10 alpha -diol

The present invention discloses a method for preparing aromadendrane_4 beta, 10 alpha_diol, including: _, extracting and concentrating acetone extract from soft coral of pod; _2, acetone extract concentrating with XDA_1B macroporous resin, first eluting with 30% ethanol, then eluting with 65% ethanol, collecting 65% ethanol eluent of 4.5_5.0BV, concentrating The preconcentration was obtained by drying. The preconcentration was separated by high-speed countercurrent with ethyl acetate n-butanol trifluoroacetic acid water as solvent system. The method does not depend on silica gel column chromatography and / or gel column chromatography, and has broad application prospects.

【技术实现步骤摘要】
一种制备aromadendrane-4β,10α-diol的方法
本专利技术属于医药领域，具体涉及几种药用活性化合物的制备方法。
技术介绍
Alismoxide、ent-spathulenol、4α,10α-aromadendranediol、aromadendrane-4β,10α-diol的化学式如下所示。alismoxide最早被文献(TerpenoidsofAlismaorientalerhizomeandthecrudedrugAlismatisrhizoma.Phytochemistry,1994)公开。ent-spathulenol最早被文献(Threeent-secoaromadendrane-typesesquiterpenehemiacetalsandabicyclogermacrenefromPlagiochilaovalifoliaandPlagiochilayokogurensis.Phytochemistry,1980)公开。4α,10α-aromadendranediol和aromadendrane-4β,10α-diol最早被文献(Sesquiterpenelactonesandasesquiterpenediolfromjamaicanambrosiaperuviana.Phytochemistry,1987)公开。研究发现，Alismoxide、ent-spathulenol、4α,10α-aromadendranediol、aromadendrane-4β,10α-diol具有多种药理活性，成药前景广阔。但是，目前制备Alismoxide、ent-spathulenol、4α,10α-aromadendranediol、aromadendrane-4β,10α-diol的方法无不依赖于硅胶柱层析和/或凝胶柱层析这种无法工业化应用的分离介质，工业化生产难度大。
技术实现思路
本专利技术旨在克服现有技术不足，提供一种不依赖于硅胶柱层析和/或凝胶柱层析的制备Alismoxide、ent-spathulenol、4α,10α-aromadendranediol、aromadendrane-4β,10α-diol的方法。本专利技术包括下面的技术方案：一种制备Alismoxide、ent-spathulenol、4α,10α-aromadendranediol、aromadendrane-4β,10α-diol的方法，包括如下步骤：步骤S1，提取和浓缩：先将豆荚软珊瑚切碎，冷冻干燥，然后将干燥的豆荚软珊瑚用石油醚冷浸提取3次，每次8h，收集豆荚软珊瑚，再用丙酮热回流提取3次，每次2h，收集丙酮提取液，减压浓缩得到豆荚软珊瑚丙酮浸膏；步骤S2，大孔树脂富集：上样和吸附：将XDA-1B大孔吸附树脂装填在长径比为5:1的树脂柱内(每200g豆荚软珊瑚丙酮浸膏使用100g树脂)，制备豆荚软珊瑚丙酮浸膏的粗提物上柱液(溶剂为15％乙醇)，在吸附流速为1.5BV/h的条件下上样，上样结束后关闭树脂柱阀门静置吸附适当时间；洗脱：先用30％乙醇以3BV/h洗脱流速洗脱2h，再用65％乙醇以2BV/h洗脱流速进行洗脱，收集4.5-5.0BV的65％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物；步骤S3，高速逆流分离：将溶剂体系乙酸乙酯-正丁醇-三氟乙酸-水(体积比30:5:1:30)按照比例配好，超声脱气2h，静置0.5h，至上下两相完全分层后，将上下两相分开，然后用塑料薄膜将各容器封好，放置24h，使体系中的气体排尽；取树脂分离浓缩后的富集物0.5g，用上相流动相10mL将其溶解，0.45μm滤膜过滤后作为样液；分离前，先高流速泵入固定相，待固定相充满整个管路后，停泵，启动工作鼓，把转速调至800r/min，以1.5mL/min的速度泵入流动相，待溶剂体系平衡时，进样10mL，继续以1.5mL/min的速度泵入流动相，并启动色谱工作站记录图谱，检测波长225nm，根据色谱图收集Alismoxide、ent-spathulenol、4α,10α-aromadendranediol或aromadendrane-4β,10α-diol对应的洗脱流份。优选地，石油醚冷浸提取的固液比为1:30。优选地，丙酮热回流提取的固液比为1:20。优选地，乙醇浓度指不同体积百分浓度的乙醇水。优选地，粗提物上柱液浓度为1mg/mL。优选地，粗提物上柱液上柱前用脱脂棉过滤。优选地，上样结束后关闭树脂柱阀门静置吸附0.5h。优选地，高速逆流溶剂体系配好后超声脱气2h。优选地，高速逆流溶剂体系超声脱气后静置0.5h。优选地，所述色谱图如图1所示。有益效果：本专利技术方法采用可以工业化大生产的大孔吸附树脂结合高速逆流色谱分离制备得到高纯度的(纯度大于98％)alismoxide、ent-spathulenol、4α,10α-aromadendranediol、aromadendrane-4β,10α-diol，不依赖于硅胶柱层析和/或凝胶柱层析，应用前景广阔。附图说明图1为高速逆流分离色谱图；图2为alismoxide对应洗脱流份与alismoxide标准品的HPLC保留时间比对；图3为ent-spathulenol对应洗脱流份与ent-spathulenol标准品的HPLC保留时间比对；图4为4α,10α-aromadendranediol对应洗脱流份与4α,10α-aromadendranediol标准品的HPLC保留时间比对；图5为aromadendrane-4β,10α-diol对应洗脱流份与aromadendrane-4β,10α-diol标准品的HPLC保留时间比对。具体实施方式下面结合附图和实施例具体介绍本
技术实现思路
。豆荚软珊瑚(Lobophytumsp.)采自我国海南三亚西岛海域水下20m处，立即冷冻备用。TBE-300型高速逆流色谱仪购自上海同田生化技术有限公司。制备Alismoxide、ent-spathulenol、4α,10α-aromadendranediol、aromadendrane-4β,10α-diol的方法包括如下步骤：步骤S1，提取和浓缩：先将豆荚软珊瑚切碎，冷冻干燥，然后将干燥的豆荚软珊瑚用石油醚冷浸提取3次(固液比为1:30)，每次8h，收集豆荚软珊瑚，再用丙酮热回流提取3次(固液比为1:20)，每次2h，收集丙酮提取液，减压浓缩得到豆荚软珊瑚丙酮浸膏；步骤S2，大孔树脂富集：上样和吸附：将XDA-1B大孔吸附树脂装填在长径比为5:1的树脂柱内(每200g豆荚软珊瑚丙酮浸膏使用100g树脂)，制备豆荚软珊瑚丙酮浸膏浓度为1mg/mL的粗提物上柱液(溶剂为15％乙醇，体积百分浓度，下同；上柱前用脱脂棉过滤)，在吸附流速为1.5BV/h的条件下上样，上样结束后关闭树脂柱阀门静置吸附0.5h；洗脱：先用30％乙醇以3BV/h洗脱流速洗脱2h，再用65％乙醇以2BV/h洗脱流速进行洗脱，收集4.5-5.0BV的65％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物；步骤S3，高速逆流分离：将溶剂体系乙酸乙酯-正丁醇-三氟乙酸-水(体积比30:5:1:30)按照比例配好，超声脱气2h，静置0.5h，至上下两相完全分层后，将上下两相分开本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种aromadendrane‑4β,10α‑diol，其特征在于，化学结构如下：

