一种猪圆环病毒3型毒株、及其疫苗组合物、制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种猪圆环病毒3型病毒毒株，以及该毒株的免疫原性物质制备的疫苗组合物，该猪圆环病毒3型病毒株免疫原性好，其制备的疫苗组合物能针对不同来源的猪圆环病毒3型病毒提供完全的保护。

【技术实现步骤摘要】
一种猪圆环病毒3型毒株、及其疫苗组合物、制备方法和应用
本专利技术涉及一种毒株、制备的疫苗组合物、制备方法和应用，属于动物病毒学领域。
技术介绍
猪圆环病毒(Porcinecircoviruses，PCV)是单股环状的DNA病毒，基因组长度约为1.7kb，是最小的动物DNA病毒之一。已经确定有两种类型的PCV，即猪圆环病毒1型(PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)。PCV1于1974年首次在PK细胞培养物中作为一种污染物鉴定而发现，其对猪只没有致病性。PCV2于1998年首次报道，其在临床条件下能引起猪只的猪圆环病毒相关疾病(Porcinecircovirusassociateddiseases，PCVAD)，主要引起仔猪多系统衰竭综合征，肺炎,猪皮炎和肾病综合征和繁殖障碍，主要表现为呼吸、泌尿、肠道、淋巴、心血管、神经、繁殖系统以及皮肤的功能紊乱，对全世界的生猪养殖造成了重大的经济损失。然而，在一起猪的繁殖障碍病例中，分离到一株病毒基因组为2.0kb的圆环病毒，经后续试验证实，其与已知的圆环病毒无论在核苷酸还是氨基酸序列的同源性均小于50％，根据国际病毒学分类委员会的标准，圆环病毒属中同一种的病毒应该具有＞75％的基因组核苷酸序列的同源性，Cap蛋白＞70％的氨基酸序列的同源性，因此可以肯定这是一种新的猪圆环病毒。其能引起猪的皮炎肾病综合征、繁殖障碍及心脏和多系统的炎症反应，因此针对该新病毒制备新的疫苗，对猪场疾病控制十分重要。
技术实现思路
为解决现有技术的不足，本专利技术提供一种预防和/或治疗新型猪圆环病毒感染的疫苗组合物，该疫苗组合物能对新型猪圆环病毒提供有效的保护，显示出显著的免疫特性。为此，本专利技术的一个目的在于提供一种猪圆环病毒3型毒株，其制备的疫苗组合物能有效保护流行株的攻击，且针对不同来源的猪圆环病毒3型提供完全的保护。本专利技术的另一个目的在于提供一种预防和/或治疗新型猪圆环病毒感染的疫苗组合物，所述疫苗组合物包含免疫量的猪圆环病毒3型抗原以及载体。本专利技术的另一个目的是提供一种猪圆环病毒3型灭活疫苗的制备方法，包括：步骤(1)增殖猪圆环病毒3型；步骤(2)灭活，加入佐剂，乳化。本专利技术的另一个目的在于提供上述疫苗组合物在制备预防和/或治疗猪圆环病毒3型相关疾病的药物中的应用。专利技术优点：(1)本专利技术毒株具有良好的免疫原性，能够刺激机体快速地产生免疫力，有效保护流行株的攻击，具有很好的保护作用；(2)本专利技术首次采用目前新的猪圆环病毒3型流行的毒株制备的疫苗组合物，能以较低的抗原含量达到较好的免疫保护作用，进一步降低生产成本；(3)本专利技术的疫苗，能针对不同地域来源的猪圆环病毒3型毒株提供完全保护，具有广谱的保护能力；(4)本专利技术的疫苗，能针对已经感染了猪圆环病毒3型病毒并表现初期临床症状的猪提供治疗作用。具体实施方式以下，对本专利技术的实施方式进行说明。猪圆环病毒3型为基因组2.0kb的圆环病毒，其与已知的圆环病毒无论在核苷酸还是氨基酸序列的同源性均小于50％，是一种新的猪圆环病毒，其能引起猪的皮炎肾病综合征、繁殖障碍及心脏和多系统的炎症反应。本专利技术的一个目的在于提供猪圆环病毒3型SG株(PorcineCircovirustype3，strainSG)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO.V201712，保藏日期为2017年3月23日，保藏地址：中国武汉·武汉大学。针对猪圆环病毒3型制备的疫苗组合物，可以包含免疫量的猪圆环病毒3型或其培养物的灭活抗原、减毒全病毒抗原、亚单位抗原或合成肽抗原、含有编码亚单位抗原蛋白的基因的可独立复制的载体以及药学上可以接受的载体。“培养物”是病毒的不同代次传代培养物，本领域技术人员知晓不同代次之间其基因序列仅可能会发生微小的变异。“疫苗组合物”指含有猪圆环病毒3型免疫原性的药物组合物。该药物组合物可诱发、刺激或增强猪只针对猪圆环病毒3型的免疫反应。“灭活抗原”，也称作失活疫苗，指的是用作抗原以产生免疫力的灭活病毒的混悬液。灭活疫苗的例子包括全病毒疫苗和裂解型疫苗。使用已知方法可以很容易地产生灭活疫苗。例如，通过用甲醛溶液处理病毒可获得全病毒灭活疫苗。裂解型疫苗可在用醚处理后由病毒包膜制备得到。“减毒全病毒抗原”指的是以毒力已经减弱但仍可在宿主体内或细胞上复制的病毒。本专利技术所用的术语“减毒”用于指以使病原丧失致病性、但保持免疫原性的方式对基因进行突变来人工降低病原体毒性。通常，通过UV辐射、化学处理或体外连续高阶继代培养实现减毒。人工的基因改变，例如将已知序列中的特定核苷酸缺失以使毒力减弱。“亚单位抗原”指的是利用基因工程方法将病原体的保护性抗原基因克隆到原核或真核表达系统中，使其高效表达而制成的抗原。