A rapid screening method for inhibitors of the Keap1 Nrf2 ARE pathway is described in which the cysteine residue of Keap1 is modified to cause Nrf2 to accumulate in the nucleus and express the target gene of Nrf2. Under normal conditions, Nrf2 binds to Keap1 and exists in cells. When oxidative stress occurs, the cysteine residue of Keap1 is modified, which results in the release of Nrf2 into the nucleus and promotes the expression of target gene after binding with ARE. The inducer can not dissociate Keap1_Nrf2 and Nrf2 can be ubiquitinated. After degradation, Keap1 binds Cul3 and Kelch to Nrf2 through its BTB region and connects Nrf2 to E3 complex, which transfers ubiquitin from E3 to Nrf2 lysine residue, that is, between ETGE and DLG motifs, and ubiquitinated Nrf2 is rapidly degraded. When oxidative stress occurs, certain cysteine residues of Keap1 are modified, resulting in conformational changes, and the affinity of DLG motif to Keap1 is weakened and separated, which is called hinge and latch model, thus avoiding ubiquitination degradation.
【技术实现步骤摘要】
一种Keap1-Nrf2-ARE通路抑制因子的快速筛选方法
本专利技术涉及的是一种Keap1-Nrf2-ARE通路抑制因子的快速筛选方法。
技术介绍
癌症发生以后Keap1-Nrf2通路的高表达或过度积累会降低化疗或放疗引起的过度氧化应激对肿瘤细胞的伤害,帮助其抵抗化学药物或放射治疗,有利于肿瘤细胞的存活并促进其生长。此外,在肿瘤发生之后或在恶性肿瘤中Nrf2的过度激活会引起肿瘤细胞对化疗或放射疗法的抵抗和耐受性、导致患者预后不良。由此看来,肿瘤一旦发生,Nrf2因子在细胞内积累,不但不利于肿瘤的预防,反而会增强肿瘤细胞的耐药性并促进其生长,不利于肿瘤的治疗和患者的康复。因此,Keap1-Nrf2-ARE通路抑制因子的快速筛选方法具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的不足,而提供一种可以快速、高效的筛选出具有Nrf2抑制作用的活性因子的、通过Nrf2抑制因子的发现为肿瘤的预防和治疗提供新方法的Keap1-Nrf2-ARE通路抑制因子的快速筛选方法。本专利技术的目的是通过如下技术方案来完成的,一种Keap1-Nrf2-ARE通路抑制因子的快速筛选方法,所述的快速筛选方法是:修饰Keap1的半胱氨酸残基,使Nrf2在细胞核内积聚,并且表达Nrf2的靶基因。作为优选:在正常条件下,Nrf2与Keap1结合,存在于细胞之中,发生氧化应激时,Keap1的半胱氨酸残基被修饰,改变构象导致Nrf2释放出来,进入细胞核中,与ARE结合后,促进靶基因的表达。作为优选:诱导剂无法使Keap1-Nrf2解离,并且Nrf2可以经泛素化后降解;Keap1通 ...
【技术保护点】
1.一种Keap1‑Nrf2‑ARE 通路抑制因子的快速筛选方法,其特征在于;所述的快速筛选方法是:修饰Keap1的半胱氨酸残基,使Nrf2在细胞核内积聚,并且表达Nrf2的靶基因。
【技术特征摘要】
1.一种Keap1-Nrf2-ARE通路抑制因子的快速筛选方法,其特征在于;所述的快速筛选方法是:修饰Keap1的半胱氨酸残基,使Nrf2在细胞核内积聚,并且表达Nrf2的靶基因。2.根据权利要求1所述的Keap1-Nrf2-ARE通路抑制因子的快速筛选方法,其特征在于:在正常条件下,Nrf2与Keap1结合,存在于细胞之中,发生氧化应激时,Keap1的半胱氨酸残基被修饰,改变构象导致Nrf2释放出来,进入细胞核中,与ARE结合后,促进靶基因的表达。3.根据权利要求1所述的Keap1-Nrf2-ARE通路抑制因子的快速筛选方法,其特征在于:...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。