【技术特征摘要】
1.一种aromadendrane-4β,10α-diol，其特征在于，化学结构如下：2.一种制备aromadendrane-4β,10α-diol的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1，提取和浓缩：先将豆荚软珊瑚切碎，冷冻干燥，然后将干燥的豆荚软珊瑚用石油醚冷浸提取3次，每次8h，收集豆荚软珊瑚，再用丙酮热回流提取3次，每次2h，收集丙酮提取液，减压浓缩得到豆荚软珊瑚丙酮浸膏；步骤S2，大孔树脂富集：上样和吸附：将XDA-1B大孔吸附树脂装填在长径比为5:1的树脂柱内(每200g豆荚软珊瑚丙酮浸膏使用100g树脂)，制备豆荚软珊瑚丙酮浸膏的粗提物上柱液(溶剂为15％乙醇)，在吸附流速为1.5BV/h的条件下上样，上样结束后关闭树脂柱阀门静置吸附适当时间；洗脱：先用30％乙醇以3BV/h洗脱流速洗脱2h，再用65％乙醇以2BV/h洗脱流速进行洗脱，收集4.5-5.0BV的65％乙醇洗脱液，浓缩干燥得富集物；步骤S3，高速逆流分离：将溶剂体系乙酸乙酯-正丁醇-三氟乙酸-水(体积比30:5:1:30)按照比例配好，超声脱气2h，静置0.5h，至上下两相完全分层后，将上下两相分开，然后用塑料薄膜将各容器封好，放置24h，使体系中的气体排尽；...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚小青，
申请(专利权)人：龚小青，
类型：发明
国别省市：江苏,32