它比全病毒抗原引起副反应的可能性小。“合成肽抗原”指的是一种仅含免疫决定簇组分的小肽,即用人工方法按天然蛋白质的氨基酸顺序合成保护性短肽,与载体连接后加佐剂所制成的抗原。“含有编码亚单位抗原蛋白的基因的可独立复制的载体”指的是非致病微生物通过基因工程的方法使之携带并表达某种抗原或抗原决定簇的基因，产生免疫原性；也可以是编码某种抗原蛋白的外源蛋白的外源基因直接导入动物体内，并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗的目的。含有编码亚单位抗原蛋白的基因的可独立复制的载体可以为活载体或质粒。“活载体”指的是非致病微生物通过基因工程的方法使之携带并表达某种抗原或抗原决定簇的基因，产生免疫原性，非致病微生物可以是细菌和病毒，病毒活载体常作为载体的病毒有痘苗病毒、禽痘病毒、火鸡疱疹病毒、腺病毒、伪狂犬病毒、反转录病毒、慢病毒；细菌活载体可以是减毒沙门菌、卡介苗、减毒单核细胞李氏杆菌、减毒霍乱弧菌、减毒志贺氏菌、乳酸球菌、芽胚乳酸杆菌、高氏链球菌。“质粒”指的是含有外源抗原编码基因的真核表达载体，其具有特定的启动子启动外源基因在动物体内高水平表达，其有多种种类，但多以PUC或pBR322为基本骨架，这些载体均具有增强子、启动子、载体的选择标记、翻译起始序列、转录终止序列和PolyA等元件，其上的外源抗原基因能够诱发机体产生保护性免疫。本专利技术涉及一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包含免疫量的所述的猪圆环病毒3型SG株或其培养物的灭活抗原、减毒全病毒抗原、亚单位抗原或合成肽抗原、以及含有编码亚单位抗原蛋白的基因的可独立复制的载体以及药学上可以接受的载体。本专利技术涉及一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫量的所述猪圆环病毒3型SG株或其培养物的灭活抗原和药学上可以接受的载体。作为本专利技术的一种实施方式，本专利技术的疫苗组合物中，所述猪圆环病毒3型SG株或其培养物的灭活抗原为猪圆环病毒3型病毒SG株灭活全病毒抗原。作为本专利技术的一种实施方式，本专利技术的疫苗组合物中，所述猪圆环病毒3型SG株或其培养物的灭活抗原为猪圆环病毒3型病毒SG株裂解型抗原。本专利技术的组合物的成分或组分的量优选地是治疗有效量。所述治疗有效量是指在组合物施用的宿主中发挥它们的免疫学作用而不导致过度副作用所必需量。所用的成分和待施用的组合物的精确的量将根据因素如治疗的疾病的类型，待治疗的动物的类型和年龄，施用的方式，以及组合物中的其它成分而变化。作为本专利技术的一种实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.猪圆环病毒3型SG株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO.V201712，保藏日期为2017年3月23日，保藏地址：中国武汉·武汉大学。

【技术特征摘要】
1.猪圆环病毒3型SG株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO.V201712，保藏日期为2017年3月23日，保藏地址：中国武汉·武汉大学。2.一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫量的所述猪圆环病毒3型SG株或其培养物的灭活抗原和药学上可以接受的载体。3.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中，所述猪圆环病毒3型SG株或其培养物的灭活抗原为猪圆环病毒3型病毒SG株灭活全病毒抗原。4.根据权利要求3所述的疫苗组合物，其中，所述猪圆环病毒3型SG株灭活全病毒抗原或其培养物的含量为灭活前≥105.0TCID50/ml。5.根据权利要求3所述的疫苗组合物，其中，所述猪圆环3型病毒SG株或其培养物的灭活全病毒抗原含量为灭活前105.0～107.0TCID50/ml。6.根据权利要求3所述的疫苗组合物，其中，所述猪圆环病毒3型SG株或其培养物的灭活全病毒抗原含量为灭活前106.0TCID50/ml。7.根据权利要求2或3所述的疫苗组合物，其中，所述猪圆环病毒3型SG株的培养物为≥1代次；优选地，所述猪圆环病毒3型SG株的培养物为≥5代次；更优选地，所述猪圆环病毒3型SG株的培养物为5～55代次。8.根据权利要求2或3所述的疫苗组合物，其中，所述药学上可接受的载体包括佐剂，所述佐剂包括(1)氢氧化铝、皂苷、阿夫立定、DDA，(2)丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基衍生物的聚合物，(3)水包油乳剂、油包水乳剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：田克恭，李向东，孙进忠，张许科，
申请(专利权)人：普莱柯生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41