The invention discloses a double PCR microsatellite marker for identifying the genetic relationship of Chinese sturgeon and its application, belonging to the field of animal molecular genetics. The invention provides a double PCR microsatellite marker for Chinese sturgeon and an application method for identifying the genetic relationship among Chinese sturgeon individuals by using the marker. The microsatellite marker provided by the invention can quickly identify the relationship between individuals and avoid inbreeding among individuals. The microsatellite marker amplification result provided by the invention has high polymorphism and stability, and the dual PCR microsatellite marker provided by the invention consumes half of the financial and human resources compared with the traditional PCR reaction, and has great practical value.
【技术实现步骤摘要】
用于鉴定中华鲟亲缘关系的双重PCR微卫星标记及其鉴定方法
本专利技术涉及一种用于鉴定中华鲟亲缘关系的双重PCR微卫星标记及其应用,属于动物分子遗传学领域。
技术介绍
中华鲟是全世界20余种鲟科鱼类中分布纬度最低,体型最大的鱼,为我国特有的的物种。上世纪70年代,长江里的繁殖群体能达到1万余尾,由于环境污染、过度捕捞、栖息地丧失等诸多因素中华鲟已濒临灭绝。对濒危物种的保护不仅保护濒危物种的个体而且对濒危物种的基因也有进行了解和保护,进而制定良好的育种政策,防止近亲繁殖。但是直至今日对中华鲟的遗传性研究十分有限,急需从分子方向对中华鲟进行研究。微卫星标记是目前研究濒危动物保护遗传学中最理想的一类方式,微卫星具有多态性高、共显性遗传、遍布整个基因组等优势,广泛应用于动物遗传性研究。微卫星标记多重PCR是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应。多重PCR具有高效性、系统性、经济简便性等优点。有关中华鲟的微卫星标记多重PCR国内外未见报道。本专利技术利用5组中华鲟微卫星标记的双重PCR反应体系实现了对中华鲟个体之间的亲缘关系的测量进而确定个体之间的亲缘关系,为中华鲟的遗传管理、人工繁殖配种制定、遗传背景分析提供了坚实的技术支持。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于鉴定中华鲟亲缘关系的双重PCR微卫星标记及其在鉴定个体之间亲缘关系的应用方法。技术方案用于鉴定中华鲟亲缘关系的双重PCR微卫星标记及其应用的双重PCR微卫星标记引物如下:用于鉴定中华鲟亲缘关系的双重PCR微卫星标记及其应用,其步骤为:取中华鲟组织样品;提取中华鲟样品 ...
【技术保护点】
1.用于鉴定中华鲟亲缘关系的双重PCR微卫星标记,其特征在于,所述的双重PCR微卫星标记引物如下:
【技术特征摘要】
1.用于鉴定中华鲟亲缘关系的双重PCR微卫星标记,其特征在于,所述的双重PCR微卫星标记引物如下:2.采用权利要求1所述的用于鉴定中华鲟亲缘关系的双重PCR微卫星标记的应用,其特征在于,鉴定中华鲟亲缘关系的应用具体方法如下:取中华鲟组织样品,提取中华鲟样品DNA;利用权利要求1所示的微卫星位点对中华鲟样品DNA进行PCR扩增;把PCR扩增产物在聚丙烯酰胺胶上进行电泳分离;根据分离结果统计个体在所有微卫星位点中PCR扩增产物的基因型;根据个体的基因分型结果用NTsys软件画出各个个体之间的聚类分析图,确定个体之间的亲缘关系。3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,PCR反应体系是25ul:10×PCRBuffer2-3ul,2.5mmol/LdNTP0.1-1ul,MgCl21-2ul,反应体系中两对引物的上下游引物各0.5-1.5ul,Taq酶0.1-0.5ul,DNA模板1-5ul...
【专利技术属性】
技术研发人员:胡亚成,杜合军,杨菁,刘雪清,肖衎,
申请(专利权)人:中国长江三峡集团公司中华鲟研究所,
类型:发明
国别省市:湖北,42
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。